国家自然科学基金(81373421)
- 作品数：48 被引量：226H指数：8
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- 5-氮杂-2′-脱氧胞苷对肺癌SPC-A1细胞增殖及SFRP1、MGMT甲基化蛋白表达的影响被引量：1
- 2021年
- 目的观察甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肺癌SPC-A1细胞增殖、细胞划痕和凋亡的影响,探讨抑癌基因分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,SFRP1)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)基因启动子区DNA甲基化mRNA和蛋白在其中的表达和意义。方法CCK-8法检测不同浓度的5-Aza-CdR对人肺癌SPC-A1细胞增殖影响,划痕实验测定5-Aza-CdR对SPC-A1细胞迁移能力的影响,Hoechst 33258染色检测(0、3、10、30μmol·L^(-1))5-Aza-CdR处理肺癌SPC-A1细胞24h后细胞凋亡情况,RT-PCR、Western blot法检测SPC-A1细胞中SFRP1和MGMT的mRNA、蛋白表达。结果5-Aza-CdR可以浓度梯度的抑制肺癌SPC-A1细胞增殖,IC 50为21.2μmol·L^(-1);5-Aza-CdR(3、10、30μmol·L^(-1))作用48 h后,肺癌SPC-A1细胞划痕愈合分别为对照组的(92.4±2.6)%、(83.6±4.2)%、(76.7±4.5)%;5-Aza-CdR处理肺癌SPC-A1细胞后,出现典型的细胞凋亡形态学改变;不同浓度5-Aza-CdR(3、10、30μmol·L^(-1))处理SPC-A1细胞24 h后,SFRP1、MGMT mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)。结论5-Aza-CdR可抑制肺癌SPC-A1细胞增殖,抑制肺癌细胞划痕修复和促进凋亡,可能与升高MGMT和SFRPl的甲基化表达有关。
- 华丛书叶静陈海葛腾飞陈晓宇
- 关键词：O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶细胞增殖
- β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后双酚A暴露的子鼠雄性生殖细胞中的表达
- 2015年
- 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路主要蛋白(β-catenin、DKK-1)在出生前后双酚A(BPA)暴露的成年子鼠雄性生殖细胞中的表达及意义。方法自受孕第0天(PGD0),ICR孕鼠饮水BPA染毒,随机将孕鼠分为溶剂对照组、BPA低剂量(10 nmol/L)组、BPA中剂量(50 nmol/L)组、BPA高剂量(300 nmol/L)组,每组6只。雄性仔鼠出生后继续饮水染毒,剂量同上,6周(PGD42)处死,取睾丸组织,计算睾丸系数;免疫组化和Western blot法检测β-catenin、DKK-1蛋白的表达。结果 BPA暴露组较溶剂对照组仔鼠睾丸脏器系数降低,β-catenin、DKK-1蛋白表达明显增加;免疫组化显示,β-catenin、DKK-1蛋白多位于睾丸间质细胞和精原细胞中。结论β-catenin、DKK-1可能参与了出生前后BPA暴露对子鼠雄性生殖细胞发育的影响。
- 杨小四刘晓利宋先兵张俊强赵欢陈晓宇
- 关键词：双酚AΒ-CATENIN蛋白睾丸生殖细胞
- 透射电镜下观察白藜芦醇对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响被引量：2
- 2019年
- 目的通过白藜芦醇(RES)作用佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞后投射电镜下超微结构的改变,探讨RES对AA大鼠作用效果。方法用弗氏完全佐剂在SD大鼠左足趾皮下注射诱导关节炎复制AA模型,通过组织块移植培养法培养滑膜细胞,将不同浓度的RES溶液加入培养的滑膜细胞中,通过透射电子显微镜观察踝关节滑膜细胞超微结构的改变,了解滑膜细胞的形态学变化以及对滑膜细胞凋亡的影响。结果电镜观察可见RES(20、50μmol/L)对AA大鼠滑膜细胞中线粒体、高尔基体等细胞器的数量及形态有恢复作用,RES可以诱导细胞凋亡,电镜观察有典型的凋亡细胞核。结论RES对AA大鼠滑膜细胞的凋亡有促进作用。
