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国家自然科学基金(81170858)

作品数：10 被引量：89H指数：4
相关作者：周希瑗刘丹宁郑政武明星张明慧更多>>
相关机构：重庆医科大学附属第二医院重庆医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 6篇视网膜
  • 6篇网膜
  • 6篇细胞
  • 6篇SLIT2
  • 5篇血管
  • 5篇色素上皮
  • 5篇上皮
  • 5篇视网膜色素
  • 5篇视网膜色素上...
  • 5篇网膜色素上皮
  • 4篇色素上皮细胞
  • 4篇上皮细胞
  • 4篇视网膜色素上...
  • 3篇血管内皮
  • 3篇血管内皮生长...
  • 3篇人视网膜
  • 3篇人视网膜色素
  • 3篇人视网膜色素...
  • 3篇人视网膜色素...
  • 3篇转染

机构

  • 9篇重庆医科大学...
  • 1篇重庆医科大学

作者

  • 10篇周希瑗
  • 2篇刘丹宁
  • 1篇黄莉芸
  • 1篇武明星
  • 1篇梅雨
  • 1篇汤艳玲
  • 1篇张明慧
  • 1篇万欢
  • 1篇周宇
  • 1篇李宗泽
  • 1篇郑政

传媒

  • 3篇第三军医大学...
  • 3篇重庆医科大学...
  • 1篇中国生物制品...
  • 1篇中华眼底病杂...
  • 1篇国际眼科杂志
  • 1篇中华实验眼科...

