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南通大学自然科学基金(06Z085)
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1
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5-氮杂脱氧胞苷对子宫内膜癌细胞的生长及RASSF1A基因表达的影响
被引量:1
2009年
目的探讨DNA甲基转移酶抑制剂——5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza—CdR)对子宫内膜癌细胞的生长及RASSF1A基因表达的影响。方法5-Aza—CdR作用后,采用锥虫蓝染色法、流式细胞仪分别检测子宫内膜癌细胞株HEC一1B细胞的生长及凋亡情况,采用RT—PCR技术、甲基化特异性PCR(MSP)技术分别检测HEC-1B细胞中RASSF1A mRNA的表达和RASSF1A基因启动子的甲基化状态。结果(1)HEC-1B细胞的生长及凋亡情况:5-Aza—CdR对HEC-1B细胞生长的抑制作用呈明显的剂量和时间依赖性(P〈0.01);且HEC-1B细胞的凋亡率也呈明显的剂量依赖性(P〈0.01)。(2)HEC-1B细胞中RASSF1A mRNA的表达:未经5-Aza—CdR作用的HEC-1B细胞中RASSF1A mRNA表达缺失;不同浓度5-Aza—CdR(分别为0.05、0.1、1、5、10nmol/m1)作用后,HEC-1B细胞中RASSF1A mRNA表达不同程度地上升,其相对表达水平分别为0.074±0.004、0.105±0.004、0.1674-0.006、0.3344-0.005、0.484±0.007,分别与未经5-Aza—CdR作用的细胞(为0)比较,差异均有统计学意义(P〈0.01)。(3)HEC-1B细胞中RASSF1A基因启动子的甲基化状态:未经5-Aza—CdR作用的HEC-1B细胞中RASSF1A基因启动子呈高甲基化状态;加入低浓度(即0.05、0.1、1、5nmol/m1)的5-Aza—CdR后,HEC-1B细胞中RASSF1A基因启动子的甲基化水平下降,呈半甲基化状态(即同时出现甲基化和非甲基化条带);当5-Aza—CdR浓度为10nmol/ml时,HEC一1B细胞中RASSFlA基因启动子呈非甲基化状态。结论(1)-Aza—CdR可抑制HEC-1B细胞增殖、促进HEC-1B细胞凋亡。(2)5-Aza—CdR能使HEC-1B细胞重新表达RASSF1A mRNA,能逆转RASSF1A基因启动子的高甲基化状态。
张玉泉
冒小燕
马晓玲
张沐
盛楠
关键词:
子宫内膜肿瘤
阿扎胞苷
肿瘤抑制蛋白质类
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