中国博士后科学基金(2005038379)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- Stealth核糖核苷酸干扰抑制胰腺癌细胞DNMT1表达的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究靶向甲基化转移酶1(DNMT1)基因的Stealth核糖核苷酸干扰(RNAi)技术对胰腺癌细胞Panc-1中DNMT1表达的抑制作用。方法:通过Block-IT TMRNAi Designer在线设计合成针对DNMT1的Stealth核糖核苷酸(siRNA),以50 nM siRNA用脂质体转染法转染Panc-1细胞。同时设空白对照组,RNAi阴性对照组,荧光RNAi组,每组3个复孔;在转染24 h、48 h、72 h后用荧光显微镜观察转染效率,以48 h荧光强度最亮。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测DMNT1信使核糖核酸(mRNA)含量,免疫印迹(Westem blot)检测DNMT1蛋白的表达。结果:将靶向DNMT1基因Stealth RNAi转染到胰腺癌细胞Panc-1中后,Panc-1细胞在转染RNAi后48 h的转染效率为50%～60%;DNMT1的蛋白和mRNA水平显著下调,与对照组相比,转染后48 h的相对抑制率分别为68%和67.8%(P<0.05),也显著低于空白对照组及空载体组(P<0.05)。结论:DNMT1靶向的Stealth RNA瞬时转染到胰腺癌细胞Panc-1中可显著沉默DNMT1的基因和蛋白的表达,为胰腺癌的基因治疗提供新的理论依据。
- 卜淑蕊钱家鸣
- 关键词：胰腺癌RNA干扰
