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酶水解海蟹加工下脚料制备调味品原料被引量：13: 2009年; 以海蟹加工下脚料为原料,通过单因素及正交试验,结合免疫检测、氨基酸及多肽分析等研究蛋白酶水解海蟹下脚料制备调味品原料。蛋白酶水解海蟹下脚料粉碎样的优化组合条件为温度45℃、加酶量4500U/g、时间5h;蛋白酶水解海蟹下脚料蒸煮浓缩液的优化组合条件为温度60℃、加酶量4000U/g、时间3h。免疫胶体金层析检测结果表明,水解液中原肌球蛋白被彻底分解,无过敏原性;水解液中多肽分子质量在78～24711Da之间占90.6%,水解液的蛋白含量13.32%,游离氨基酸总量51.75mg/g,7种人体必需氨基酸(色氨酸未检测)占49.12%,含量约25.42mg/g。柠檬酸与苹果酸之比为2:1时水解产物脱腥效果较优。喷雾干燥产品的得率为5.25%,冷冻干燥产品的得率为21.17%。所制备的低过敏原性海蟹调味品原料(酶解蛋白液和蛋白粉)可添加在各类食品中。; 刘光明曹敏杰袁静静翁凌方忠兴苏文金; 关键词：蛋白酶水解免疫检测原肌球蛋白

锯缘青蟹主要过敏原的纯化与鉴定被引量：9: 2010年; 以锯缘青蟹为研究对象,从免疫鉴定、分离纯化、抗体制备和免疫学分析等方面对其主要过敏原进行研究。首先利用过敏者血清的免疫印迹法,确定锯缘青蟹的主要过敏原为分子量约38kD的蛋白。然后通过制备丙酮粉、等电点沉淀、硫酸铵沉淀及加热处理对分子量为38kD的主要过敏蛋白进行了高度纯化。该蛋白的pI约为4.5,与虾的原肌球蛋白Pena1性质相近,证实了锯缘青蟹的主要过敏原为原肌球蛋白。通过免疫新西兰大白兔,制备了原肌球蛋白的抗血清,采用Protein A Sepharose亲和层析柱对动物抗体进行了纯化。该抗血清效价高,经4×105倍稀释后仍能与抗原进行反应。该抗体与甲壳类动物及软体动物的原肌球蛋白具有较强的免疫交叉反应,可用于食品过敏原检测。; 刘光明梁银龙翁凌苏文金黄园园曹敏杰; 关键词：锯缘青蟹原肌球蛋白纯化

鲤鱼过敏原(胶原蛋白)的体外模拟消化被引量：10: 2010年; 首先采用酸法提取纯化鲤鱼过敏原（胶原蛋白）,依据美国药典提供的模拟胃液、肠液配方,分别利用胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对纯化的胶原蛋白进行酶解消化,以SDS-PAGE和免疫印迹分析测定纯化的胶原蛋白在体外模拟胃液、肠液中的消化稳定性及免疫原性.结果表明,鲤鱼胶原蛋白经模拟胃液（胃蛋白酶）消化15min出现较为明显的降解,消化1h的产物仍具有一定的免疫原性;经模拟肠液（胰蛋白酶）消化30min出现较为明显的降解,消化3h的产物仍具有一定的免疫原性;经模拟肠液（胰凝乳蛋白酶）消化1～4h均未出现明显降解,其消化产物仍具有较强的免疫原性.结果提示,鲤鱼胶原蛋白的耐消化性及免疫原性可能是导致食物性过敏反应的重要原因.; 刘光明钟永嘉曹敏杰蔡秋凤张凌晶苏文金; 关键词：鲤鱼胶原蛋白 SDS-PAGE 免疫印迹

锯缘青蟹原肌球蛋白过敏者血清的筛选被引量：2: 2010年; 为了解集美大学学生的饮食及食物过敏情况,对在校学生进行了问卷调查.调查共分发了4 000份,主要涉及水产品食物过敏的种类、过敏症状等.调查收到有效问卷3 890份,应答率为97.3%.自诉过敏的学生为1 149人,约占29.5%.对水产品食物过敏的有545人(占自诉过敏的47.4%),其中31例经ELISA检测,IgE为对蟹的原肌球蛋白呈阳性反应(占水产品食物过敏的5.7%,占蟹过敏的11.3%).男女之间无统计学差异.自诉对蟹、虾、贝、鱼等水产品的过敏症状相似,多为皮疹和皮肤瘙痒.调查结果表明,蟹、虾、贝类和鱼是主要的水产品过敏食物.食物过敏症患者血清食物过敏原特异性IgE升高明显,采用ELISA检测法,方便,安全,准确,对临床确诊与防治食物过敏症有重要意义.; 李兵刘光明蔡秋凤黄园园苏文金曹敏杰; 关键词：食物过敏水产品 ELISA

虾蟹类食物过敏者血清的筛选与鉴定被引量：1: 2010年; 近年来食物过敏性疾病呈上升趋势,虾蟹等甲壳类动物是联合国粮农组织公布的八大食物过敏原之一,虾蟹类过敏严重影响过敏人群的身体健康和生活质量。通过纯化虾和蟹过敏蛋白对集美大学新生血清进行ELISA筛选分析,以期获得对虾和蟹过敏的阳性血清。结果通过问卷调查收集到了397份自诉虾蟹过敏者血清,用硫酸铵盐析、等电点沉淀和沸水浴加热的方法从南美白对虾中纯化到了电泳纯的原肌球蛋白,并用兔抗锯缘青蟹原肌球蛋白的Western-blot进行了检测确认;用硫酸铵盐析和High-Q柱层析方法从锯缘青蟹中纯化到了电泳纯的精氨酸激酶,并用鼠抗白虾精氨酸激酶的Western-blot进行了检测确认;然后利用2种纯化蛋白的ELISA分析397份自诉虾蟹过敏者血清,从中筛选获得28份对原肌球蛋白呈阳性反应的血清,21份对精氨酸激酶呈阳性反应的血清,最后采用Dot-blot实验对筛选阳性反应的血清进行了确认。; 沈苑饶世涛曹敏杰李兵蔡秋凤刘光明; 关键词：原肌球蛋白锯缘青蟹精氨酸激酶免疫检测

辐照处理对蟹类过敏原(原肌球蛋白)性质的影响被引量：18: 2009年; 食物过敏是当前食品安全领域较为突出的问题，辐照作为食物过敏原的加工处理方法之一,引起了学者的重视．作者对中华绒鳌蟹和三疣梭子蟹的主要过敏原（原肌球蛋白）进行了辐照处理，并分析了辐照处理对原肌球蛋白性质的影响．十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示，部分纯化的蟹类原肌球蛋白经7kGy辐照处理后出现明显降解,10kGy辐照处理后完全降解；蟹类过敏者血清的免疫印迹分析结果显示．部分纯化原肌球蛋白经3～7kGy辐照处理后的过敏原性无明显变化．而10kGy辐照处理后的过敏原性降低；兔抗锯缘青蟹原肌球蛋白抗体的免疫胶体金层析检测结果证实部分纯化原肌球蛋白经10kGy辐照处理后的抗原性为阴性．但是．3～10kGy辐照处理对整蟹原肌球蛋白及其过敏原性无明显影响。模拟胃液消化反应结果也表明3～10kGy辐照处理对整蟹原肌球蛋白的酶解消化特性无明显影响．; 刘光明王玉松黄园园曹敏杰张凌晶苏文金; 关键词：蟹类原肌球蛋白辐照处理免疫检测

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国家自然科学基金(30871947)