年份

  • 1篇2019
  • 2篇2018
  • 1篇2017
  • 3篇2015
  • 3篇2014
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
腺病毒介导的Slit2及Slit2 ShRNA转染缺氧诱导的人RPE细胞对人脉络膜微血管内皮细胞增殖的影响
2014年
目的:观察腺病毒介导的Slit2及Slit2 ShRNA转染缺氧诱导的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial cells,RPE)细胞对人脉络膜微血管内皮细胞(human choroidal microvascular endothelial cell,HCMEC)增殖的影响,探讨Slit2在脉络膜新生血管中的可能作用,为脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)提供新的治疗思路。方法:体外培养并鉴定人RPE细胞、HCMEC;200μmol/L氯化钴建立化学缺氧模型,Transwell小室建立细胞共培养模型;将缺氧的RPE细胞随机分为Slit2组(加入Slit2)、Slit2 ShRNA组(加入Slit2 ShRNA)、空腺病毒组(加入空腺病毒)、缺氧组,12、24、48 h后采用CCK 8(Cell Counting Kit-8,CCK 8)法检测HCMEC的增殖。结果:不同组别存在组间差别,差异均有统计学意义(F=98.122,P=0.000),不同时间点存在差别(F=3388.913,P=0.000),组别与时间点的交互作用(F=82.863,P=0.000)。Slit2组吸光度(absorbance,A)值在24 h、48 h均高于其他组(与缺氧组P=0.001,其余P=0.000),Slit2 ShRNA组A值在24 h、48 h均低于其他组(48 h与缺氧组P=0.003,与空腺病毒组P=0.008,其余P=0.000)。结论:Slit2的高表达可明显促进HCMEC的增殖,沉默RPE细胞中的Slit2的表达后,会明显抑制HCMEC的增殖。
汤艳玲周希瑗
关键词：SLIT2人视网膜色素上皮细胞
Slit2基因转染对人视网膜色素上皮细胞VEGF表达的影响及其作用机制被引量：4
2014年
目的:研究Slit2基因对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响,并探讨丝裂原激活(mitogen-activated,MEK)/细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal regulated protein kinase,ERK)和磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase,AKT)这2条信号通路在此过程中的作用。方法:(1)体外培养人RPE细胞株RPE-19;(2)将腺病毒介导的Slit2(adenovirus-mediated Slit2,Ad-Slit2)转染RPE细胞,培养12、24 h及48 h;(3)转染前将MEK信号通路阻断剂PD98059、PI3K信号通路阻断剂LY294002预处理RPE细胞1 h;(4)用real-time PCR及酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测VEGF的表达水平,用Western blot检测磷酸化ERK、磷酸化AKT的表达情况。结果:Slit2转染的RPE细胞后,real-time PCR结果显示不同时间之间VEGF m RNA表达有差别(F=12.789,P=0.018),组别和时间之间存在交互作用(F=13.375,P=0.017),不同组别有差别(F=16.855,P=0.015),在24 h与48 h,Ad-Slit2组高于空腺病毒组(P24 h=0.002,P48 h=0.018)。ELISA结果显示不同时间之间VEGF蛋白表达有差别(F=24.886,P=0.000),组别和时间之间存在交互作用(F=23.524,P=0.000),不同组别有差别(F=28.250,P=0.006),在48 h,Ad-Slit2组高于空腺病毒组(P=0.003)。Western blot结果可见p-ERK及p-AKT的蛋白表达水平增加,阻断剂PD98059及LY294002分别能降低ERK、AKT的磷酸化水平,并与Ad-Slit2组相比较,real-time PCR结果显示VEGF m RNA表达水平在不同时间有差别(F=32.202,P=0.000),组别和时间之间存在交互作用(F=8.372,P=0.006);不同组别存在差别(F=15.062,P=0.001),ELISA结果显示VEGF蛋白表达水平在不同时间之间有差别(F=90.703,P=0.000),组别和时间之间存在交互作用(F=4.968,P=0.005),不同组别存在差别(F=69.636,P=0.000)。结论:PI3K/AKT以及MEK/ERK这两条信号通路参与了Slit2所诱导的RPE细�
梅雨周希瑗
关键词：细胞外信号调节蛋白激酶血管内皮生长因子
阻塞性睡眠呼吸暂停综合征与原发性开角型青光眼相关性的Meta分析被引量：1
2015年
