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广东省自然科学基金(S2012010008701)
作品数:
2
被引量:3
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相关作者:
张振辉
陈晓辉
江子欣
熊旭明
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微小RNA-141对人单核细胞合成高迁移率族蛋白B1的调控作用
被引量:2
2013年
目的探讨微小RNA-141(miR-141)对人单核细胞株THP-1高迁移率族蛋白B1(HMGBl)表达的调控作用。方法体外培养THP-1细胞,化学合成人miR-141的拟似物和抑制剂。用脂质体Lipofe伽t。mineRNAiMAX转染miR-141的拟似物或抑制剂进入THP-1细胞,转染48h后分别用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测HMGBl的mRNA和蛋白表达。结果转染100nmol/LmiR-141拟似物后,可提高THP-1细胞miR-141的表达水平(35.33±7.24比1.21±0.20,t=-8.408,P=0.010);转染100nmol/LmiR-141抑制剂后,可抑制THP-1细胞miR-14l的表达水平(0.55±0.12比1.09±0.05,t=7.473,P=0.002)。与相应对照组比较,THP-1细胞在过表达miR-141后,HMGBI的mRNA和蛋白表达明显下调(mRNA:0.43±0.06比0.97±0.08,t=9.760,P=0.001;蛋白:0.63±0.12比1.00±0.11,t=2.991,P=0.040);而抑制THP—1细胞中miR-141后,HMGBl的mRNA和蛋白表达均明显上调(mRNA:2.13±0.11比1.16±0.13,t=-9.977,P=0.001;蛋白:1.78±0.04比0.96±0.09,t=-13.778,P=0.000)。结论miR-141能调控人单核细胞HMGBl的表达水平,提示miR-141在调控免疫细胞的炎症反应过程中具有重要的作用。
张振辉
陈晓辉
江子欣
陈伟燕
熊旭明
关键词:
微小RNA
炎症因子
高迁移率族蛋白B1
miR-129和miR-142—3p对人单核细胞凋亡与自噬的作用研究
被引量:1
2014年
目的探讨miR-129和miR-142—3p对人单核细胞株THP-1细胞自噬和凋亡的作用。方法体外培养人单核细胞株THP-1,化学合成人miR-129、miR-142—3p、miR-218、miR-214的拟似物(mimic),用脂质体LipofectamineRNAiMAX转染mimics进入THP-1细胞,同时用内毒素脂多糖(LPS,2μg/mL)刺激细胞,48h后收集细胞标本;采用流式细胞仪方法检测细胞凋亡及存活率,westernblotting方法检测自噬相关蛋白p62的表达水平。结果THP-1细胞内过表达miR-129或miR-142—3p后,与对照组比较,THP-1细胞存活率下降,细胞凋亡率和坏死率升高(P〈0.05),白噬相关蛋白p62表达量(P〈0.05);LPS刺激细胞后亦出现类似的效应。结论miR-129和miR-142—3p能调控THP-1细胞的凋亡和自噬水平,进而影响细胞存活,提示miR-129和miR-142—3p在调控免疫细胞存活过程中具有重要作用。
张振辉
熊旭明
江子欣
杨其霖
陈晓辉
关键词:
微小RNA
单核细胞
自噬
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