- 杨珺陈晓宇宋先兵汪晓庆
- 关键词：白藜芦醇佐剂性关节炎滑膜细胞细胞凋亡
- 白藜芦醇对佐剂性关节炎大鼠血管内皮因子表达的影响被引量：5
- 2015年
- 目的探讨白藜芦醇(Res)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠关节滑膜组织的抗炎作用和对血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法 60只SD大鼠随机分正常组(10只)和模型组(50只),模型组左后足趾皮内注射弗氏完全佐剂建立AA模型,模型组在建模后12 d再分5组:模型对照组、Res低剂量组(5 mg/kg)、Res中剂量组(15 mg/kg)、Res高剂量组(30 mg/kg)、阳性药塞来昔布组(5 mg/kg),给药16 d后处死大鼠,对各组大鼠踝关节滑膜组织行病理切片、HE染色和VEGF免疫组化染色。观察滑膜增生、血管翳形成、炎症渗出、关节软骨和骨破坏等情况。Western blot法检测VEGF蛋白的表达情况。结果 Res治疗组的关节病理学评分明显低于模型对照组,免疫组化染色以及Western blot结果显示,Res能降低滑膜组织VEGF表达水平。结论 Res有改善大鼠关节滑膜炎症、抑制滑膜组织VEGF表达的作用,这可能与Res治疗AA关节炎有关。
- 卢锦森马中飞纵何香叶桂萍郭利梅何舒宁张梦琳陈晓宇
- 关键词：佐剂性关节炎白藜芦醇血管内皮因子
- 单胎稽留流产628例危险因素分析被引量：13
- 2021年
- 稽留流产是胚胎在妊娠12~20周内停育并死亡,且停育胚胎滞留于孕妇宫腔,不能及时自然娩出[1]。统计显示[2],约有2%的单胎妊娠孕妇发生稽留流产。胚胎死亡后残留在母体,会引起机体凝血功能紊乱等危害[3]。
- 银萍徐福霞周琳汪陶荣陈晓宇
- 关键词：稽留流产自然娩出单胎妊娠胚胎死亡凝血功能紊乱
- 白藜芦醇抑制低浓度H2O2处理佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖的机制研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨抗氧化剂白藜芦醇(Res)对低浓度H_2O_2处理的佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的抑制作用。方法弗氏完全佐剂足趾皮下注射SD雄性大鼠,建立AA模型,14 d后股动脉放血处死AA大鼠,取血清检测氧化应激指标,组织块培养法培养大鼠滑膜细胞,CCK-8法观察不同浓度的H_2O_2对FLS的增殖影响,Western blot法检测氧化应激相关蛋白去乙酰化酶3(SIRT3)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白的表达。结果 AA模型大鼠血清氧化应激指标升高,体外实验表明,随着Res的浓度增加,低浓度H_2O_2处理的AA大鼠FLS增殖受抑制,SIRT3、MnSOD蛋白表达降低。结论 Res可减轻AA大鼠体内的氧化应激状态,机制与降低抗氧化应激蛋白SIRT3、MnSOD的表达有关。
- 李娜李娜张俊强曹威胡永涛陈晓宇
- 关键词：佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞白藜芦醇锰超氧化物歧化酶
- Hedgehog信号通路阻断剂环巴胺体外对佐剂性关节炎大鼠的关节软骨细胞增殖的影响被引量：7
- 2016年
- 目的探讨Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂环巴胺体外对佐剂性关节炎大鼠(AA)模型的关节软骨细胞增殖的影响和部分机制。方法弗氏完全佐剂诱导AA大鼠,测量关节炎指数和继发性足肿胀度,HE染色观察两组软骨组织生长情况;取AA大鼠踝关节软骨组织,采用胰蛋白酶-胶原酶法分离、培养、鉴定,环巴胺(0、0.05、0.5、5、20μmol/L)体外给药,MTT法检测AA大鼠踝关节软骨细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染检测AA大鼠踝关节软骨细胞凋亡,Western blotting检测AA大鼠踝关节软骨细胞Shh、Ptch1、Gli1的蛋白表达。结果弗氏完全佐剂诱导后,与正常大鼠相比,AA大鼠关节炎指数和继发性足肿胀度明显升高,HE染色显示,AA大鼠踝关节软骨组织有破坏;甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原鉴定体外成功培养AA大鼠踝关节软骨细胞;体外给药环巴胺(0.05、0.5、5、20μmol/L)可升高AA模型关节软骨细胞增殖,流式细胞检测结果显示,环巴胺能降低AA模型软骨细胞凋亡率;与未用环巴胺组相比,环巴胺(0.5、5、20μmol/L)给药对AA软骨细胞中Hh信号通路相关蛋白(Shh、Ptch1、Gli1)表达显著下降。结论弗氏完全佐剂诱导建立AA大鼠模型成立,体外给药环巴胺可抑制AA大鼠软骨细胞的增殖,抑制软骨细胞的凋亡,该作用与抑制AA大鼠软骨细胞Hh信号有关。
