四川省应用基础研究计划项目(2011JY0095) 作品数:12 被引量:65 H指数:5 相关作者: 王利 苟小兰 龙钟明 魏勇 刘港彪 更多>> 相关机构: 西南民族大学 四川省畜牧科学研究院 南充市畜牧局 更多>> 发文基金: 四川省应用基础研究计划项目 国家级大学生创新创业训练计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
鱼源小肠结肠炎耶尔森菌5种毒力基因的检测和分析 被引量:1 2013年 采用煮沸法和细菌基因组DNA试剂盒两种方法制备鱼源小肠结肠炎耶尔森菌DNA模板,运用聚合酶链反应(PCR)方法检测小肠结肠炎耶尔森菌的5种毒力基因(ail、yadA、virF、ystB和HPI-int),并对HPI-int基因进行测序分析。结果表明,小肠结肠炎耶尔森菌ail、virF和HPI-int 3种毒力基因被检测出,而另外两种毒力基因ystB和yadA未被检测到。HPI-int基因长度为722bp,GenBank序列号为JX041513,与该数据库中的小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛基因的相似性达到99%,由此推断该菌株具有较强的致病性。这为深入研究小肠结肠炎耶尔森菌的毒力和危害积累了科学资料。 王利 苟小兰关键词:小肠结肠炎耶尔森菌 毒力基因 齐口裂腹鱼维氏气单胞菌16SrDNA序列分析 被引量:10 2012年 从齐口裂腹鱼(Sclizothorax prenanti)肠道中分离出菌株Spc0408,采用常规形态特征的观察、生理生化试验、结合16S rDNA基因序列分析并构建系统发育树。结果表明,该菌为革兰氏染色呈阴性,短杆形,无芽孢;该菌理化特性为具有动力性,H2S、尿素阴性、不发酵木糖、鼠李糖、山梨醇等;β-半乳糖苷酶、葡磷胨水、枸橼酸盐阳性;其16S rDNA长度为1443bp,GenBank数据库登录号为JF929912,与GenBank中维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的相似性高达97%;系统发育树显示,菌株Spc0408和多株维氏气单胞菌聚为一簇。综合分离菌的生化特征及分子鉴定结果,判定该菌株是维氏气单胞菌,从而为气单胞菌的分类鉴定提供参考。 刘港彪 王利 王吉坤 龙钟明 苟小兰关键词:齐口裂腹鱼 维氏气单胞菌 RDNA 系统发育分析 鲫鱼弗氏柠檬酸杆菌的耐药表型及耐药基因检测 被引量:6 2012年 为了检测鲫鱼费氏柠檬酸杆菌的耐药表型及耐药基因,试验采用标准Kirby-Bauer纸片扩散法检测鲫鱼弗氏柠檬酸杆菌对13种抗生素的耐药表型,并用PCR法检测弗氏柠檬酸杆菌对四环素类和磺胺类抗生素的6种耐药基因(tetA、tetC、tetM、Sul1、Sul2和Sul3)。结果表明:鲫鱼弗氏柠檬酸杆菌对四环素、氨苄西林、强力霉素、红霉素、头孢拉定和阿莫西林耐药;仅检测出四环素类的tetA和tetM基因,而其他未检测出。 王利 魏勇 龙钟明 刘港彪关键词:耐药基因 耐药表型 鲫鱼 丁鲑鱼维氏气单胞菌的鉴定和生物学特性研究 被引量:5 2012年 对引起丁鲑鱼发病的菌株——XN602进行鉴定和生物学特性研究,经形态特征与生理生化鉴定,结果表明:该菌为革兰氏阴性杆菌,其16SrDNA序列与GenBank中多株维氏气单胞菌相似性高达99%,系统发育树显示该菌与维氏气单胞菌聚为一簇。因此,分离菌株XN602在分类学上应属于维氏气单胞菌。 苟小兰 王利 侯显耀 龙钟明 魏勇 黄文明关键词:维氏气单胞菌 RDNA 系统发育分析 黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌16S rDNA及系统发育分析 被引量:4 2012年 从发病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)心脏中分离到1株细菌GM 2402,进行了分离培养、形态学观察、生理生化试验与16S rDNA基因的PCR扩增及序列分析。结果表明,菌株GM 2402为革兰氏阴性杆菌,具动力性,V-P试验、水杨酸、过氧化氢酶、脲酶等阳性,不发酵鼠李糖、乳糖等,硫化氢、枸椽酸盐等阴性。