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雌激素对人脐带来源间充质细胞骨架和超微结构的影响被引量：2: 2011年; 目的研究在17β-雌二醇(E2)作用下人脐带间充质干细胞骨架、超微结构的形态学变化,并分析其骨架蛋白的表达情况及其可能的机制。方法用三酶法分离培养人脐带间充质干细胞,流式细胞仪检测所得细胞表型。E2处理48h后,用激光共聚焦显微镜观察肌动蛋白和纽蛋白的表达情况;用透射电子显微镜观察细胞超微结构的变化。结果分离得到的人脐带间充质干细胞纯度达到95%以上;E2对肌动蛋白的形成和分布没有影响,但使纽蛋白的分布集中于核周;在E2作用下,人脐带间充质干细胞出现老化,自噬体增多,线粒体出现代偿性增加。结论 E2能改变人脐带间充质干细胞的细胞骨架和超微结构,从而可能影响其功能。; 赵叶琳赵晓寅孙凌云侯亚义; 关键词：雌激素类间质干细胞细胞骨架

Poly(I:C)影响间充质干细胞的成骨分化及其对树突状细胞的作用被引量：1: 2013年; 目的:间充质干细胞(MSC)能够表达Toll样受体(TLR),但TLR配体刺激对MSC的影响依然存在争议。本研究分析了TLR3配体刺激对脐带MSC表型、细胞增殖、凋亡、成骨分化和功能的影响。方法:用混合酶法分离培养了人脐带来源的MSC;用流式细胞仪分析了TLR3配体——Poly(I:C)刺激后MSC表面标志CD29、CD44、CD105、CD31、CD117和CD45表达的变化;用CCK-8和Annexin-V/PI法分别检测了不同浓度Poly(I:C)刺激24及48小时后MSC的增殖和凋亡情况;进一步分析了Poly(I:C)对MSC成骨分化的影响。此外在Poly(I:C)和MSC存在时,流式检测了DC成熟表面标志CD40、CD86、MHCⅡ的表达,DC对右旋糖酐的吞噬,混合淋巴实验检测了DC的抗原递呈能力。结果:Poly(I:C)的刺激不影响MSC的表型和增殖;只有高浓度组的Poly(I:C)刺激引起MSC的凋亡;Poly(I:C)抑制成骨相关基因RUNX2、ALP和OC的表达,抑制MSC的成骨分化;Poly(I:C)存在的情况下,MSC下调DC成熟表面标志CD40、CD86和MHCⅡ的表达,增强DC对右旋糖酐的吞噬能力,并抑制DC对T的活化作用。结论:Poly(I:C)能够影响MSC的成骨分化及免疫调节功能,提示TLR3信号的活化可能在成骨分化中发挥作用。; 赵晓寅刘丹刘柳侯亚义; 关键词：间充质干细胞成骨分化树突状细胞

17β-雌二醇通过microRNA-29b调节NK细胞干扰素γ的分泌被引量：2: 2012年; 目的:研究17β-雌二醇(E2)对人自然杀伤细胞株NK92中干扰素γ(IFN-γ)分泌的影响及其可能的机制。方法:用E2和poly I:C处理NK92细胞,分别在4、8、12和24小时后用实时定量PCR、酶联免疫吸附法和流式细胞术测定NK92细胞中IFN-γ的表达情况,用实时定量PCR检测microRNA-29b(miR-29b)的变化。进一步,构建含有IFN-γ3'UTR的pEGFP-C1质粒,并转染pre-29b和pEGFP-IFN-γ3'UTR质粒至HEK293A细胞中,用流式细胞术检测绿色荧光蛋白(GFP)的变化。结果:E2抑制NK92细胞的IFN-γ分泌和上调miR-29b的表达;miR-29b能够直接靶向调节IFN-γ3'UTR mRNA。结论:E2可能通过调节NK92的miR-29b而影响IFN-γ的分泌水平,进而影响其免疫功能。; 李鹏飞郭葳赵俊丽王亚平胡娅莉侯亚义; 关键词：17Β-雌二醇 IFN-Γ

microRNA调控卵巢颗粒细胞的作用及机制研究进展被引量：2: 2012年; microRNA(miRNA)是一类非编码RNA,能通过对靶基因的调控,调节细胞的增殖、发育和功能。研究发现,miRNA在卵巢颗粒细胞的发育、排卵期功能调节、性腺激素合成能力以及黄体化过程中发挥重要的作用。本文综述了miRNA在生理和病理条件下对卵巢颗粒细胞功能的影响及其机制的研究,旨在为临床提供治疗卵巢疾病的新策略。; 蒋天暐窦环赵光锋; 关键词：微小RNA 非编码RNA 卵巢颗粒细胞

雌激素通过miR-146a影响间充质干细胞的免疫调节功能: 2012年; 本研究用混合酶法分离培养人脐带间充质干细胞(MSC),检测在不同浓度17β-雌二醇(E2)作用下MSC中MicroR-NA的表达情况。进一步通过转染使MSC高表达miR-146a,并分析转染后MSC的表型、功能及相关因子的表达变化。结果显示,E2处理的MSC中IFN-β的表达没有发生明显变化,STAT1与IDO1的表达显著下调。同时,E2处理能够上调MSC对miR-146a的表达,降低其对miR-23b和miR-21的表达。miR-146a转染不影响MSC的表型,而显著降低STAT1和IDO的表达。提示E2可能通过影响MSC内miR-146a的表达改变其免疫调节功能。; 赵晓寅赵叶琳刘柳侯亚义; 关键词：雌激素间充质干细胞 MIR-146A

IL-1β通过诱导TLR4表达增强协同LPS刺激引起的狼疮小鼠B细胞的功能异常被引量：5: 2012年; 目的:探索IL-1β对SLE模型小鼠脾脏B细胞功能的影响。方法:磁珠分选纯化正常小鼠及SLE模型小鼠脾脏B细胞。用不同浓度的IL-1β或LPS联合IL-1β处理分选的B细胞后,CCK8检测B细胞增殖情况,流式细胞仪检测B细胞的活化及TLR4的表达,实时定量PCR方法分析细胞因子的表达。结果:获得的B细胞纯度高达95%。IL-1β不影响正常小鼠和SLE小鼠脾脏B细胞的增殖,也不影响共刺激分子CD80和CD86的表达。但IL-1β可上调SLE小鼠B细胞中CD40、CD69、IL-6及IL-10的表达。进一步,IL-1β与LPS协同可增强SLE小鼠B细胞的CD40及CD69表达。IL-1β还可上调SLE小鼠B细胞中TLR4的表达。结论:IL-1β可能通过诱导TLR4表达来增强LPS刺激引起的SLE小鼠的B细胞功能异常,提示控制感染和抑制炎症可能达到减缓SLE病程的目的。; 樊竑冶赵光锋刘飞王建军侯亚义; 关键词：IL-1Β B细胞

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国家自然科学基金(81072410)