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满园香梨叶片不定芽的诱导被引量：9: 2005年; 采用正交试验设计研究了不同基本培养基、TDZ、生长素种类及其浓度4个因素组合对满园香梨(Pyrusus鄄suriensisMaxim.cv.Manyuanxiang)离体叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基的种类是影响叶片不定芽再生最重要的因素,其次是生长素的种类。通过叶片不定芽再生频率和平均每叶再生不定芽数分析表明,NN69+TDZ3.0mg/L+IAA0.2mg/L为满园香梨叶片不定芽发生的最佳培养基组合,在该培养基组合上,满园香梨叶片再生率和平均再生芽数分别达到了74.8%和4.40。同一叶片的基部和顶端比中部更有利于不定芽的再生。; 汤浩茹刘翠琼罗娅; 关键词：离体叶片不定芽再生

培养基和培养条件对4个梨基因型试管苗生根的影响被引量：15: 2006年; 试验以4种基因型梨试管苗为试材,在含有MS、ASH、1/2MS、1/4MS及不同IBA和蔗糖浓度的培养基上,采用前期光、暗培养各10d,然后转入有无活性碳(AC)和IBA的处理中在光照下生根。试验用L16(45)正交设计,通过生根率、平均根数、平均根长、平均株根鲜重和平均株根干重5个指标考查了基本培养基、IBA、AC以及光照对梨试管苗生根的影响。结果表明:IBA和蔗糖对于梨根的诱导是十分必要的,而在根的生长阶段IBA不是必需的;1.0～5.0mg/LIBA+5.0～15.0g/L蔗糖+0.5～1.0g/LAC组合下梨的生根率为75%～100%;前期暗培养能有效促进东方梨品种早酥梨和身不知根的发生,而对西洋梨品种巴梨和考密斯根的诱导效果较差。; 汤浩茹刘翠琼罗娅王小蓉; 关键词：试管苗培养基

彩色猕猴桃与美味猕猴桃的遗传差异分析被引量：8: 2006年; 彩色猕猴桃(Actinidia deliciosa var．coloris)为美味猕猴桃(A．deliciosa var．deliciosa)的红心变种,数量稀少,十分珍贵,是中国特有的种质资源,具有重要的育种价值。采用RAPD技术研究彩色猕猴桃红美,TJ-DD—19,TJ- DD-54,TJ—DD-75和Ckou—DD-18的遗传多样性,以及它们与3个有代表性美味猕猴桃品种川猕1号,秦美和海沃德的遗传差异性。从120个引物中筛选出扩增效果较好的18个引物,共扩增出242条带,其中多态性带206条,占85．1％。各引物扩增的条带数在5～18条不等,平均每个引物扩增出的带数为13．4条。结果表明,彩色猕猴桃和美味猕猴桃具有复杂的遗传关系,它们除了变种间具有较大的遗传差异外,变种内也存在一定的遗传差异。同时,采用UPGMA法聚类的结果与传统的形态分类存在一定的差异,但部分反映了猕猴桃的地理分布。; 董晓莉汤浩茹丁建李明章郑晓琴杨足君; 关键词：美味猕猴桃 AMPLIFICATION POLYMORPHIC

甘薯G病毒外壳蛋白基因克隆与序列分析被引量：4: 2006年; 根据已报道的甘薯G病毒(SweetpotatovirusG,SPVG)外壳蛋白基因(coatprotein,CP)序列,设计和合成了一对特异引物,采用反转录-聚合酶链式反应(Reversetranscription-polymerasechainre-action,RT-PCR)技术,从甘薯病叶总RNA中克隆到了SPVG-CPSC1和SPVG-CPSC2两个约700bp的cDNA片段。该片段与pMD18-T载体连接后转化EscherichiacoliJM109,对筛选到的阳性克隆进行序列测定与分析结果表明,该片段与已报道的甘薯G病毒外壳蛋白基因具有较高的同源性,证实获得的DNA片段是SPVG的外壳蛋白基因。两个克隆片段与埃及分离物Egypt1的序列同源性最高,核苷酸同源性分别为98.7%和89.1%,对应推导的氨基酸同源性分别为98.7%和94.8%,与中国分离物CH2的序列同源性最低,核苷酸同源性分别为87.4%和87.0%,对应推导的氨基酸同源性分别为96.6%和94.8%,而2个克隆片段之间的核苷酸以及对应推导的氨基酸序列同源性分别为89.5%和96.1%,表明SPVG具有一定的多态性。; 古英洪汤浩茹张义正; 关键词：外壳蛋白 RT-PCR 基因克隆

枳壳CBF转录激活因子基因片段的克隆被引量：5: 2008年; 根据不同植物CBF同源基因的保守区设计合成简并引物,采用PCR技术首次从枳壳基因组中分离出一个DNA片段并克隆到pMD18-T载体中。序列测定和分析表明,该片段长464bp,与拟南芥3个CBF基因的核酸序列及其推导的氨基酸序列分别具有79%和67%～69%的同源性,而且推导的氨基酸序列含有同源性更高的AP2 DNA结合域和CBF蛋白的两段特征序列PKK/RPAGRxKFxETRHP和DSAWR。结果表明,本研究克隆的片段为枳壳CBF基因片段。; 张杰汤浩茹罗娅张勇; 关键词：枳壳 CBF基因克隆

