国家自然科学基金(39370343)
- 作品数：25 被引量：236H指数：11
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- 蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体放射配体检测法的建立与临床应用被引量：16
- 2004年
- 目的 建立蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体 (IA 2A)的放射配体测定法。 方法 经试管内转录与翻译 ,获得3 5 S标记的重组人IA 2抗原。3 5 S IA 2与血清在自制旋转孵育器上混匀过夜 ,用蛋白A 琼脂糖沉淀抗原抗体复合物。沉淀复合物经TBST缓冲液洗涤后 ,置液体闪烁计数仪计数 ,结果以IA 2A指数表示。并检测国人 111例 1型和 113例 2型糖尿病患者 ,以及 12 5名健康志愿者的IA 2A水平 ,评价其敏感性、特异性及临床应用价值。 结果 该方法的批内变异系数 (CV) 3 .2 %～ 9 .7% ,批间CV 5.6%～ 11.7% ;DASP 2 0 0 3回报结果显示其敏感性 64% ,特异性 10 0 % ;该方法检测 45份标本的IA 2A指数与国际标准化实验室结果呈显著正相关 (r =0 .690 ,P <0 .0 1) ,且阴、阳性判断完全一致 ;IA 2A指数阳性阈值 0 .0 0 65(为 12 5名健康者的 99.5%百分位点上限 ) ;该方法检测国人 1型糖尿病患者阳性率 2 3 .4% (2 6/ 111) ,其中病程 <1年的阳性率 3 3 .3 % (17/ 51) ,病程≥ 1年的阳性率 15.0 % (9/ 60 ) ,差异有显著意义 (χ2 =5.17,P <0 .0 5)。 2型糖尿病患者阳性率 1.8% (2 /113 ) ,显著低于 1型糖尿病患者 (χ2 =2 4.0 ,P <0 .0 0 1)。 结论 建立的IA 2A放射配体检测法灵敏、特异性和重复性好 。
- 黄干周智广王建平彭健蒋铁建李霞
- 关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体糖尿病血清
- LADA一级亲属GAD-Ab、IA-2Ab与CPH-Ab联合检测的价值被引量：3
- 2006年
- 采用放射配体法检测128例LADA一级亲属的GAD-Ab、IA-2Ab和CPH-Ab,发现GAD-Ab和IA-2Ab的检出率与欧美高加索人及我国T1DM一级亲属接近,三种抗体联合检测可提高对LADA一级亲属筛查的敏感性。
- 邓志明周智广黄干亓海英王建平谭少珍严晔华李莉蓉
- 关键词：成人隐匿性自身免疫性糖尿病一级亲属胰岛自身抗体
- 1型糖尿病一级亲属GADA、IA-2A与IAA联合检测的价值被引量：5
- 2005年
- 目的 采用放射配体法检测118 例1 型糖尿病一级亲属的谷氨酸脱羧酶抗体(GA-DA)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)、胰岛素自身抗体(IAA),发现三种抗体单独检出率与欧美高加索人接近,联合检测阳性率优于单一抗体检测。
- 王建平周智广黄干杨琳李霞王季猛
- 关键词：1型糖尿病GADAIAA抗体特异性
- 谷氨酸脱羧酶抗体和蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测的标准化研究被引量：16
- 2005年
- 目的研究谷氨酸脱羧酶抗体(GADAb)和蛋白酪氨酸磷酸酶2抗体(IA2A)检测的标准化,为合理选择检测方法及准确判定结果提供依据。方法应用国际糖尿病免疫学会(IDS)推荐的WHO单位制,采用放射配体法检测125名健康人的GADAb和IA2A以确定阳性判断标准,通过检测IDS第3次糖尿病自身抗体标准化检测方法评估(DASP2003)工作组提供的100名健康对照及50例新发1型糖尿病患者血清,验证其灵敏度与特异性。并采用新一代的ELISA试剂盒检测41例已知抗体滴度的标本,对比ELISA与标化后放射配体法的一致性。结果GADAb的阳性阈值为18.5U/ml,IA2A为2.7U/ml。DASP2003反馈结果显示,本室GADAb检测的灵敏度82%,特异性98%;IA2A检测的灵敏度64%,特异性100%;受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,本室GADAb曲线下面积(AUC)以及统一按95%特异性标化后的灵敏度(AS95)分别为0.946%及86%,IA2A分别为0.824%及68%。在52个回报结果的实验室中综合排名第15位。ELISA试剂盒与标化后的放射配体法检测GADAb的一致率82.9%,Kappa值0.656;检测IA2A的一致率75.6%,Kappa值0.514;结果判定不一致者多集中在阳性边缘水平的标本中。结论经标准化后的GADAb和IA2A放射配体法灵敏度和特异性明显提高;新一代ELISA试剂盒检测GADAb和IA2A可应用于临床,但对于检测结果阴性而临床可疑者,建议采用放射配体检测法核实。
