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改良CTAB法提取成熟肥城桃果实的总RNA被引量：26: 2009年; 为了从成熟的肥城桃果实中提取纯净完整的RNA,本试验在原CTAB法的基础上进行了改进,并对RNA的完整性、产率和纯度等方面进行评价。结果表明,采用改良CTAB法所得RNA完整性好,条带清晰,无明显降解,28S和18S rRNA的亮度比约为2∶1,A260/A280达1.89,且产率较高,为356.21μg/g,经RT-PCR后得到一特异条带,表明该RNA可用于后续分子生物学操作。; 陈长宝朱树华周杰; 关键词：总RNA 改良CTAB法

苹果挥发性成分测定中纤维头的选择被引量：2: 2011年; 固相微萃取(SPME)技术是一种新型的无溶剂样品预处理技术,主要用于气相色谱和液相色谱分析的样品制备。采用4种常用的SPME纤维头(100μm PDMS、7μm PDMS、85μm PA、50/30μm DVB/CAR/PDMS)对苹果挥发性成分的萃取效果进行了比较研究。结果表明,50/30μm DVB/CAR/PDMS纤维头对苹果中的酯、醛、醇、烷烃和烯烃类化合物均有较好吸附,100μm PDMS和85μm PA分别对酯和醇的吸附能力较强。50/30μm DVB/CAR/PDMS纤维头的萃取能力最强、萃取的物质最多,其余依次是100μm PDMS纤维头、85μm PA和7μm PDMS。因此,50/30μmDVB/CAR/PDMS的纤维头较适用于苹果挥发性成分的萃取。; 付蕾张丽丽陈长宝朱树华周杰; 关键词：苹果固相微萃取挥发性成分

磺酸基功能化离子液体的合成及催化性能研究被引量：12: 2011年; 以1-(三甲基硅)咪唑、1,4-丁烷磺酸内酯为原料合成了一种新的强酸型离子液体1,3-二(4′-磺酸基)丁基咪唑,通过1H NMR,IR及元素分析对其结构进行了表征。该离子液体试用于催化四甲基频哪醇重排反应和乙酸乙酯合成反应产生了明显的催化效应。结果初步表明,在100℃四甲基频哪醇重排反应4h,产率可达42.6%,70℃冰乙酸与无水乙醇反应1h,乙酸乙酯产率达到87%。离子液回收重复使用5次,其催化活性基本不变。; 孙兴芳陈长宝费娜宋峰岩周杰; 关键词：离子液体催化酯化反应

硝基或氯代Blebbistatin化合物的合成: 2011年; 以2-氨基-5-硝基苯甲酸或4-氯苯甲酸、1-苯基-2-吡咯烷酮为原料，经过酯化、亚胺合成、关环、不对称合成四步反应合成了2种新的Blebbistatin化合物：3a-羟基-6-硝基-1-苯基-1，2，3，3a-四氢-吡咯并【2，3-6】-喹啉-4-酮或3口-羟基-7-氯-1-苯基．1，2，3，3a-四氢-吡咯并[2，3-b]-喹啉-4-酮-通过IR，1HNMR，元素分析证实其结构，并测定了一些重要中间体的单晶结构．初步研究化合物的光学性质发现，所合成的新Blebbistatin化合物的紫外吸收与荧光发射强度均比前人合成的Blebbistatin化合物高．; 孙兴芳陈长宝庄园周杰; 关键词：BLEBBISTATIN 紫外吸收光谱荧光发射光谱

