甘肃省自然科学基金(3ZS041-A25-047)
- 作品数：7 被引量：68H指数：5
- 相关作者：王清黄惠英王蒂马文芳陈亚兰更多>>
- 相关机构：甘肃农业大学定西地区旱农科研推广中心甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 纯合四倍体马铃薯遗传转化体系优化及转基因块茎的褐化鉴定被引量：10
- 2006年
- 以农杆菌介导的反义POT32基因对纯合四倍体马铃薯不同外植体类型进行遗传转化,发现叶片预培养2d,侵染10min,共培养3d所得的抗性愈伤组织频率最高,污染频率最低。茎段预培养2～3d,侵染8min,共培养2d能够获得较高的抗性愈伤组织频率和较低的茎外植体污染率。试管微型薯在农杆菌工程菌侵染10min时获得高达52.8%的抗性愈伤组织频率。另外,1mg/LNAA+5mg/LGA3+2mg/LZT的激素配比能够有效促进不定芽分化并提高转化频率,其不定芽及转化频率分别为12.5%和8.3%。对块茎褐化的检测结果表明,转基因块茎的褐变强度和PPO活性明显低于对照(未转基因品种),且PPO活性与褐变强度及褐变指数呈正相关(r1=0.8244**,r3=0.7524*)。损伤后的转基因块茎的褐化出现时间及褐化指数明显迟于及低于对照。
- 王清李静文戴朝曦黄惠英
- 关键词：马铃薯PPO活性
- 转基因纯合四倍体马铃薯多酚氧化酶活性及同工酶谱的变异被引量：8
- 2005年
- 选择14个已插入反义PPO基因的纯合四倍体马铃薯“GD-9-qc”系列,进行叶片、微型薯PPO活性检测和同工酶分析。结果表明,不同品系间的叶片、微型薯PPO活性存在极显著差异,其中2个品系的叶片及8个品系的微型薯PPO活性明显低于对照;供试转基因品系间的叶片PPO同工酶谱带的颜色深浅表现差异,所示结果与PPO活性检测基本一致;而不同品系间微型薯PPO同工酶谱带除颜色表现不同外,其中4个品系的同工酶主带消失,推测是由反义PPO基因直接抑制的结果。此外,在某些品系中,叶片与微型薯PPO活性增减趋势不同。实验获得了叶片PPO活性较高、块茎PPO活性低的目标转基因品系。
- 王清黄惠英陈亚兰王蒂
- 关键词：PPO活性
- 外源硅及脯氨酸对盐胁迫下马铃薯试管苗的影响被引量：17
- 2005年
- 在无菌微生态环境下,对马铃薯试管苗进行盐胁迫和外源硅及脯氨酸处理。结果表明,盐胁迫能够明显降低试管苗苗高、根质量和鲜质量;低盐浓度(0.1%NaCl)能够促进根的伸长,但这种促进作用随NaCl浓度的升高而消失。外源硅能够促进低盐胁迫下试管苗根的生长、鲜质量和根质量的增加,并降低试管苗游离脯氨酸含量。外源脯氨酸对盐胁迫下试管苗的生物产量促进效应低于硅,但却明显提高了试管苗的叶绿素含量。试验证明:外源硅及脯氨酸能够显著缓解盐胁迫对试管苗所造成的伤害。
- 王清黄惠英张金文王蒂
- 关键词：马铃薯试管苗盐胁迫脯氨酸
- 反义PPO基因对马铃薯块茎褐化的影响被引量：22
- 2007年
- 对刚收获和贮藏5个月后的12个转基因马铃薯品系及对照块茎进行褐化指标的生理检测，发现2个检测时期的各褐化指标在供试品系间差异均达到显著或极显著水平。综合2个检测时期并与对照相比，多酚氧化酶（PPO）活性降幅为26．01％～48．65％；酚物质含量降低22．83％～54．81％；褐化强度除GD-9-qc-1低于对照40．45％～46．78％外，其余品系高于对照或与对照无差别。切割块茎发现，人部分转基因品系较对照褐化出现晚，褐化程度低，褐化指数低于对照88．0％～98．86％。PPO的化学定位显示，低褐化转基因品系的多酚氧化酶集中于维管束环，含量明显少于对照，其中GD-9-qc-1仅有少量多酚氧化酶显现出来，推测是由于反义PPO基因抑制块茎POT32基因表达的结果。方差、相关分析表明，除对多酚氧化酶含量抑制外，反义PPO基因还降低酚物质含量以减轻块茎损伤褐化。
- 王清黄惠英马文芳王蒂
- 关键词：转基因马铃薯
- 转基因马铃薯PPO、CAT活性变化及同工酶分析被引量：2
- 2005年
- 采用生理生化方法对转基因马铃薯纯合四倍体甘单花9号(GD-9-qc)系列的试管苗进行了PPO活性检测、同工酶分析及CAT活性检测和POD同工酶分析。结果表明:反义PPO基因对大多数转基因马铃薯试管苗PPO的活性产生了明显的抑制效果,其中GD-9-qc-10与GD-9-qc-11的PPO活性比对照降低89.06%和83.98%,且相应转基因品系的PPO同工酶也被明显抑制。实验同时发现,转基因马铃薯不同品系中的过氧化氢酶和过氧化物酶的活性也受到不同程度的影响,表现为有的高于对照,有的低于对照;而POD同工酶所示结果与POD活性检测相一致。
- 陈亚兰王清张健
- 关键词：马铃薯
- 外源激素对甘草愈伤组织诱导及染色体加倍的影响(简报)被引量：10
- 2008年
- 采用不同浓度配比的外源激素NAA、2,4-D和BAP对甘草不同外植体(子叶、下胚轴和胚根)进行愈伤组织诱导、再生苗分化及细胞染色体加倍的研究。结果表明,不同外植体愈伤组织的诱导频率无差异,均以MS+1.0mg/L NAA+1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L BAP培养基的诱导频率最高,均达100%。而再生苗分化具有极显著的差异,以下胚轴最好,在MS+3.0 mg/L BAP+2.0 mg/L ZT+10.0 mg/L GA3培养基上获得的再生苗频率最高,为4.57%。另外,不同外植体类型、不同浓度的NAA、2,4-D对愈伤组织细胞倍性的影响不同,其中下胚轴诱导的四倍体频率明显高于子叶和胚根,平均为42.23%;而1.0 mg/L 2,4-D下的子叶、下胚轴和胚根外植体愈伤组织的四倍体加倍率也达到最高,分别为61.25%,60.00%和58.13%。除此之外,细胞染色体加倍频率随着愈伤组织培养时间的延长而增加。
- 马文芳黄惠英王清
- 关键词：外源激素甘草愈伤组织染色体加倍
- Patatin、Wun1启动子驱动的PPO反义基因植物表达载体的构建被引量：1
- 2006年
- 以植物表达载体PC3-ASPPOty为基础,分别构建了由Patatin、Wun1启动子调控的PPO反义基因植物表达载体pCP-ASPPOty、pCW-ASPPOty,并通过直接导入法将重组质粒分别导入根癌农杆菌LBA4404中,经PCR鉴定证明,此基因已整合到农杆菌Ti上。表达载体的建立为获得地上部分PPO活性正常、块茎损伤低褐化的马铃薯加工型改良品种奠定了基础。
- 陈春艳王清
