上海市科学技术委员会科研基金(08JC1414400)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：严明陈万涛周晓健毛力何地更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 炎症因子通过核因子κB通路促进口腔鳞状细胞癌转移的体外研究被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨炎症因子与核因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）信号转导通路在口腔鳞状细胞癌转移中的意义.方法 应用口腔鳞状细胞癌低转移细胞系Tca8113和高转移细胞系Tb为研究对象,通过蛋白质印迹法和荧光素酶报告基因法检测口腔鳞状细胞癌细胞系中NF-κB通路活性.用NF-κB抑制因子α（inhibitor of kappa B alpha,IκBa）抑制质粒第32、36位丝氨酸磷酸化位点被丙氨酸替代的质粒（pBabe-SR-IκBa）和NF-κB通路抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（pyrolidinedithiecar bamate,PDTC）抑制信号转导通路活性,并用侵袭小室实验（TransweH）检测口腔鳞状细胞癌高转移系Tb细胞侵袭能力的变化.此外,通过酶联免疫吸附法检测pBabe-SR-IκBα和PDTC抑制信号转导通路后,肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）、白介素（IL）-1a、IL-6、IL-8和粒-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF）等炎症因子的分泌.结果 蛋白质印迹法检测显示：高转移Tb细胞中磷酸化IκBα和磷酸化p65的表达量明显高于低转移细胞系Tea8113,分别为Tea8113细胞的3.19倍和6.81倍.荧光素酶（luciferase）报告基因结果显示,Tb细胞NF-κB的启动子活性为Tca8113的2.12倍（P〈0.01）,并对TNF-α更为敏感.转染pBabe-SR-IκBα和应用PDTC抑制NF-κB通路后,对Tb细胞的体外侵袭能力抑制率分别为21.9%和69.3%.此外,酶联免疫吸附试验法显示通路抑制后,TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8和GM-CSF等炎症因子的分泌也明显降低.结论 TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8和GM-CSF等炎症因子可能通过NF-κB通路促进口腔鳞状细胞癌细胞转移.
- 严明何地张萍周晓健陈万涛
- 关键词：核因子ΚB炎症趋化因子类肿瘤转移
- 转染Podoplanin对口腔白斑细胞增殖和细胞周期的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨转染外源性Podoplanin基因对口腔白斑细胞增殖和细胞周期的影响，以证实Podoplanin在白斑癌变中的作用。方法以口腔黏膜白斑细胞系Leuk—1、转染pCMV-Podoplanin表达质粒白斑细胞系A4—1和转染空白载体pCMV的白斑细胞系B4—1为细胞模型，应用荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）检测转染目的基因后细胞中PodoplaninmRNA水平的变化。激光共聚焦显微镜和蛋白质印迹法观察转染目的基因后细胞中Podoplanin蛋白的定位和表达水平。甲基噻唑基四唑（MTT）法检测转染目的基因细胞增殖活性的变化。流式细胞仪检测过表达外源性Podoplanin后细胞周期分布的变化情况。结果转染外源性Podoplanin基因的A4—1细胞，mRNA相对表达量为0．022，明显高于B4—1细胞的0．001及Leuk-1细胞的0．002（P〈0．05）；A4—1细胞Podoplanin蛋白表达水平较B4—1和Leuk-1细胞明显提高。免疫荧光结果表明，3种细胞的胞质及胞膜均可见Podoplanin蛋白的表达，A4-1细胞的蛋白表达量（绿色荧光强度）明显高于B4-1和Leuk-1细胞。细胞生长曲线分析结果表明，A4-1细胞生长速度明显高于Leuk-1细胞，A4—1接种后3d增殖活性比Leuk-1细胞高40．4％（P〈0．05）。细胞周期检测结果显示，A4—1细胞处于G2～M期比例为（24．89±4．55）％，明显高于B4-1[（4．13±5．24）％]和Leuk-1细胞[（4．69±7．42）％]，P〈0．05；A4—1细胞增殖指数（0．57±0．06）高于B4-1（0．41±0．04）及Leuk-1（0．40±0．02），P〈0．05。结论口腔白斑细胞过表达外源性Podoplanin蛋白后，细胞生长和增殖能力明显增强；Podoplanin可能是口腔白斑细胞癌变的关键基因之一。
- 孙强严明周晓健李新明毛力陈万涛
- 关键词：白斑口腔细胞增殖细胞周期PODOPLANIN