桃PGIP蛋白基因片段的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达被引量：13: 2008年; 【目的】克隆桃(Prunus persica)多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polygalacturonase-inhibiting protein,PGIP)基因,并进行原核表达研究。【方法】根据李属植物pgip保守区域设计1对特异引物,以桃叶片总RNA为模板,通过RT-PCR获得了约1kb的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定,并对该序列进行分析。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建融合表达质粒,转化到Escherichia coli Rosetta-gami(DE3)pLysS中进行表达。【结果】测序结果显示,桃多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白cDNA编码区长993bp,编码330个氨基酸残基,命名为Pppgip。PpPGIP分子量为36.4kD,等电点为7.42,信号肽为N端24个氨基酸残基,具有7个潜在的N-糖基化位点。Pppgip与李属其它pgip核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为93.2%～94.6%和89.7%～92.7%。同源树分析表明,该基因明显区别于其它pgip,与马哈利樱桃pgip的关系较近,与寿星桃、桃栽培品种‘久保’等pgip的关系都较远。该基因所编码的蛋白质的三维结构含11个α-螺旋和21个β-折叠,中心LRR结构域由10个串联的LRRs基序组成。原核表达产物经SDS-PAGE分析表明,重组蛋白主要以包涵体形式出现。【结论】克隆了桃PGIP基因,并可在大肠杆菌中表达。; 古英洪汤浩茹张义正; 关键词：多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因克隆基因表达

柑橘‘不知火’果实上INA细菌的分离鉴定及室内防除被引量：2: 2008年; 从目前南方发展的优质杂交柑‘不知火’所面临的霜冻问题出发,分离、纯化四川盆地‘不知火’果实上可能存在的优势冰核活性细菌(ice-nucleation active bacteria,INA)。细菌学鉴定和室内防治试验结果表明:分离出的9株INA细菌4株为Erwinia ananas,5株为Pseudomonas syringaepvs.,其冰核活性均受温度、菌液浓度及pH值的影响。供试的抗霜素1号、石硫合剂、代森锰锌三种化学药剂对所分离的INA细菌室内防除效果均在90%以上,其中以抗霜素1号防除效果最好。同时,在同一生态条件下的‘伏令夏橙’果实上还分离出3株对INA细菌有拮抗作用的拮抗菌。; 汪志辉廖明安杨文渊陈善波黄蕾边强吉; 关键词：INA细菌霜冻杂交柑

梨矮化中间砧S_2、S_5和PDR_(54)的离体培养研究被引量：8: 2006年; 以梨矮化中间砧S2、S5和PDR54试管苗为试材，探讨了培养基和植物生长调节剂对梨矮化中间砧试管苗增殖和生根的效应。其结果表明：MS培养基较QL、AS和WPM培养基更有利于中间砧茎的增殖，2—3mg·L^-1 6-BA、0．1—0．2mg·L^-1 IBA和1—2mg·L^-1 GA3组合能有效促进S2、S5和PDR54试管苗的增殖，其增殖倍数达3．71—5．83。综合各品种增殖倍数、茎高度以及茎质量等指标表明，MS＋3．0mg·L^-1 6-BA＋0．2mg·L^-1 IBA＋2．0mg·L^-1 GA3是S2的最佳增殖培养基；MS＋2．0mg·L^-1 6·BA＋0．1mg·L^-1 IBA＋1．0mg·L^-1 GA3是S5和PDR54增殖的最佳培养基。同时，S2、S5和PDR54增殖的试管苗在不同的生根条件下分别获得了67％、50％和86％的生根率。; 罗娅汤浩茹李秀梅王小蓉; 关键词：矮化中间砧快繁

DNA分子标记在猕猴桃上的应用被引量：14: 2005年; 猕猴桃为中国半特有属植物,由于雌雄异株,自然杂交明显,染色体倍性复杂等原因,用常规方法对其进行种类(品种)鉴定、系谱分析、遗传多样性研究等难度较大。DNA分子标记具有许多优点,它的发展和应用为猕猴桃研究提供了一条有效的途径。就DNA分子标记在猕猴桃系谱分析与品种(品系)鉴定、性别鉴定、染色体起源分析、胞质遗传与系统发育研究、遗传多样性研究和分子遗传图谱构建等方面的应用进行了详细阐述,同时指出了DNA分子标记在猕猴桃研究中存在的问题和今后研究工作的重点。; 董晓莉汤浩茹甘玲李明章; 关键词：DNA分子标记猕猴桃性别鉴定

树莓部分野生种及栽培品种花粉亚显微形态的比较被引量：23: 2007年; 用扫描电镜对树莓属有育种潜力的分属于空心莓组和木莓组的8个野生种及从国外引进的分属于黑莓种群和树莓种群的17个栽培品种共25份材料的花粉形态进行了系统观察和比较分析。结果表明:所观察的树莓花粉均为长球形或超长球形(P/E为1.67～2.42),大小多为25.52μm×15.37μm至50.06μm×25.65μm。花粉外壁纹饰在组内和栽培种群内有一定的相似性,但同时变异丰富,在不同种之间、甚至在不同品种之间区别明显。空心莓组的5个种和树莓种群的品种的外壁纹饰以条纹—穿孔状为主,黑莓种群品种的主要为条纹状和条纹—穿孔状,与木莓组的3个种的差异较大。聚类分析结果表明,花粉大小和外壁纹饰特征可基本反映树莓属下组及栽培种群的划分,树莓种群品种与空心莓组的插田泡和茅莓的亲缘关系较近;而黑莓种群与木莓组的3个有果用育种潜力的任一种的亲缘关系均较远。; 王小蓉汤浩茹黄力贺宗珍董晓莉付华清邓群仙; 关键词：花粉亚显微形态孢粉学

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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-04-0905)

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