湖北省教育厅科学技术研究项目(Q20121117)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：周志斌姜丹李小好更多>>
- 相关机构：武汉科技大学附属天佑医院武汉工程大学更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅科学技术研究项目湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Toll样受体4和核因子-κB信号通路在溶血磷脂酸致动脉粥样硬化中的作用被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨Toll样受体4（TLR4）/NF-κB 信号通路在溶血磷脂酸（LPA）致动脉粥样硬化中的作用.方法 以不同浓度LPA（0~10 μmol/L）刺激人单核细胞株THP-1细胞4 h,以及LPA 1 μmol/L处理THP-1细胞不同时间（0~8 h）,荧光定量RT-PCR法测定TLR4 mRNA表达,Western blot检测TLR4蛋白、细胞核NF-κB p65表达变化,ELISA法测定细胞因子TNF-α,随后在LPA 1 μmol/L条件下,TLR4单抗干预THP-1细胞,观察其对LPA诱导的细胞核NF-κB p65表达及TNF-α分泌水平的影响.结果 当LPA 1 μmol/L时,TLR4 mRNA和蛋白及细胞核NF-κB p65表达较0 μmol/L、0.1 μmol/L、0.5 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L LPA明显增高,差异有统计学意义（P＜0.01）.LPA 1 μmol/L处理THP-1细胞4 h时,THP-1细胞TLR4 mRNA和蛋白及细胞核NF-κB p65表达水平明显高于0、1、2、8 h（P＜0.01）.与TLR4单抗干预前比较,TLR4干预后LPA诱导的THP-1细胞NF-κB p65表达及TNF-α分泌水平明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 LPA可显著上调THP-1细胞TLR4表达及促进NF-κB的活化,LPA致动脉粥样硬化作用可能部分是由 TLR4/ NF-κB 信号途径介导的.
- 杨波林琍宗文霞周志斌
- 关键词：TOLL样受体4溶血磷脂素类动脉粥样硬化肿瘤坏死因子Α
- 细胞外基质成分对于平滑肌细胞表型及增殖的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)等细胞外基质成分对于体外培养平滑肌细胞(VSMC)表型转化和增殖活性的影响。方法将原代和传代培养的大鼠主动脉VSMC分别接种于不同细胞外基质蛋白包被的培养板上,作用24、48、72 h后,以RT-PCR和Westernblot法检测VSMC表型标志平滑肌肌动蛋白(SMA-α)、骨桥蛋白(OPN)mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测VSMC增殖活性。结果与对照组相比,LN包被组SMA-α基因及蛋白表达增强,OPN则表达减弱,且可维持48 h以上,于72 h后,与对照组趋于一致,FN包被组OPN基因及蛋白表达增强,SMA-α表达减弱,ColⅣ包被组SMA-α、OPN与对照组比较无统计学意义,FN组增殖活性显著增强,并与作用时间呈正比,LN包被组与ColⅣ包被组对VSMC增殖活性无明显影响。结论 LN可延迟VSMC表型转化,FN则促进VSMC表型转化与增殖,细胞外基质成分对于VSMC表型转化和增殖具有重要的调节作用。
- 李小好尚桂莲姜丹周志斌
- 关键词：细胞外基质血管平滑肌细胞表型转化细胞增殖
- 联合基因沉默TLR2、4对于LPA诱导的RASMCs表型转化的影响
- 2016年
- 目的应用RNA干扰技术单一或者联合沉默Toll样受体(TLR)2、4基因,探讨其在溶血磷脂酸(LPA)诱导的平滑肌细胞(VSMCs)表型转化中的作用。方法根据文献建立分化表型大鼠VSMCs(RASMCs)培养体系,予TLR2、4特异性小干扰RNA(siRNA)转染RASMCs,LPA 1μmol/L处理4h后,荧光定量RT-PCR法、Western blot法检测分化和去分化细胞表型标志基因平滑肌肌动蛋白(SMA-α)和骨桥蛋白(OPN)基因及蛋白水平的表达。结果 TLR2、4-siRNA分别转染细胞后可显著抑制LPA诱导的RASMCs细胞SMA-α基因、蛋白下调及OPN基因、蛋白上调,TLR2、4联合干扰组对于LPA诱导的RASMCs细胞SMA-α基因、蛋白下调及OPN基因、蛋白上调的抑制作用较TLR2、4单独干扰组进一步加强。结论 TLR2、4信号通路参与了LPA诱导的表型转化,联合干预TLR2、4,有可能成为稳定动脉粥样硬化斑块、抗粥样硬化治疗的一个新途径之一。
- 李小好杨波姜丹周志斌
- 关键词：TOLL样受体RNA干扰溶血磷脂素类血管表型转化
