哈尔滨市科技攻关计划项目(2012AA6BN020)
- 作品数：6 被引量：36H指数：4
- 相关作者：朱远茂马磊薛飞杨婷任建乐更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技攻关计划项目国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛副流感的流行、危害及其防控被引量：9
- 2016年
- 牛副流感（Bovine parainfluenza）是由牛副流感病毒3型（Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3）引起的一种急性接触性传染病,曾被称为“船运热”（Shipping fever）。应激因素如运输、转群、气候变化等容易诱发牛副流感病的局部流行。BPIV3感染牛多表现出精神沉郁、
- 朱远茂马磊杨婷宋文凤薛飞
- 关键词：副流感病毒急性接触性传染病VIRUS应激因素气候变化
- 牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白表位鉴定
- 2015年
- 为鉴定牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)g D蛋白抗原表位,本研究利用p ET-30a原核表达系统表达、纯化了重组g D蛋白,采用超速离心纯化的IBRV免疫BALB/c小鼠,取脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,以重组g D蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA筛选出一株稳定分泌抗g D蛋白的MAb杂交瘤细胞株(1G3)。间接免疫荧光结果表明:MAb与IBRV呈阳性反应,中和试验测定其腹水中和效价为1∶32。利用肽扫描技术原核表达GST融合短肽对MAb 1G3识别的抗原表位进行筛选鉴定,结果表明:该MAb识别的抗原表位为259EESKGYE265。蛋白序列分析表明该抗原表位在IBRV各分离株及牛疱疹病毒5型(Bo HV-5)中均保守。本研究为IBRV的糖蛋白g D的结构和免疫学特性及IBRV致病性的深入研究奠定了基础。
- 周跃辉朱远茂任建乐严昊王雪枝马磊史鸿飞薛飞
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒单克隆抗体
- 我国牛传染性鼻气管炎研究现状及防控展望被引量：9
- 2016年
- 牛传染性鼻气管炎（IBR）,或称为传染性脓疱性外阴阴道炎（IPV）,是由牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）引起的牛的一种急性接触性传染病,在临床上表现多种病型,如上呼吸道黏膜炎症、结膜炎、乳房炎、脓疱性外阴阴道炎或龟头包皮炎、幼牛脑膜脑炎和流产等,可以认为是由同一种病原引起多种病症的疫病。世界动物卫生组织将IBR列为B类动物疫病。IBR于1953年在美国加利福尼亚州首次被报道,其后引起了全球重视。
- 薛飞朱远茂马磊
- 关键词：外阴阴道炎牛疱疹病毒龟头包皮炎病型基因缺失疫苗病毒中和试验
- 牛病毒性腹泻病毒p80蛋白的表达及其单克隆抗体的制备被引量：3
- 2016年
- 为了制备牛病毒性腹泻病毒（BVDV）p80蛋白单克隆抗体,试验采用BVDV接种牛肾细胞（MDBK）,提取病毒RNA,通过RT-PCR扩增出BVDV的p80基因,将其定向克隆到原核表达载体pET30a,得到重组表达质粒pET30a-p80。将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）表达菌,挑选单菌落并扩大培养,经IPTG诱导和SDS-PAGE以及Western-blot分析表明重组蛋白p80获得了表达,分子质量约为44ku。同时用浓缩的BVDV培养液免疫6-8周龄的Balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合。利用纯化的重组蛋白p80作为检测抗原的间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,经过3次亚克隆后对获得的杂交瘤细胞进行间接免疫荧光（IFA）和抗体亚类鉴定及腹水的制备和效价的测定。结果表明：重组p80蛋白具有很好的反应性;获得8株稳定分泌针对BVDVp80蛋白的杂交瘤细胞株,分别为3E3、2A4、8H9、3G3、2B3、3G2、2G2和4A11;8株杂交瘤细胞株接种Balb/c小鼠制备腹水,采用BVDV作为包被原的间接ELISA方法测得其效价为1×10^5-1×10^7;8株杂交瘤细胞所分泌的MAb具有良好的反应性和特异性;8株单克隆抗体的抗体亚类均为IgM/κ。说明制备的重组p80蛋白单克隆抗体可试用于建立检测BVDV抗原的诊断方法。
- 杨立新朱远茂周跃辉任建乐马磊杨婷薛飞
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒免疫印迹试验单克隆抗体IGM间接免疫荧光试验
- 牛病毒性腹泻病毒LJ36/14的分离与鉴定被引量：4
- 2016年
- 为确定牛呼吸道传染病的病原,本研究对2014年从黑龙江省发生牛呼吸道传染病的某肉牛场采集的40份鼻拭子进行了病毒分离,结果分离到一株牛病毒性腹泻病毒(BVDV),命名为LJ36/14株。病毒鉴定结果表明,分离株在单层MDBK细胞中不产生细胞病变;利用BVDV p80蛋白的单克隆抗体(MAb)进行的间接免疫荧光试验表明接种LJ36/14株的细胞结果显示阳性。分离株的TCID_(50)为10^(5.9)/0.1 mL。对该分离株的5'端非编码区(5'UTR)和Npro基因进化树分析表明该分离株为国内首次分离并鉴定的基因亚型,即BVDV1v亚型。本研究为了解BVDV地理分布和流行情况及BVDV疫苗的制发奠定了基础。
- 朱远茂杨立新马磊任建乐杨婷薛飞
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒间接免疫荧光反转录-聚合酶链式反应
- 我国牛病毒性腹泻/黏膜病研究进展及防控策略被引量：11
- 2016年
- 本文从病毒分离及基因分型、血清流行病学、诊断方法、免疫研究四个方面介绍了我国牛病毒性腹泻黏膜病的研究进展情况,并提出了防控策略。
- 薛飞朱远茂马磊
- 关键词：防控策略
