黑龙江省“十五”科技攻关项目(G00C190702)
- 作品数：3 被引量：15H指数：1
- 相关作者：陶树清刘慧雯聂雷生陶天遵张国峰更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院哈尔滨医科大学日本医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省“十五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转化生长因子β对大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响被引量：14
- 2005年
- 目的探讨转化生长因子β对大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响。方法实验中取雌性SD大鼠4肢松质骨,应用胶原酶消化法得到大量纯净成骨细胞;进行形态学观察,检测不同培养时间的细胞培养液的上清液中成骨细胞特征性分泌物:碱性磷酸酶(AKP)和骨钙素(OCN)的含量;碱性磷酸酶(ALP)染色(改良Gomori氏钙钴法);通过免疫组化法(SP法)进行雌激素受体染色;用不同浓度的TGFβ作用于体外培养的成骨细胞,进行SDSPAGE电泳和Westernblot检测雌激素受体。结果成骨细胞上清液AKP和OCN的分泌量明显高于成纤维细胞(P<0.01),形态学观察符合成骨细胞的特征。经免疫组化染色大鼠的成骨细胞存在雌激素受体,且位于胞核内。Westernblot结果显示,雌激素受体在TGFβ浓度为0.1～0.5ngml时,有较强的荧光发光信号条带。结论TGFβ在浓度为0.1～0.5ngml时,能提高成骨细胞雌激素受体基因表达水平,这可为研究TGFβ对于成骨细胞雌激素受体的作用机制及骨代谢疾病药物筛选提供新的支持。
- 陶树清潘宣超荣杰生王效东
- 关键词：雌激素受体成骨细胞转化生长因子转化生长因子Β激素受体表达成骨细胞SDS-PAGE电泳雌激素受体BLOT检测
- 地塞米松对不同月龄雌性大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察体外培养的不同月龄雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体水平的差异及地塞米松(1×10-8mol/L)对不同月龄雌性大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响。方法采用酶消化法分别提取、纯化和培养新生(24h以内)、2、4、8、12月龄雌性Wistar大鼠成骨细胞,并且用Western-blot、ECL法检测体外培养成骨细胞雌激素受体的水平。结果提取的大鼠成骨细胞生长情况良好,碱性磷酸酶染色阳性,具有成骨细胞特性。Western-blot结果显示:雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体水平在新生鼠和8月龄鼠较高,在2、4、12月龄鼠较低;地塞米松组成骨细胞雌激素受体表达水平在新生和2月龄低于对照组,在4、8、12月龄高于对照组。结论不同月龄雌性大鼠体外培养的成骨细胞雌激素受体的表达水平不同;1×10-8mol/L地塞米松对体外培养的雌性大鼠成骨细胞雌激素受体水平有影响且与大鼠的月龄有关。
- 聂雷生陶树清张国峰刘慧雯陶天遵
- 关键词：成骨细胞地塞米松雌激素受体
- 17-β雌二醇对不同月龄大鼠成骨细胞雌激素受体β表达的影响
- 2007年
- 目的探讨17-β雌二醇对不同月龄大鼠成骨细胞雌激素受体β(ERβ)表达的影响。方法雌性大鼠颅盖骨经多次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养得到大量纯净成骨细胞并进行形态学检查和碱性磷酸酶(ALP)染色;免疫组化法(SABC)进行雌激素受体染色;用10-8mol/L17-β雌二醇处理培养的成骨细胞,SDS-PAGE电泳和western blot法检测雌激素受体。结果成骨细胞碱性磷酸酶染色阳性率为90%以上。形态学检查符合成骨细胞的特征。免疫组化染色显示大鼠的成骨细胞存在雌激素受体β,且位于胞核内。Western blot结果表明,与对照组相比,处理组的各月龄大鼠雌激素受体β表达均有上调。结论17-β雌二醇能提高各月龄组大鼠成骨细胞雌激素受体β表达水平,不同月龄间上调水平不同,以4、8月龄组最为显著。
- 张国峰陶树清聂雷生刘慧雯陶天遵
- 关键词：雌激素受体Β成骨细胞17-Β雌二醇