目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome，OSAS）与原发性开角型青光眼（primary open angle glaucoma，POAG）的相关性。方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、WanFang Data、CNKI电子数据库，检索时间为建库到2014年11月，搜索研究OSAS与青光眼相关性的文献，由2名研究员按照纳入标准独立筛选文献、提取资料、质量评价并交叉核对，釆用Cochrane协作网提供的RevMan5.3软件对数据进行系统分析。结果共纳入4个病例对照研究和2个队列研究，共19 226例。OSAS与青光眼具有相关性（OR=2.03,95％CI为1.68-2.45,P〈0.01）。在不同国家亚组中,英国人OSAS与青光眼相关性不能确定（OR=0.87,95％CI为0.09-8.76,P=0.91）；土耳其人（OR=8.42,95％CI为1.05-67.41,P=0.04）和中国台湾人（OR=1.99,95％CI为1.64-2.40,P〈0.01）OSAS与青光眼有显著相关性。在不同程度OSAS亚组中，轻度OSAS患者（OR=3.13,95％CI为0.32-30.89,P=0.33）和中度OSAS患者（OR=5.16,95％CI为0.56-47.21,P=0.15）与青光眼相关性不能确定，重度OSAS患者（OR=11.30,95％CI为1.40-91.37,P=0.02）与青光眼有显著相关性。结论重度OSAS可能为POAG发病的危险因素。
李宗泽周希瑗刘丹宁陈蜜朵郭玉楠万欢
关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停综合征青光眼
年龄相关性黄斑变性流行病学研究进展被引量：73
2015年
年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)是一种与年龄相关的致盲性退行性眼底病变,全球约有3 000万老年黄斑变性患者,每年约有50万人因此致盲。随着我国经济发展及人口老龄化的加剧,AMD在我国发病率呈逐年上升的趋势,现已跃居我国第三大致盲原因。目前,AMD的发病机制尚不完全明确,可能与氧化应激,炎症免疫反应,VEGF形成及遗传调控密切相关。临床上主要有光动力疗法、药物治疗、放射治疗、激光光凝、黄斑下手术、经瞳孔温热治疗、中医药治疗以及玻璃体腔注射VEGF拮抗剂如雷珠单抗、康柏西普等方法。本文主要就AMD有关的流行病学因素做一系统阐述,并重点就遗传调控方面取得的进展进行综述。
武明星郑政周希瑗
关键词：年龄相关性黄斑变性流行病学
腺病毒介导slit2基因转染人视网膜色素上皮细胞对RF/6A细胞迁移及管腔形成的影响被引量：4
2015年
目的观察共培养模型下,腺病毒介导的slit2基因转染人视网膜色素上皮细胞(RPE)对猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A)迁移及管腔形成的影响。方法用腺病毒介导的slit2基因(Ad-slit2)转染RPE细胞,同时设空载体腺病毒转染组(Ad-null)及空白对照组。转染24 h及48 h后,采用RT-PCR及Western blot法分别检测RPE细胞中slit2、VEGF的mRNA及蛋白表达情况;ELISA法检测RPE细胞培养基上清液中VEGF的分泌水平;建立RPE&RF/6A共培养模型,采用Transwell小室法及Matrigel胶体外三维成型法分别检测过表达slit2基因的RPE细胞对RF/6A细胞迁移能力及管腔形成能力的影响,并计算迁移数目及管腔形成长度、管腔数。结果 Ad-slit2转染24、48 h后,RPE细胞在基因及蛋白水平表达slit2、VEGF均有明显增高;ELISA结果显示过表达slit2基因的RPE细胞其培养基上清液中分泌型VEGF水平增高;在RPE&RF/6A共培养下,空白对照组、Ad-null转染24 h组、Ad-slit2转染24 h组、Ad-null转染48 h组、Ad-slit2转染48 h组中,RF/6A细胞迁移数目分别是(40.6±4.5)、(36.7±3.5)、(67.7±4.2)、(36.0±3.6)、(79.7±3.5);管腔形成长度分别是(3.95±0.31)、(4.53±0.26)、(6.04±0.34)、(4.09±0.18)、(7.27±0.45)mm,管腔数分别是(8.7±3.2)、(8.9±3.6)、(15.9±4.2)、(8.3±2.4)、(23.3±4.5)。Ad-slit2转染24 h及48 h组与空白对照组比较,差异具有统学意义(P<0.05)。结论腺病毒介导的slit2基因转染RPE细胞可促进RF/6A细胞的迁移及管腔形成。RPE细胞中的slit2可能参与脉络膜新生血管形成过程。
张明慧周希瑗
关键词：脉络膜新生血管管腔形成
载吲哚菁绿与阿霉素靶向纳米粒用于视网膜母细胞瘤体外成像的实验研究被引量：3
2019年
