中国博士后科学基金(20100470086)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：王晓昌张崇淼孙婷婷李宪谢润欣更多>>
- 相关机构：西安建筑科技大学清华大学更多>>
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- 相关领域：环境科学与工程医药卫生更多>>
- 城市生活污水中志贺氏菌ipaH毒力基因的定量PCR检测被引量：5
- 2013年
- 基于ipaH毒力基因的实时荧光定量PCR检测,建立适合城市污水中志贺氏菌的定量检测方法。使用从临床分离出的志贺氏菌构建重组质粒作为实时荧光定量PCR的标准品。在ipaH基因模板量2.58×100～2.58×106copy范围内具有良好的线性关系,每100 mL水样中含有2.58×101copy以上的ipaH基因即可被检出。从西安市生活污水分离得到2株野生型志贺氏菌,分析ipaH基因数量和菌体数量的关系,从而确定ipaH基因定量检测志贺氏菌的可行性。该方法灵敏、快速、特异性好,适用于城市生活污水中志贺氏菌的检测。
- 孙婷婷张崇淼王晓昌李宪谢润欣
- 关键词：实时荧光定量PCR志贺氏菌IPAH基因城市生活污水
- 人类特异性粪厌氧菌基因标记物实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用被引量：1
- 2013年
- 针对人类粪便污染,选择来源于拟杆菌和双歧杆菌16S rRNA的基因片段作为标记物,分别建立了相应的实时荧光定量PCR检测方法。选取不同来源的粪便样品进行检测,证实了引物的特异性。回收纯化从污水中扩增所得的目标PCR片段,经过连接转化,筛选阳性克隆提取其重组质粒作为实时荧光定量PCR的标准品。通过检测一系列梯度稀释的标准品,确定了拟杆菌基因标记物和双歧杆菌基因标记物定量PCR检测方法分别在1.98×102～1.98×107copy/μL和2.12×101～2.12×107copy/μL范围内具有良好的线性关系。
- 李宪张崇淼王晓昌孙婷婷谢润欣
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 二级处理出水中伤寒沙门菌的定量PCR检测被引量：2
- 2011年
- 目的建立城市污水二级处理出水中伤寒沙门菌的定量PCR检测方法。方法以构建的伤寒沙门菌重组质粒作为标准品,采用whatman2号(孔径为8μm)定性滤纸对水样预过滤,硝酸纤维素膜浓缩水样,选用伤寒沙门菌特异性引物ST3和ST4进行实时荧光定量PCR(quantitative PCR,QPCR)检测。结果在2.8×101～2.8×108基因组相当量拷贝数(genome equivalent copy,GEC)模板量的线性范围内,所得回归方程线性关系较好(r=0.995 5)。该方法的检测灵敏度为1.4×101 GEC/μl。结论该方法快速、特异、灵敏,适用于城市污水厂二级处理出水的伤寒沙门菌的定量检测。
- 赵利方张崇淼王晓昌
- 关键词：伤寒沙门菌二级处理出水定量PCR
- 多管发酵-菌落PCR法定量检测水中可培养沙门氏菌被引量：6
- 2012年
- 采用膜吸附-洗脱法浓缩水样,通过多管发酵法筛选出以可培养沙门氏菌为主的活体细菌.根据沙门氏菌invA基因的保守性,利用沙门氏菌属通用引物进行菌落PCR鉴定,进而确定沙门氏菌阳性平板数量.运用最大可能数法分析数据,计算出水样中可培养沙门氏菌的含量.该方法对沙门氏菌具有良好的特异性和涵盖性.通过对人工污染水样和城市污水厂二级处理出水的检测,证明了多管发酵-菌落PCR方法的检测结果较为准确,可操作性强,能够更真实地反映样品中沙门氏菌的活性.
- 张崇淼王晓昌周进宏孙婷婷魏梦楠曾颂