- 宋先兵张俊强曹威杨小四刘梅梅陈晓宇
- 关键词：佐剂性关节炎关节软骨细胞环巴胺HEDGEHOG信号通路增殖
- 野菊花总黄酮增强细胞自噬促进β淀粉样蛋白清除被引量：4
- 2017年
- 目的探讨野菊花总黄酮(total fl avonoids of Chrysanthemu m,TFC)清除β淀粉样蛋白的作用和分子机制。方法采用CCK-8法观察不同浓度TFC对SH-SY5Y神经细胞株增殖的影响,ELISA法检测TFC对转染过表达淀粉样前体蛋白(APP)和淀粉蛋白前β位分解酶1(BACE1)的CHO细胞培养上清液中Aβ水平的影响,MDC染色检测TFC处理后的神经元内自噬小体的形成,Western blot检测自噬蛋白LC3表达水平。结果 CCK-8法分析显示,TFC对SH-SY5Y神经元活力无明显影响;ELISA检测显示,TFC处理使过表达APP和BACE1的CHO细胞培养上清液中Aβ水平呈浓度依赖性降低;荧光倒置显微镜下观察和Western blot检测发现,TFC处理后SH-SY5Y细胞自噬增加,LC3/LC3自噬标志物蛋白表达增强。结论 TFC可能通过增强细胞自噬而促进Aβ的清除,减少Aβ细胞毒性。
- 杨小四赵欢曹威张俊强陈晓宇
- 关键词：Β淀粉样蛋白LC3自噬野菊花总黄酮
- 白藜芦醇诱导胃腺癌SGC7901细胞凋亡及下调血管生成拟态相关蛋白水平被引量：1
- 2016年
- 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)诱导人胃腺癌SGGC7901细胞株凋亡及对血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的影响。方法 MTT法检测不同浓度Res对胃腺癌SGC7901细胞株活力的影响,Annexin V/PI双染法流式细胞术检测Res对胃腺癌细胞凋亡的影响,蛋白免疫印迹法检测不同浓度Res对VM相关蛋白VE-cadherin、MMP-2水平的影响。结果Res对胃腺癌SGC7901细胞株活力呈明显的浓度依赖性抑制作用,流式细胞仪检测显示Res处理组细胞凋亡率较对照组显著升高。免疫印迹法检测发现VE-cadherin、MMP-2水平随着RES处理浓度的增加逐渐下降。结论 Res可能通过抑制增殖、下调VM相关蛋白抑制VM,从而诱导胃癌细胞调亡。
- 汪晓庆曹威宋先兵张俊强陈晓宇潘献柱吴义春
- 关键词：白藜芦醇SGC7901细胞细胞凋亡血管生成拟态
- 白藜芦醇对过氧化氢诱导滑膜细胞凋亡的作用及机制被引量：5
- 2016年
- 摘要目的：研究白藜芦醇（RES）对过氧化氢（H2O2）处理的大鼠佐剂性关节炎（AA）成纤维样滑膜细胞（FLS）凋亡的影响，并探讨Fox基因在其中的作用。方法：采用足趾皮下注射弗氏完全佐剂诱导SD大鼠AA模型，26d成模后，取致炎侧踝关节滑膜组织，应用组织块培养法培养FLS，取第3代FLS用于实验，首先采用CCK-8法观察不同浓度的H2O2对FLS增殖的影响，Annexinv-FITC—PI流式细胞术检测不同浓度的白藜芦醇对H202（20μmol／L）处理的FLS细胞凋亡率；RT-PCR检测各组FLS中FoxO1、Fox04基因水平的表达，免疫印迹检测FLS中Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果：H202（≤20μmol／L）在一定浓度范围内，促进FLS生长；当H202（〉20μmol／L）增加时，Hz02诱导的FLS凋亡数明显增高；随着白藜芦醇浓度的升高，FLS的细胞凋亡率明显升高，白藜芦醇明显降低FoxO1、FoxO4基因水平的表达，增加了细胞内Bcl-2蛋白表达，抑制细胞内Bax表达。结论：白藜芦醇可通过下调FoxO1、FoxO4基因表达，上调抗凋亡Bcl-2蛋白表达，抑制Bax蛋白的表达，诱导滑膜细胞的凋亡。
- 俞晨张俊强储海峰李简苏会萍曹威宋先兵陈晓宇
- 关键词：白藜芦醇过氧化氢滑膜细胞凋亡