- 黄干周智广颜湘彭健邓志明王建平杨琳李霞
- 关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶谷氨酸脱羧酶抗体抗体检测放射配体法KAPPA值GAD-AB
- 常见胰岛自身抗体阴性1型糖尿病的病因探讨被引量：14
- 2004年
- 目的 从自身免疫和分子遗传学两个角度,探讨常见胰岛自身抗体阴性的1型糖尿病患者的病因。方法 对33例GAD-Ab、IA2-Ab、IAA及TGA、TPO-Ab等自身抗体检测均为阴性的、以自发酮症起病的糖尿病患者进行少见型胰岛自身抗体——羧基肽酶H抗体(CPH-Ab)、SOX13(ICA12)抗体以及MODY3(:HNF-1α)、MODY6(NeuroD1/Beta2)和线粒体基因突变的检测。CPH-Ab及SOX13抗体以放射配体法测定,MODY3、MODY6基因突变的检测采用PCR-SSCP-测序法,线粒体基因突变的检测采用PCR-RFLP法。结果 33例患者中,发现2例为SOX13抗体阳性,而未发现CPH-Ab阳性病例。基因突变检测发现1例为HNF-1αR321H(CGC→CAC)突变,1例为线粒体ND1mt3316 G→A突变。结论 自身免疫和单基因突变(如HNF-1α、线粒体基因突变)是部分常见型胰岛自身抗体阴性1型糖尿病患者的病因;诊断特发性1型糖尿病需进一步排除自身免疫及MODY和线粒体糖尿病。
- 张冬梅周智广翁建平李莉蓉邓昊张弛金萍黄干彭健修玲玲王建平杨琳
- 关键词：胰岛自身抗体阴性胰岛素依赖型自身免疫
- 胰岛自身抗体放射配体检测法的条件优化研究被引量：1
- 2004年
- 目的 对谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD -Ab)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体 (IA -2A)、胰岛素自身抗体 (IAA)检测条件进行优化分析 ,使之更好地在临床上推广应用。方法 采用我所自建的放射配体检测法 ,对抗原抗体的孵育方式与时间、缓冲液pH值与洗涤次数、以及离心机类型选择进行优化分析 ,并通过参加国际糖尿病免疫学会 (IDS)第 3次糖尿病自身抗体标准化检测方法评估(DASP 2 0 0 3 ) ,以及与国内商品化放射免疫试剂盒比较 ,评价优化后方法的灵敏度与特异性。结果 优化后的检测条件为 :采用缓慢旋转孵育的方式使GAD -Ab、IA -2A抗原与血清孵育 2 4h ,IAA孵育 72h ,采用pH 7 2～ 7 4的TBST缓冲液对GAD -Ab、IA -2A沉淀复合物洗涤 4次 ,对IAA沉淀复合物洗涤 5次 ,以及采用水平转头低温离心机 ;DASP 2 0 0 3结果回报显示 ,检测条件优化后GAD -Ab灵敏度 82 %,特异性 98%。IA -2A灵敏度 64 %,特异性 10 0 %。 82例IAA指数呈梯度排列的标本检测结果与国内放射免疫试剂盒一致率 89%,指数 <0 0 4或 >1 0 0的标本两方法检测一致率 10 0 %,不符合的标本均为优化后方法检测为低滴度阳性 (指数在0 0 4～ 1 0 0 )而试剂盒检测阴性。结论 优化后的胰岛自身抗体放射配体检测法灵敏度和特异性好 。
- 颜湘周智广黄干李霞王建平杨琳
- 关键词：胰岛自身抗体谷氨酸脱羧酶抗体GAD-AB
- 成人隐匿性自身免疫糖尿病研究的新进展被引量：16
- 2003年
- 成人隐匿性自身免疫糖尿病(latentautoimmunediabetesinadults,LADA)属于自身免疫性缓慢起病的1型糖尿病,但其早期临床表现与2型糖尿病相似。LADA与经典1型糖尿病的自身免疫发病机制相同,不同之处在于其胰岛β细胞所受免疫损害呈缓慢性,因此LADA可作为进行1型糖尿病免疫学研究的一种人类模型。LADA的诊断目前尚无统一的国际标准,应从临床特征、易感基因、细胞和体液免疫标志、组织病理等方面综合考虑,其中胰岛自身抗体是诊断LADA的重要指标。早期应用胰岛素治疗有助于保护部分LADA患者残存的胰岛细胞功能。研究具有不同抗体滴度LADA患者的病理改变有助于了解β细胞的免疫破坏进程,尝试新的免疫干预措施,从而可能为1型糖尿病的预防甚至治愈提供依据。
- 周智广李霞
- 关键词：成人隐匿性自身免疫糖尿病