目的:制备一种靶向叶酸受体的载吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)及阿霉素(adriamycin,ADM)的相变型多功能脂质纳米粒(ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM)并研究其基本性质,检测其靶向能力、光热效应、超声及光声双模态显像能力,为视网膜母细胞瘤的诊断提供新策略。方法:采用双乳化法制备ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒,透射电镜观察纳米粒形态,马尔文粒径分析仪检测粒径及电位,紫外分光光度计检测纳米粒的包封率、载药量;流式细胞术量化及激光共聚焦显微镜下观察纳米粒表面叶酸表达情况和体外寻靶能力;CCK-8法检测ICG/FA/Pct-PFPNP纳米粒的生物安全性;近红外激光(808 nm)激发ICG/FA/PctPFPNP:ADM纳米粒,检测其超声/光声双模态显像能力。结果:成功制备了ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒,其外观呈球形,平均粒径为(374.40±23.48)nm,平均电位(-28.0±4.5)mV。测得ICG包封率为(91.85±2.98)%,载药量为(9.19±0.29)%;ADM包封率为(62.04±5.10)%,载药量为(6.20±0.51)%。流式细胞术和激光共聚焦显微镜结果均显示纳米粒表面叶酸表达情况良好,靶向组与Y79细胞连接率为(96.57±3.17)%,与非靶向组、抗体封闭组相比差异具有统计学意义(F=1537.6,P<0.05)。CCK-8结果显示ICG/FA/Pct-PFPNP纳米粒没有明显的细胞毒性。ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒经激光辐照后能发生液气相变,增强超声显影并能使局部温度上升至60.8℃。光声信号随纳米粒浓度升高而增强,具有良好的线性关系。结论:成功制备了载吲哚菁绿与阿霉素的靶向相变型纳米粒,其靶向能力好,光热效应佳,增强超声及光声显像效果好,可以用于视网膜母细胞瘤的诊断。
黎梦周宇邹宏密王志刚周希瑗
关键词：视网膜母细胞瘤吲哚菁绿脂质纳米粒液气相变超声分子成像
大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体的构建及其对大鼠RPE细胞中Slit2基因的下调作用
2017年
背景年龄相关性黄斑变性（AMD）是老年人致盲的首要原因。目前，AMD的治疗方式在取得显著疗效的同时亦有一定的不足，寻找新的有效治疗靶点是当前的研究热点。目的构建大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体，筛选有效干扰序列以用于大鼠视网膜色素上皮（RPE）细胞中Slit2基因沉默，为大鼠相关体内实验奠定基础。方法设计2条大鼠Slit2基因siRNA序列，退火形成DNA，连接形成慢病毒干扰载体并进行测序鉴定。采用三质粒共转染293T细胞法收获慢病毒（Lv-rSlit2-siRNA），用药物筛选法测定病毒悬液滴度。将大鼠RPE细胞分为空白对照组、空病毒组、Lv—rSlit2-siRNAl组和Lv—rSlit2-siRNA2组，根据分组分别用仅有病毒的载体和不同序列的Lv—rSlit2-siRNA载体转染细胞，分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法测定各组细胞中Slit2mRNA及蛋白的表达以确定Slit2基因的敲减率，筛选有效干扰序列。采用0、100、200和400μmol／LCoCl，孵育大鼠RPE细胞以制备缺氧细胞模型并转染筛选Lv—rSlit2-siRNA2干扰序列，采用实时荧光定量PCR法和ELISA法测定大鼠RPE细胞中血管内皮生长因子A（VEGFA）表达变化及细胞上清液中VEGFA质量浓度。结果成功构建2条大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体，病毒滴度分别为5×10^8TU／ml和3×10^8TU／ml，转染病毒后72h于荧光显微镜下观察RPE细胞慢病毒转染率均在70％以上。Lv—rSlit2-siRNAl组和Lv—rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中Slit2mRNA相对表达量分别为0．67±0．09和0．23±0．11，明显低于空白对照组的1．03±0．31和空病毒组的0．92±0．07；Lv—rSlit2-siRNAl组和Lv—rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中Slit2蛋白相对表达量分别为0．62±0．07和0．49±0．02，明显低于空白对照组的1．00±0．10和空病毒组的0．95±0．11，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。0、100、200和400μmol／LCoCl，作用后，空白对照
蒋少秋周希瑗
关键词：慢病毒RNA干扰
重组人Slit2蛋白预处理可减轻内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎
2018年
