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中央高校基本科研业务费专项资金(JKY2011060)

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相关作者：林旋徐茂磊韩萌萌刘俊金亮更多>>
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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇重组蛋白
  • 1篇分离纯化
  • 1篇P2
  • 1篇HIS
  • 1篇HSP65
  • 1篇纯化

机构

  • 1篇中国药科大学

作者

  • 1篇李泰明
  • 1篇吴洁
  • 1篇刘景晶
  • 1篇金亮
  • 1篇刘俊
  • 1篇韩萌萌
  • 1篇徐茂磊
  • 1篇林旋

传媒

  • 1篇安徽医药

年份

  • 1篇2013
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
重组蛋白HSP65-6×(IA2-P2)-His的构建、表达及分离纯化
2013年
目的构建HSP65-6×(IA2-P2)-His表达载体并研究其在大肠杆菌中的表达及分离纯化。方法通过酶切酶连的方法将6×(IA2-P2)-His替换pET-28a-HSP65-6×P277中的6×P277,构建好的载体经DNA测序分析构建成功。乳糖诱导表达的蛋白经Ni+柱分离纯化。最后用SDS-PAGE及Western blot鉴定目的蛋白。结果 HSP65-6×(IA2-P2)-His最高表达量占菌体总蛋白的65%,超声破碎后蛋白以可溶性的形式存在于裂解上清中。Ni+柱纯化后蛋白纯度可达80%电泳纯以上。最后West-ern blot鉴定目的蛋白具有抗原性和His标签。结论重组载体pET-28a-HSP65-6×(IA2-P2)-His成功转入BL21中,以可溶性的形式高效表达,该工作为进一步验证融合蛋白的生物学活性奠定了一定的基础。
李泰明韩萌萌林旋刘俊吴洁金亮刘景晶徐茂磊
关键词：重组蛋白纯化
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