16S rDNA序列长1 417 bp,GenBank的登录号是JX 101598,且与数据库中小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)的相似性高达99.6%,系统发育树显示与小肠结肠炎耶尔森氏菌聚为一个分支。综合菌株的生化特性及分子生物学分析结果,判定菌株GM2402为小肠结肠炎耶尔森氏菌。 苟小兰 王利 黄艳青关键词:黄颡鱼 小肠结肠炎耶尔森氏菌 RDNA 系统发育分析 鲫鱼弗氏柠檬酸杆菌的鉴定及系统发育分析 被引量:15 2012年 从鲫鱼中分离到一株弗氏柠檬酸杆菌,采用PCR方法扩增该菌株16SrDNA基因,并运用Clusta l x1.8和MEGA3.0软件对其进行序列相似性比较和系统发育学分析。试验结果表明:该菌株16SrDNA长度为1450bp,GenBank收录号为JN002104.1。此序列与GenBank数据库中弗氏柠檬酸杆菌16SrDNA序列的相似性达99%,在系统发育树中和弗氏柠檬酸杆菌聚在一起,亲缘关系最近。 王利 魏勇关键词:系统发育 鲫鱼 小肠结肠炎耶尔森氏菌对黄颡鱼的致病性及毒力基因检测 被引量:11 2013年 为研究小肠结肠炎耶尔森氏菌菌株GM2402对黄颡鱼的致病性及毒力基因分布,采用动物回归感染试验方法探讨菌株对黄颡鱼的致病性,利用PCR技术扩增毒力基因,通过药物敏感试验检测该菌株对抗生素的敏感性。在动物回归感染试验中,试验处理组鱼7d内的死亡率达100%,从感染后的试验鱼体中再次分离到小肠结肠炎耶尔森氏菌,证实了该菌株具较强致病性;成功扩增到粘附侵袭位点、耐热肠毒素、粘附素、毒力活化因子和强毒力岛上P4样噬菌体整合酶5种毒力基因,揭示毒力基因与致病性密切相关。菌株GM2402对卡拉霉素、恩诺沙星、磺胺异恶唑等9种药物高度敏感,对氟苯尼考、先锋霉素V中度敏感,而对链霉素、洁霉素等5种药物表现为耐药,这将为鱼类小肠结肠炎耶尔森菌病的有效防治提供参考。 苟小兰 王利关键词:小肠结肠炎耶尔森氏菌 黄颡鱼 毒力基因 鲫鱼维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药表型检测 被引量:11 2013年 为了对从鲫鱼中分离出的菌株(命名为JY-01)进行鉴定,试验采用了生理生化鉴定、16SrDNA基因扩增、系统发育分析和药敏试验等方法进行了鉴定和耐药表型检测。结果表明:该菌株为革兰阴性短小杆菌,16S rDNA序列长度为1 449 bp,GenBank收录号为JN083778.1;其与GenBank数据库中维氏气单胞菌16S rDNA序列的相似性达99%;在系统发育树上与维氏气单胞菌聚在一起,亲缘关系最近,说明菌株JY-01为维氏气单胞菌;该菌对卡那霉素、四环素、左氟沙星和环丙沙星高度敏感,而对红霉素、氨苄西林、青霉素、强力霉素和链霉素耐药。 王利 魏勇关键词:维氏气单胞菌 RDNA 系统发育 耐药表型 鲫鱼 江黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌的主要生物学特性研究 被引量:4 2013年 从发病江黄颡鱼中分离出菌株YER6022,通过细菌培养、生理生化试、16SrDNA基因扩增等方法对其生物学特性进行研究.结果表明:该菌株为革兰氏阴性球杆菌,具有动力性,不发酵山梨醇,赖氨酸、苯丙氨酸阴性,尿素、鸟氨酸阳性.16SrDNA片段测序为1408bp,与小肠结肠炎耶尔森氏菌相似性达99%,GenBank登录号为JX434637.系统进化树显示菌株YER6022与耶尔森菌属的小肠结肠炎耶尔森菌亲缘关系最近. 赵静 王利 邱翔 苟小兰 龙钟明 王海娟关键词:小肠结肠炎耶尔森氏菌 生物学特性 江黄颡鱼 江团吉氏柠檬酸杆菌的鉴定及药敏试验 2013年 从江团中分离得到菌株JT-0603,经形态特征观察、生理生化实验、16S rDNA基因序列分析,得出该菌株为吉氏柠檬酸杆菌。药敏试验表明该菌株对环丙沙星、磺胺异恶唑、痢特灵、氟哌酸、链霉素、氟苯尼考、恩诺沙星等药物高度敏感;对强力霉素、氨苄青霉素低度敏感;对红霉素耐药。 龙钟明 王利 苟小兰 刘港彪 冀国帧 韦璇关键词:RDNA 药敏试验