目的探讨重组人Slit2蛋白(recombinant human slit2,rhSlit2)对内毒素诱导的SpragueDawley(SD)大鼠葡萄膜炎(endotoxin-induced uveitis,EIU)的作用。方法给予SD大鼠玻璃体腔内分别注射rhSlit2(10、30、100 ng/眼)。24 h后,将2 g/L的脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)注射到大鼠双侧后足底肉垫内(200μg/鼠)。LPS注射24 h后观察大鼠前房炎症并进行临床评分;取大鼠房水进行房水蛋白浓度测定和房水细胞计数;LPS注射24 h后摘除大鼠眼球,制作石蜡切片HE染色后观察大鼠眼部形态学变化;采用Real-time PCR检测大鼠眼部炎症因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA水平的表达;Western blot检测大鼠眼部IL-6、TNF-α和PI3K/Akt信号通路蛋白的表达。结果在LPS注射24 h后,rhSlit2对前房炎症有明显的抑制作用,且具有剂量依赖性。LPS+rhSlit2(100 ng/眼)组临床评分明显低于LPS+PBS组[(1.40±0.84)vs(5.60±0.97)分,P<0.01];HE染色可见各组大鼠眼内结构层次完好。与LPS+PBS组比较,LPS+rhSlit2(100 ng/眼)组眼内炎症细胞渗出数量明显减少[(65.21±18.38)×106/m L vs(319.60±28.88)×106/m L,P<0.01];房水蛋白浓度明显降低[(12.59±3.04)vs(31.50±3.09)mg/m L,P<0.01];眼内炎症因子IL-6(19.69±5.28 vs 77.09±12.61)、TNF-α(1.78±0.33 vs 4.06±0.58)的mRNA表达降低(P<0.01);大鼠眼内IL-6(1.92±0.60 vs 4.42±0.11)、TNF-α(1.33±0.11 vs 1.69±0.21)和P-Akt(0.18±0.37 vs 0.55±0.34)蛋白水平也降低(P<0.01)。结论大鼠玻璃体腔Rh Slit2预注射对内毒素诱导的SD大鼠葡萄膜炎具有抑制作用。Rh Slit2可通过抑制PI3K/Akt信号通路的活化以抑制LPS诱导炎症反应。
杜勇蒋少秋周希瑗
关键词：炎症因子
腺病毒介导的slit2 shRNA对缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞中血管内皮生长因子表达的影响被引量：4
2014年
目的观察腺病毒介导的slit2 shRNA对缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPE)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨slit2在脉络膜新生血管(chorodal neovascularation,CNV)中的可能作用,为CNV的治疗提供新的思路。方法分别采用RT-PCR和免疫组化法检测人视网膜色素上皮-19(ARPE-19)细胞中slit2及受体Robo1基因mRNA的转录和蛋白的表达;用200μmol/L氯化钴处理人ARPE-19细胞,建立化学缺氧模型,以未缺氧组作为对照,采用Real-time PCR和Western blot法检测在缺氧状态下细胞中slit2、Robo1、VEGF基因mRNA及蛋白水平表达的变化;将缺氧的人ARPE-19细胞随机分为shRNA处理组(加入Ad-slit2-shRNA)、空腺病毒组(加入空腺病毒)和缺氧组,24 h后收集各组细胞,Real-time PCR和Western blot法检测slit2 shRNA干扰后细胞中slit2、Robo1、VEGF基因mRNA和蛋白水平表达的变化,ELISA法检测细胞培养上清中VEGF蛋白水平的变化。结果在正常人ARPE-19细胞中有slit2和Robo1基因mRNA的转录及蛋白的表达;缺氧组人ARPE-19细胞中slit2、Robo1、VEGF基因mRNA和蛋白的表达水平均较未缺氧组明显升高(P<0.05);与缺氧组相比,slit2-shRNA处理组人ARPE-19细胞中slit2、Robo1、VEGF基因mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05),缺氧组与空腺病毒组slit2、Robo1、VEGF的变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论 slit2 shRNA沉默RPE细胞中的slit2后,可明显抑制缺氧诱导的RPE细胞中VEGF的表达,为临床CNV的治疗提供了新的思路。
黄莉芸周希瑗
关键词：SLIT2视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子
Slit2-Robo信号在眼底及全身血管生成的研究进展被引量：1
2018年
Slit是在果蝇中枢神经系统中发现的一类分泌型糖蛋白，Robo（Roundabout）蛋白为其受体。Slit-Robo信号在神经轴突导向、炎症反应、肿瘤转移以及血管生成等方面有着重要作用。Slit2是Slit蛋白家族的一个亚型，其在血管生成方面的作用受到广泛关注，且其对血管生成方面是促进还是抑制作用仍具争议。了解Slit2-Robo信号在眼底及其他血管生成的研究进展，可为探究其机制以及寻找治疗眼底新生血管的新靶点提供线索。
蒋少秋刘丹宁周希瑗
关键词：眼底血管生成新生血管化病理性
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