国家杰出青年科学基金(30125005) 作品数:4 被引量:37 H指数:3 相关作者: 刘强 赵南明 公衍道 阳文龙 刘敬梅 更多>> 相关机构: 清华大学 中国农业科学院 中国科学院遗传与发育生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家杰出青年科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
高羊茅MAPK基因的克隆与表达分析(英文) 被引量:2 2006年 丝裂原活化蛋白激酶(M APK)是生物体内信号转导的重要组分,与生长、发育和逆境胁迫反应密切相关.为了研究草坪草对非生物逆境胁迫反应的分子机理,利用同源基因克隆法从4℃低温诱导的草坪草高羊茅(F estu-ca arund inacea Schreb.)幼苗cDNA文库中分离得到一个M APK的cDNA即F aMAPK 1,F aMAPK 1编码369个氨基酸残基的蛋白激酶,该蛋白激酶具有TEY的磷酸化基序.据推测的氨基酸序列的BLA ST同源性分析表明,F aM APK 1蛋白与水稻O sM APK 4蛋白的一致性为91.1%.N orthern杂交检测F aMAPK 1基因对逆境胁迫反应的结果表明冷(4℃)处理对根中F aMAPK 1基因的表达没有明显影响,但诱导叶中F aMAPK 1上调表达.而且低温(4℃)、高盐(250 mm o l/L N aC l)、干旱和100μm o l/L ABA都诱导叶中F aMAPK 1上调表达,表明F aM APK 1蛋白可能在高羊茅对非生物逆境胁迫的反应中起重要作用. 阳文龙 刘敬梅 刘强 公衍道 赵南明关键词:丝裂原活化蛋白激酶 高羊茅 高羊茅DREB类转录因子基因的分离及鉴定分析 被引量:23 2006年 DREB转录因子是植物中特有的与低温、高盐和干旱胁迫相关的反式作用因子。为了分离和鉴定高羊茅(Festuca arundinaceaSchreb.)DREB转录因子基因,我们构建了冷诱导(4℃)的高羊茅cDNA文库,用拟南芥DREB1A基因作探针筛选该文库得到一个DREB类基因FaDREB1。序列分析表明,FaDREB1具有一个651bp的开放阅读框和229bp的3’非编码区,推测的氨基酸序列中含有一个高度保守的EREBP/AP2结构域。酵母单杂交结果表明FaDREB1蛋白能在体外特异结合DRE元件,并具有转录激活功能。Northern杂交结果发现FaDREB1基因受低温的诱导表达,对高盐、干旱和ABA没有反应,说明FaDREB1基因在高羊茅植株对低温的应答反应中起重要作用。 阳文龙 刘敬梅 刘强 公衍道 赵南明关键词:高羊茅 DRE元件 转录因子 胁迫 玉米中与DRE元件结合的转录因子的克隆和结构分析(英文) 被引量:11 2003年 DREB类的转录因子特异性地与DRE元件 (脱水应答元件 )结合 ,在植物感受干旱、高盐及低温等逆境条件时 ,激活一系列下游逆境应答基因的表达。进一步的研究发现 ,拟南芥DREB蛋白的DNA结合域 (AP2区 )中 14位的缬氨酸和 19位的谷氨酸对该类转录因子与DNA结合起着关键性的作用。利用酵母单杂交的方法 ,我们从玉米(ZeamaysL .)的cDNA文库中分离到一个编码与DRE元件结合的蛋白的基因 ,命名为maDREB1。酵母体内的反式激活实验表明 ,该基因编码的蛋白能特异地与DRE元件结合并能激活下游报告基因的表达。对maDREB1蛋白14位和 19位的氨基酸进行单点突变和双点突变实验 ,发现 14位的缬氨酸突变为丙氨酸后maDREB1几乎丧失了其转录激活能力 ,而 秦峰 李洁 张贵友 赵军 陈受宜 刘强关键词:玉米 转录因子 高羊茅中一个DREB类转录因子基因的分离及鉴定分析 被引量:3 2006年 为了鉴定草坪草高羊茅(Festucaarundinacea Schreb.)中与低温、高盐和干旱胁迫相关的基因,我们构建了冷诱导(4℃)的高羊茅cDNA文库,并从这个文库中分离得到一个DREB类转录因子基因,FaDREB1A.序列分析表明,FaDREB1A具有一个717bp的开放阅读框和143bp的3’非编码区,推测的氨基酸序列中含有一个高度保守的EREBP/AP2结构域.酵母单杂交结果表明,FaDREB1A蛋白能在体外特异结合DRE元件,并具有转录激活功能.Southern杂交结果显示,FaDREB1A在高羊茅基因组中可能是单拷贝或低拷贝基因.Northern杂交结果发现,FaDREB1A基因受低温、高盐和干旱的诱导表达,对ABA没有反应,说明FaDREB1A基因在高羊茅植株对低温、高盐和干旱的应答反应中起重要作用. 阳文龙 刘敬梅 刘强 公衍道 赵南明关键词:高羊茅 DRE元件 转录因子 胁迫