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肺炎支原体荚膜多糖与DC-SIGN结合并促进IL-10的分泌被引量：8: 2013年; 目的研究肺炎支原体(Mp)荚膜多糖(CPS)与树突状细胞(DC)特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素分子(DC-SIGN,CD209)的相互作用及其对未成熟DC(iDC)分泌IL-10和IL-12的影响。方法提取并纯化Mp的CPS和脂质相关膜蛋白(LAMPs),用间接免疫荧光检测CPS与DC-SIGN受体的作用;ELISA法检测CPS和LAMPs作用后iDC所分泌的IL-10,IL-12水平。结果间接免疫荧光可见Mp CPS可结合到DC表面,且DC-SIGN的特异性封闭抗体可阻断CPS与DC的结合;ELISA检测发现CPS与LAMPs共孵育可促进DC分泌IL-10(P<0.05),而IL-12的表达水平刺激前后无统计学的差异。结论 Mp的CPS可识别并结合DC的DC-SIGN受体,并促进未成熟DC分泌IL-10。; 刘紫玲游晓星彭志平张慧丽高顺利曾焱华余敏君朱翠明; 关键词：肺炎支原体荚膜多糖树突状细胞 IL-10

肺炎支原体脂质相关膜蛋白在动脉粥样硬化发生发展中的作用机制被引量：6: 2012年; 目的研究肺炎支原体脂质相关膜蛋白对巨噬细胞分泌细胞因子和诱导巨噬细胞凋亡的影响,初步探讨肺炎支原体引起动脉粥样硬化的机制。方法用ELISA检测肺炎支原体脂质相关膜蛋白诱导体外培养的巨噬细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量;用流式细胞术检测脂质相关膜蛋白诱导巨噬细胞的凋亡率;West-ern blot方法检测经脂质相关膜蛋白作用的巨噬细胞NF-κB的激活和NF-κB抑制剂吡咯啉烷二甲基硫脲对巨噬细胞分泌细胞因子和诱导巨噬细胞凋亡的影响。结果脂质相关膜蛋白能促进巨噬细胞分泌高水平的TNF-α、IL-1β和IL-6和发生凋亡;并能使NF-κB从细胞浆中转位到细胞核内;吡咯啉烷二甲基硫脲能显著抑制巨噬细胞NF-κB的激活,且能抑制脂质相关膜蛋白诱导的巨噬细胞分泌细胞因子和发生凋亡。结论肺炎支原体脂质相关膜蛋白可通过激活NF-κB诱导巨噬细胞分泌前炎症细胞因子和促进凋亡,可能在动脉粥样硬化的发病中起重要作用。; 朱翠明汪世平游晓星曾焱华陈曦; 关键词：肺炎支原体脂质相关膜蛋白前炎症因子细胞凋亡动脉粥样硬化

肺炎支原体脂质相关膜蛋白促进树突状细胞成熟被引量：2: 2015年; 肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，Mp）是社区获得性肺炎最主要的病原体。在儿童和青少年中，10％～30％的社区获得性肺炎是由Mp感染所致。Mp缺乏细胞壁，其所引起的一系列炎症反应很大程度上是其细胞膜上的脂蛋白，又称脂质相关膜蛋白（1ipid-associated membrane proteins，LAMP）所致。; 欧广利刘紫玲谭田平胡新年游晓星曾焱华朱翠明; 关键词：肺炎支原体脂质相关膜蛋白树突状细胞

支原体巨噬细胞活化脂肽2诱导单核细胞系THP-1表达血红素氧合酶1及其机制研究被引量：1: 2014年; 目的：观察支原体巨噬细胞活化脂肽2（macrophage-activating lipopeptide-2， MALP-2）能否诱导人单核细胞系THP-1表达血红素氧合酶-1（hemeoxygenase，HO-1），并探讨其相应的调控机制，以明确机体抵抗支原体感染所致炎性损伤的自我防御机制。方法体外培养THP-1细胞，用不同浓度的MALP-2作用12 h， Western blot检测HO-1的表达；THP-1细胞经TLR2和TLR6中和抗体孵育，或构建TLR2和TLR6负显性突变体转染细胞，以明确TLR2和TLR6在介导HO-1表达中的作用；Western blot检测Akt磷酸化情况，并采用PI3K抑制剂LY294002处理细胞，以证实PI3K参与HO-1表达。同时，分别采用EMSA和免疫荧光观察核转录因子Nrf2的DNA结合活性和核转位，并采用Nrf2 siRNA干扰其表达后，Western blot检测HO-1表达。最后，采用siRNA干扰HO-1表达，或采用HO-1的激动剂钴原卟啉（ cobalt protoporphyrin ，CoPP）处理THP-1细胞，ELISA检测细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌。结果 MALP-2能诱导THP-1细胞表达HO-1。且TLR2和TLR6中和抗体以及其负显性突变体转染后，HO-1表达水平显著降低；此外，MALP-2能激活PI3K，PI3K抑制剂能抑制HO-1表达；MALP-2能增强Nrf2的DNA结合活性及核转位，PI3K抑制剂处理后，Nrf2的DNA结合活性以及核转位水平进一步降低。 RNA干扰Nrf2后，HO-1表达显著降低。沉默HO-1表达后，TNF-α和IL-1β分泌增高，而CoPP处理能进一步降低TNF-α和IL-1β水平。结论 MALP-2能诱导THP-1细胞表达HO-1，其机制可能受TLR2、6/PI3K/Nrf2通路调控。 HO-1的表达可在一定程度上负调控细胞因子过度分泌。; 游晓星马小华刘良专曾焱华余敏君朱翠明何军蒋传好吴移谋; 关键词：血红素氧合酶-1 单核细胞

肺炎支原体P1蛋白片段免疫学活性及黏附功能的研究被引量：5: 2012年; 目的了解肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniace，Mp）P1蛋白第1125～1395氨基酸片段（P1C蛋白）的免疫学活性及其细胞黏附作用。方法构建用于表达重组P1C片段（rP1C）的原核表达载体pGEX6p-2／p1c，采用SDS-PAGE和Westernblot鉴定rP1C。采用基于GST的亲和层析法提纯rPIC，提纯的rPC免疫BALB／c小鼠，ELISA检测小鼠抗rP1C血清的效价。采用Westernblot检测rPIC对Mp感染患者血清的免疫反应性。采用间接免疫荧光法检测rP1C黏附HeLa细胞及其免疫血清黏附抑制作用。结果所构建的原核表达系统能有效表达相对分子质量约为66×10^3的可溶性rP1C。rP1C免疫小鼠后，其抗血清ELISA效价高达1：64000。rPIC能被Mp感染者血清及小鼠抗rPIC血清识别并与之结合。rP1C能黏附HeLa细胞，其抗血清可阻断Mp对HeLa细胞的黏附，该黏附阻断作用随抗血清浓度增高而增强。结论rP1C具有良好的免疫原性和免疫反应性及黏附细胞功能，可作为Mp疫苗及血清学检测的候选抗原。; 朱翠明汪世平吴移谋高顺利余敏君陈曦; 关键词：肺炎支原体免疫学活性

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国家自然科学基金(81072418)

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