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重组分泌型内皮抑素腺相关病毒体内治疗膀胱癌: 2007年; 目的观察重组分泌型内皮抑素腺相关病毒(rAAV-ES)在裸鼠模型体内的抗肿瘤作用。方法以rAAV-ES转染(转染复数MOI=1×10~5)膀胱癌细胞(EJ)后建立裸鼠肿瘤模型,检测EJ细胞被转染后的成瘤率及肿瘤生长情况;裸鼠肌注rAAV-ES后检测内皮抑素在体内的表达;建立裸鼠肿瘤模型,检测全身应用rAAV-ES后抑制肿瘤发展的作用、对肿瘤微血管密度(MVD)的影响及其毒副作用。结果被rAAV-ES转染的EJ细胞成瘤率仅为对照组的2/5;体内实验证实肌注rAAV-ES后血清中内皮抑素长期高效表达(30～40)μg/L;全身应用后肿瘤生长速度减慢(32±9)d,瘤体微血管密度变低(8.30±3.14)/0.739 mm^2,心脑组织学检查未见缺血和其他异常改变。结论rAAV-ES无毒副作用,可有效地抑制肿瘤的血管生成,从而抑制膀胱癌的发生、发展,其成功包装为原位基因治疗膀胱癌奠定了基础。; 卢炳新韩瑞发汤洋韩育植李盛芝; 关键词：膀胱肿瘤基因治疗血管生成

重组分泌型内皮抑素腺相关病毒的包装及在膀胱癌EJ细胞系中的表达被引量：4: 2006年; 目的:包装重组分泌型内皮抑素腺相关病毒(rAAV-Endostatin)制备内皮抑素原位基因治疗膀胱癌的基因载体药物。方法:采用分子生物学方法构建腺相关病毒质粒载体(pAAV-IgG-Endostatin),酶切、测序鉴定;经质粒共转染方法包装rAAV-Endostatin,测定病毒颗粒滴度并电镜下鉴定;转染膀胱癌EJ细胞后,ELISA法测定重组内皮抑素的浓度。结果:pAAV-IgG-Endostatin的构建和rAAV-Endostatin的包装均获成功,病毒滴度达1.0×1012v.p/ml。感染EJ细胞后内皮抑素成功表达并分泌,上清液中浓度达54.09ng/ml。结论:rAAV-Endostatin载体的构建、包装与表达的成功为rAAV-Endostatin原位基因治疗膀胱癌的实验研究奠定了基础。; 卢炳新韩瑞发汤洋韩育植李盛芝; 关键词：膀胱癌基因治疗

腔内灌注重组分泌型内皮抑素腺相关病毒治疗膀胱癌的实验研究被引量：4: 2008年; 目的研究膀胱腔内灌注重组分泌型内皮抑素腺相关病毒（rAAV—ES）治疗膀胱癌的疗效。方法建立C57BL／6小鼠原位膀胱癌模型；膀胱腔内灌注rAAV—ES后检测肿瘤生长情况，分析抑瘤率和小鼠生存期，并与对照组进行比较。结果成功建立小鼠原位膀胱癌模型；膀胱腔内灌注rAAV—ES后荷瘤膀胱重量（145mg±30mg）较rAAV—EYFP组（250mg±32mg）和PBS组（250mg±30mg）轻（均P〈0．05），计算抑瘤率均为42％；实验组小鼠生存期（46d±7d）长于对照组（38d±7d和38d±6d）（均P〈0．05）。结论膀胱腔内灌注rAAV—ES可成功抑制肿瘤的血管生成，从而抑制膀胱癌的发生、发展，rAAV—ES是膀胱癌基因治疗的有效生物制剂。; 卢炳新韩瑞发汤洋雷铭德李盛芝; 关键词：膀胱肿瘤基因疗法血管生成抑制剂

应用重组分泌型内皮抑素腺相关病毒治疗膀胱癌的实验研究被引量：3: 2007年; 目的包装重组分泌型内皮抑素腺相关病毒(rAAV-ES)并研究其在体内外的抗肿瘤作用。方法采用质粒共转染方法包装 rAAV-ES;转染(感染复数 MOI=10~5)膀胱癌细胞(EJ)后,ELISA 法测定上清液中重组内皮抑素的浓度并检测其对血管内皮细胞趋化运动的抑制作用;建立裸鼠肿瘤模型,检测 EJ 细胞被转染后的成瘤率及全身应用 rAAV-ES 后抑制肿瘤发展的作用及其毒副作用。结果成功包装具有生物活性的 rAAV-ES,病毒滴度为1.0×10^(12)v·g/ml;转染 EJ 细胞后上清液中重组内皮抑素浓度为54.09 ng/ml,对血管内皮细胞趋化运动的抑制率为37.45%;被 rAAV-ES转染后 EJ 细胞的成瘤率仅为对照组的2/5,体内实验证实全身应用 rAAV-ES 后血清中内皮抑素长期高效表达(30～40 ng/ml),肿瘤生长速度慢(32 d±9 d),瘤体微血管密度低[(8±3)条/0.739 mm^2],与对照组比较,差异有统计学意义(均 P<0.05),心脑组织学检查未见缺血和其他异常改变。结论rAAV-ES 无毒副作用,可有效地抑制肿瘤的血管生成,从而抑制膀胱癌的发生、发展,其成功包装为原位基因治疗膀胱癌奠定了基础。; 卢炳新韩瑞发汤洋韩育植李盛芝; 关键词：膀胱肿瘤基因疗法血管生成抑制剂

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天津市高等学校科技发展基金计划项目(20040227)