陕西省教育厅科研计划项目(2013JK0829)
- 作品数：7 被引量：28H指数：5
- 相关作者：张岗张大为郭顺星张琳吕欣更多>>
- 相关机构：陕西中医药大学中国医学科学院北京协和医学院西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省教育厅科研计划项目国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 秦岭玄参与玄参的生药学和抗炎镇痛活性比较研究被引量：6
- 2014年
- 目的：比较秦岭玄参与玄参在生药学和抗炎镇痛方面的差异。方法通过性状观察、组织显微鉴别比较2种植物的生药学差异，应用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型分析二者的抗炎作用，利用热板法和醋酸扭体法观测二者的镇痛差异。结果秦岭玄参和玄参的聚伞花序分别集成顶生穗状花序、圆锥花序；二者原生木质部分别为类圆形或圆形和多角形；前者形成层环不明显、皮层无石细胞；后者形成层环型、石细胞单个散在，或2～5个成群。秦岭玄参和玄参大剂量明显降低二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度（P＜0．05）；两者显著提高小鼠痛阈（P＜0．05，P＜0．01），减少小鼠扭体次数（P＜0．05，P＜0．01）。结论秦岭玄参与玄参生药学在花序、毛茸、原生木质部、形成层及石细胞等方面存在差异；药理研究表明，秦岭玄参均有抗炎和镇痛作用，且可以替代常用的玄参入药。
- 张琳张磊张毅达
- 关键词：玄参生药学抗炎镇痛
- 铁皮石斛促分裂原活化蛋白激酶基因DoMPK2的分子特征被引量：6
- 2013年
- 目的克隆铁皮石斛(Dendrobium officinale)促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)基因DoMPK2并进行分子特征分析。方法采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、cDNA末端快速扩增(RACE)技术分离全长基因;生物信息学分析编码蛋白的理化特性、保守结构域等特征;用DNASTAR、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对和进化树构建分析;借助实时定量PCR技术检测基因组织表达模式。结果 DoMPK2基因cDNA全长1 585 bp(GenBank注册号JX297595),编码一条由369个氨基酸组成的肽链,相对分子质量42120,等电点6.56。DoMPK2蛋白包含MAPK家族保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域(32^-319)和MAP激酶的保守位点(67~170)。DoMPK2与多种植物MAPK基因高度相似(56%~84%),与水稻、玉米等单子叶植物MAPK基因亲缘关系较近。DoMPK2为组成型表达,其转录本在石斛种子和根中的相对表达量较高,分别为叶中的9.696、2.327倍,茎和叶中的表达变化不显著。结论 DoMPK2基因的分子特征为进一步研究其在铁皮石斛生长发育、抗逆胁迫等生命活动过程中的生物学功能奠定基础。
- 张岗张大为赵明明郭顺星
- 关键词：铁皮石斛激酶克隆基因表达实时定量PCR
- 铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶基因的分离与表达分析被引量：6
- 2014年
- 目的分离珍稀濒危药用植物铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶（caffeoyl CoA O-methyltransferase,CCoAOMT）基因（DoOMT）并进行生物信息学和表达模式分析。方法采用RT-PCR和RACE技术获取基因cDNA全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和三维建模等分子特性;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助实时定量PCR检测基因表达模式。结果分离到DoOMT（GenBank注册号KF876839）,cDNA全长1 005 bp,编码一条由239个氨基酸组成的多肽,相对分子质量为2.708×10-4,等电点5.03;DoOMT蛋白不含跨膜域和信号肽,具有氧甲基转移酶family 3、甲基转移酶的保守结构域（13~238、31~238）和8个保守基序;DoOMT与植物CCoAOMTs蛋白一致性为49.4%~78.7%,所在分支隶属于CCoAOMTs分子进化的1b类群,与单子叶植物香草亲缘关系最近;DoOMT基因转录本在石斛根、茎、叶器官中为组成型表达,茎中相对表达量较高,为叶中的4.562倍,根和叶中无显著差异。结论铁皮石斛CCoAOMT基因DoOMT的分子特征为进一步研究其在铁皮石斛次生代谢和生长发育过程中的作用奠定基础。
- 张岗胡本祥张大为陈伟郭顺星
- 关键词：铁皮石斛实时定量PCR