- IA-2A与GADA检测对1型糖尿病的诊断价值被引量：22
- 2004年
- 目的 了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体 (IA 2A )与谷氨酸脱羧酶抗体 (GADA)在 1型糖尿病(DM )中的检出率及其诊断价值。方法 采用放射配体法检测 114例 1型DM患者及 188名正常对照者IA 2A与GADA水平 ,并以放免法检测 1型DM患者空腹C肽 (FCP)、甲状腺球蛋白抗体 (TGAb)与甲状腺过氧化物酶抗体 (TPOAb)水平。结果 (1) 1型DM患者中GADA、IA 2A检出率分别为 49.1% (5 6/114 )和 2 4.6% (2 8/114 ) ,高于正常对照 1.1%与 0 .6% (均P <0 .0 1)。 15岁以下、病程≤ 0 .5年的 1型DM患者GADA、IA 2A检出率分别为 66.7% (8/12 )和 5 8.3 % (7/12 ) ,与白种人 (5 6.0 %～ 82 .0 %与 5 6.4%～74.4% )比较 ,GADA差异无显著性 ;而IA 2A仅低于检出率最高的国家芬兰 (85 .7% ,P <0 .0 1) ;(2 ) 15岁以下与 15岁以上 1型DM组GADA阳性率分别为 61.8% (2 1/3 4)和 43 .8% (3 5 /80 ,P >0 .0 5 ) ;而IA 2A阳性率分别为 41.2 % (14 /3 4)和 17.5 % (14 /80 ,P <0 .0 1)。病程 1年以内与病程 1年以上 1型DM患者GADA阳性率分别为 5 6.4% (3 1/5 5 )与 42 .4% (2 5 /5 9,P >0 .0 5 ) ;而IA 2A阳性率分别为 3 4.5 % (19/5 5 )对 15 .2 % (9/5 9,P <0 .0 5 ) ;(3 ) 1型DM中GADA和IA 2A阳性患者与GADA和IA 2A阴性患者比较 ,FCP水平较?
- 王建平周智广黄干邝建金萍邓志明张弛张冬梅
- 关键词：IA-2GADADM阳性率病程
- 谷氨酸脱羧酶抗体在临床初诊2型糖尿病病程中的演变被引量：1
- 2007年
- 目的观察谷氨酸脱羧酶抗体（GADAb）在临床初诊2型糖尿病（T2DM）病程中的变化情况。方法在我院内分泌科连续入组病程1年以内的初诊T2DM患者共303例。每半年或1年复查GADAb，每年复查空腹C肽，每3个月检测糖化血红蛋白。随访1～6（中位数1．2）年。结果入组时GADAb阴性的265例患者随访2年内保持阴性不变；38例GADAb阳性，随访结束时16例转阴；5例表现为抗体阳性→阴性→阳性波动；17例始终保持抗体阳性。GADAb整体上随病程发展其滴度减低（P〈0．05），且其变化仅与初始抗体滴度呈负相关（P〈0．01）。结论GADAb在临床初诊T2DM病程中存在变化。单次检测GADAb有可能漏诊自身免疫性糖尿病。
- 亓海英李霞周智广黄干杨琳陈小燕
- 关键词：谷氨酸脱羧酶随访研究
- ^(35)S标记重组人GAD_(65)抗原检测糖尿病患者GAD-Ab指数被引量：26
- 2003年
- 目的 建立一种新的谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD Ab)检测方法。方法 采用重组人GAD6 5质粒 ,经试管内转录与翻译 ,获得35S GAD6 5抗原 ,35S GAD6 5与血清在自制旋转孵育器上旋转保温 ,以蛋白质A 琼脂糖作为沉淀剂 ,用计数仪测沉淀物放射性计数 ,以GAD Ab指数 >0 .0 5作为阳性标准 ,并检测 4 3例 1型和 2 2 6例 2型糖尿病患者 ,以及 10 9例正常对照者的GAD Ab水平。结果 检测条件优化 :采用SJ15 15型35S 蛋氨酸进行试管内转录与翻译 ,自制旋转孵育器转速控制在 2 0～ 30r min ,操作环境温度为 4～ 2 5℃ ,缓冲液最佳pH值为 7.2～ 7.4 ,且新配制使用不宜超过 2周 ,以及采用水平转头离心机等。该方法批内变异系数 (CV)为 4 .9%～ 8.3% ,批间CV为 7.1%～ 10 .8% ,特异性为 98.2 % ,结果与国际标准化实验室GAD Ab检测一致率 98.3% ,Kappa值 0 .971,优于原放射配位体法。该方法检测 1型糖尿病患者阳性率为 5 8.1% (2 5 4 3例 ) ,2型糖尿病患者为 10 .2 % (2 3 2 2 6例 ) ,对照组为1.8% (2 10 9例 ) ,差异均有显著性 (P <0 .0 0 1)。结论 该方法检测GAD Ab灵敏、特异性强、重复性好 ,可望得到广泛应用。
- 黄干周智广彭健颜湘朱旭萍杨琳李霞王建平蒋铁建
- 关键词：糖尿病
