湖南省自然科学基金(03jjY3050)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
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- 热休克反应对内毒素所致小鼠巨噬细胞炎症因子表达的抑制作用与MAPK信号转导通路的关系研究
- 2005年
- 【目的】探讨热休克反应(HSR)对内毒素(LPS)所致MAPK信号通路的影响。【方法】采用400 ng/mlLPS处理小鼠巨噬细胞(RAW264.7),通过免疫印迹,抗磷酸化抗体检测ERK、JNK、p38的磷酸化。 热休克反应是将巨噬细胞在42℃的条件下培养1h,随后在37℃,5%CO2条件下恢复12h。【结果】ERK、 JNK、p38在LPS处理15min后即被活化,30min达高峰并持续至45min,90min后开始恢复。RT PCR检 测发现TNF α、IL 15mRNA水平增高。细胞经HSR(42℃1h,并恢复12h)后,再经LPS刺激则TNF α、IL 15mRNA转录受抑制,但HSR对JNK、p38、ERK等三种MAPK的活化(磷酸化)无影响。【结论】HSR抑制 LPS所致的炎症因子表达不涉及MAPK信号通路。
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- 关键词：内毒素类巨噬细胞炎症热休克反应小鼠
- HSF1调控的炎症相关基因的筛选及SOCS3基因的实验验证被引量：10
- 2006年
- 目的:筛选热休克因子1(HSF1)调控的炎症相关基因,初步探讨HSF1对下游基因的调控作用。方法:采用HSF1基因敲除小鼠,制备内毒素腹腔注射以及热休克反应后再给予内毒素腹腔注射的内毒素血症模型,分别抽提HSF1缺失突变纯合子和HSF1野生型小鼠肺组织总RNA,用微阵列进行筛选;用转录元件搜索软件分析差异表达基因的启动子区;选取启动子区含有热休克元件的基因:细胞因子信号转导抑制子3(SOCS3),采用热休克反应(HSR)和HSF1过表达的RAW 2 6 4.7巨噬细胞给予内毒素刺激,抽提总RNA进行RT-PCR,Northern印迹实验,观察HSR和HSF1过表达对内毒素诱导的SOCS3基因表达的影响。结果:用微阵列的方法筛选到HSF1可能抑制表达的炎症介质基因1 5个,其中9个基因的启动子区含有热休克元件;HSF1可能促进表达的炎症介质基因1 1个,其中8个基因的启动子区含有热休克元件;HSR和HSF1过表达可明显抑制小鼠RAW 2 6 4.7巨噬细胞内毒素诱导的SOCS3mRNA的表达。结论:HSF1可抑制炎症介质SOCS3mRNA的表达。
- 于凤秀张华莉陈广文王秋鹏石永忠刘瑛梁秋娟肖献忠
- 关键词：热休克反应热休克因子1