- 铁皮石斛镁离子转运蛋白基因的克隆及表达分析被引量：10
- 2014年
- 目的克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛镁离子转运蛋白（magnesium transporter,MGT）基因（Do MGT1）并进行生物信息学和表达分析。方法采用RT-PCR和RACE技术,获得基因c DNA全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特征;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助实时定量PCR（q PCR）检测基因表达模式。结果克隆到Do MGT1（Gen Bank注册号KJ995532）,c DNA全长1 625 bp,编码一条由425个氨基酸组成的肽链,相对分子质量47 400,等电点4.79;Do MGT1蛋白含有Cor A家族镁离子转运蛋白保守结构域（313~420）和镁离子转运蛋白MRS2/LPE10保守域（27~420）;Do MGT1与多种植物MGTs基因一致性为46%~63%,编码蛋白与水稻Os MGTD、Os MGTE、Os MGTF等聚在一起,与At MGT4共同构成植物MGTs基因的一大类群;Do MGT1基因转录本在石斛根、茎、叶器官中为组成型表达,叶中相对表达量较高,为根中的3.46倍;茎次之,为根的1.54倍。结论成功克隆到一个镁离子转运蛋白基因Do MGT1,其转录本在叶中高的表达特征暗示该基因可能在铁皮石斛叶的生长发育中发挥重要作用。
- 张岗翟清华张大为胡本祥郭顺星
- 关键词：铁皮石斛基因克隆
- 铁皮石斛鲨烯合酶基因的克隆及其组织表达模式分析被引量：9
- 2013年
- 【目的】克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）鲨烯合酶（Squalenesynthase，SS）基因（DoSS），并对其进行生物信息学与组织表达模式分析，为研究其生物学功能提供参考。【方法】采用RT—PCR和RACE技术，获得DoSS基因全长序列；利用生物信息学软件预测DoSS蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性；用DNASTAR6．0和MEGA4．0分别进行DoSS蛋白氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助qPCR检测DoSS基因的组织表达模式。【结果】成功克隆获得铁皮石斛鲨烯合酶基因，命名为DoSS（GenBank注册号JX272631），其cDNA全长1735bp，编码一条由410个氨基酸组成的多肽，分子质量46．99ku，等电点7．13；DoSS蛋白含有鲨烯／八氢番茄红素合成酶保守结构域（44—315位氨基酸）；DoSS与其他多种植物SS基因的编码蛋白同源性很高（61％～75％），与水稻、玉米等单子叶植物的亲缘关系较近；DoSS基因为组成型表达，在根中的表达量最大，为叶的12．41倍；茎次之，为叶的1．87倍。【结论】成功克隆得到1个鲨烯合酶基因（DoSS）全长cDNA；DoSS基因的（在根中高）表达特征暗示，其可能在铁皮石斛根的生长发育中发挥重的调控功能。
- 张岗唐志书周莉英刘清李依民张小飞吕欣
- 关键词：铁皮石斛鲨烯合酶基因克隆结构域萜类
- 转筋草生药学研究被引量：1
- 2015年
- 目的对转筋草进行性状、显微及理化鉴别。方法采用组织学、形态学鉴别方法,研究原植物形态、生药特征、各部分组织及粉末显微特征,并且进行粉末的生物碱化学鉴别。结果转筋草根茎、茎及叶的薄壁细胞均含草酸钙方晶;粉末中可见不定式气孔及非腺毛。粉末与3种生物碱沉淀试剂分别生成沉淀。结论以上性状特征、显微特征及理化结果可以作为转筋草生药鉴别的依据。
- 张琳程虎印王继涛张妮张岗
- 关键词：显微结构生药学
- 铁皮石斛谷氨酸脱羧酶基因的分离与生物信息学分析被引量：2
- 2014年
- 目的分离珍稀濒危兰科药用铁皮石斛谷氨酸脱羧酶（GAD）基因并进行生物信息学和表达分析。方法采用 RT-PCR和 RACE技术获基因 cDNA全长；利用生物信息学软件分析蛋白理化性质、结构域和三维建模等分子特性；用 DNASTAR 6.0和 MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化树分析；借助实时定量 PCR检测基因表达。结果分离到DoGAD基因，cDNA全长1795 bp，编码一条由498个氨基酸组成的多肽，分子量55.90 kD，等电点5.32；DoGAD蛋白不含跨膜域或信号肽，具有谷氨酸脱羧酶和磷酸吡哆醛依赖的脱羧酶结构域（17-443、37-381）；DoGAD与植物 GADs蛋白一致性为69.5%~78.8%，隶属于 GADs分子进化树的植物类群；DoGAD转录本在石斛叶和茎中相对表达量较高，分别为根中的5.16和3.92倍。结论成功克隆得到铁皮石斛谷氨酸脱羧酶基因全长， DoGAD 的表达特征暗示其可能在铁皮石斛叶和茎中发挥重要的调控作用。
- 张岗胡本祥李依民张大为郭顺星
- 关键词：铁皮石斛谷氨酸脱羧酶Γ-氨基丁酸计算生物学基因克隆