聚环氧乙烷无胶筛分毛细管电泳分离宽分子量范围DNA片段被引量：3: 2011年; 在无胶筛分毛细管电泳中,以聚环氧乙烷为筛分介质,用硅烷化处理的毛细管柱(31.2 cm×75μmi.d.,有效长度21.0 cm)分离DL5000 DNA Marker(DNA长度为100～5000 bp),考察了筛分介质浓度、缓冲液pH值、分离电压和溴化乙锭浓度对分离双链DNA片段的影响,优化得到分离100～5000 bp DNA片段的最佳条件.毛细管电泳的最佳条件为PEO浓度5 mg/mL,缓冲液pH值8.0,电压-12.0 kV及溴化乙锭浓度3.0μg/mL.在此条件下,可对山梨醇脱氢酶基因(SDH)和乙烯受体基因(ETR1)的聚合酶链式反应(PCR)扩增产物同时进行检测,分离和鉴定效果良好.; 李玉荣陈长宝周杰; 关键词：聚环氧乙烷 DNA分离

肥城桃果实乙烯受体ETR1蛋白重组条件优化及NO对ETR1基因表达的影响被引量：1: 2012年; 克隆与肥城桃成熟有关的乙烯受体ETR1基因片段,优化ETR1的表达条件,获得ETR1重组蛋白,为进一步研究ETR1功能并改善肥城桃贮运性能奠定基础。以肥城桃成熟果实总RNA反转录cDNA为模板,经PCR扩增得到特异片段,将该片段连接到质粒,经双酶切后,连接至质粒并转染至表达载体,IPTG诱导,优化表达条件。并以cD-NA为模板,进行实时荧光定量PCR,测定外源NO对ETR1相对表达量的影响。序列分析结果表明,该序列与Gen-Bank中的AF124527的cDNA序列同源性为99%,氨基酸序列同源性为99%。优化蛋白表达条件为:IPTG最佳浓度为0.5 mmol/L,最适温度为30℃,最适诱导时间为8 h。经优化后,ETR1重组蛋白成功表达,为TETR1的重组生产和对ETR1功能的体外研究提供了条件。此外,外源NO对体外表达的ETR1基因有抑制作用。; 高丛丛姚婷婷周杰朱树华; 关键词：肥城桃乙烯受体 ETR1 基因克隆重组蛋白

一氧化氮对猕猴桃果实营养品质和活性氧代谢的影响被引量：14: 2009年; 分别用10、20和30μL.L-1一氧化氮(NO)气体熏蒸猕猴桃果实,研究NO对采后徐香猕猴桃(Actinidia chi-nensis Planch.cv.Xuxiang)的营养品质变化和活性氧代谢的影响。结果表明,20μL.L-1 NO处理后的猕猴桃果实含有较低的可溶性固形物和较高的可滴定酸、维生素C,且果实中丙二醛和超氧自由基质量分数低于其他体积分数的NO熏蒸处理(10和30μL.L-1 NO)。20μL.L-1 NO处理降低了猕猴桃果实中LOX活性,延缓了猕猴桃果实采后期间CAT活性的降低,显著提高了猕猴桃果实SOD和POD活性,且显著降低了猕猴桃果实中过氧化氢的质量分数。20μL.L-1 NO气体熏蒸保持了猕猴桃中较高的叶绿素、类胡萝卜素以及维生素E的质量分数。; 朱树华孙丽娜周杰; 关键词：猕猴桃一氧化氮营养品质活性氧代谢

影响精胺/一氧化氮加合物释放一氧化氮因子及园艺产品吸收一氧化氮特性: 2010年; 【目的】研究影响精胺/一氧化氮加合物(SPER/NO)释放NO的因子及园艺产品吸收NO的特性,为SPER/NO应用于园艺产品的贮藏保鲜提供理论依据。【方法】合成SPER/NO,用电化学传感器检测介质、湿度、添加物等对SPER/NO释放NO的影响以及园艺产品吸收NO的特性。【结果】SPER/NO在高湿度酸性介质中能快速释放一氧化氮,添加淀粉能延缓一氧化氮的释放。园艺产品能快速吸收SPER/NO释放的NO,其吸收速率氮气氛围高于空气氛围;【结论】SPER/NO与柠檬酸的混合物在高湿度环境中能释放NO,园艺产品可快速吸收所释放的NO。; 张丽丽赵莉莉周杰; 关键词：一氧化氮贮藏保鲜

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国家自然科学基金(30871756)