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广东省科技计划工业攻关项目(2KM05301S)
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胡荣欣
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人乳头瘤病毒16L1/E7CTL重组杆状病毒载体的构建及鉴定
2007年
目的研制人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1/E7CTL重组杆状病毒载体。方法以包含HPV16标准病毒株的质粒pHPV16为模板,采用PCR技术扩增HPV16主要衣壳蛋白L1(1-471aa)的基因序列,同时人工合成E7蛋白CTL表位E749-57的编码序列,将两个目的基因逐步连接构建重组质粒pUC19HPV16L1/E7CTL,HPV16L1/E7CTL片段经质粒pFast Bac1转位至Bacmid DNA后通过PCR鉴定重组杆粒。结果成功构建了包含融合基因HPV16L1/E7CTL片段的克隆质粒pUC19HPV16L1/E7CTL,制备了L1/E7CTL重组杆状病毒载体杆粒BACMID DNA。结论采用分子克隆技术构建了包含L1/E7CTL的重组杆粒BACMID DNA,有利于下一步融合蛋白的表达,制备一种能够更有效激发CTL杀伤作用的嵌合病毒样颗粒疫苗,为疫苗研制打下基础。
胡荣欣
高谦
卢斯汉
林正
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乳头瘤病毒16型
重组杆状病毒
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