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国家自然科学基金(30901289)
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尘螨变应原rDer p1诱导HaCaT细胞表达胸腺基质淋巴生成素的研究
2014年
目的 探讨尘螨变应原rDer p1在体外对角质形成细胞表达胸腺基质淋巴生成素(TSLP)的影响。 方法 体外培养人角质形成细胞株HaCaT细胞,予以0.1、1和10 mg/L尘螨变应原rDer p1与蛋白酶活化受体2(PAR2)特异性激动剂SLGIKV(500 μmol/L)和拮抗剂VKGILS(500 μmol/L)共培养,以无血清培养基为空白对照。用ELISA法和荧光定量PCR法检测各实验组和对照组TSLP蛋白及mRNA表达水平;通过激光共聚焦显微镜检测细胞内钙流变化分析rDer p1诱导HaCaT细胞产生TSLP和PAR2受体活化的关系。 结果 1 mg/L和10 mg/L rDer p1组培养12 h上清中TSLP水平分别为(155.5 ± 5.9) ng/L和(228.8 ± 28.7) ng/L,显著高于空白对照组(54.3 ± 13.9 ng/L,P 〈 0.01),TSLP表达水平随rDer p1浓度增加而升高。SLGIKV组TSLP表达[(166.2 ± 8.8) ng/L]也显著高于空白对照组(P 〈 0.01)。10 mg/L rDer p1组和SLGIKV组TSLP mRNA相对表达量在8 h最高,分别为(3.28 ± 0.27)倍和(2.15 ± 0.26)倍,与4 h和24 h相比差异有统计学意义(P 〈 0.01)。SLGIKV可引起HaCaT细胞钙内流增加;10 mg/L rDer p1也可引起HaCaT细胞钙内流增加,经过PAR2受体特异性阻断剂VKGILS(500 μmol/L)处理后再给予rDer p1刺激,细胞内钙内流峰值明显降低。 结论 尘螨变应原rDer p1能够通过部分活化HaCaT细胞表面的PAR2受体诱导产生促炎细胞因子TSLP。
倪春雅
高露娟
陈连军
窦侠
关键词:
屋尘螨
角蛋白细胞
胸腺基质淋巴生成素
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