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CEA多表位融合蛋白在胃肠道肿瘤血清学诊断中的研究价值被引量：1: 2014年; 目的以CEA多表位融合蛋白为抗原,即ozlf-86/87融合蛋白,检测胃肠道肿瘤患者血清中抗CEA抗体,鉴定融合蛋白的抗原性,为融合蛋白作为诊断抗原提供依据,为下一步动物免疫反应实验奠定基础。方法以CEA多表位融合蛋白作为诊断抗原,采用间接ELISA法,分别对收集的39例胃癌患者血清、25例结肠癌患者血清、30例慢性胃炎患者血清和30例健康对照者的血清中的抗CEA抗体进行检测,用方差检验分析胃结肠癌患者实验组和慢性胃炎、健康患者对照组血清抗体效价之间差异性。结果胃癌和结肠癌实验组与对照组血清抗体效价之间差异均有统计学意义(P<0.01)。对胃癌患者和结肠癌患者血清抗体的诊断敏感度分别为35.9%和44.0%,结论本实验通过工程菌表达纯化的CEA多表位融合蛋白具有很好的抗原性,对用于血清学诊断的研究有一定的可行性,对制备ELISA血清检测试剂盒提供了理论基础,为下一步免疫反应及抗CEA抗体的制备奠定基础。; 王鹏飞朱茜张丽芳朱冠保; 关键词：CEA 融合蛋白胃肠道肿瘤

开放式前后入路无张力疝修补术治疗腹股沟疝的疗效观察被引量：2: 2013年; 目的探讨开放式前后入路腹股沟疝修补术的手术结果及临床转归情况，以选择最佳的手术方式。方法将366例腹股沟疝患者根据手术方入路方式不同，分为A、B组。其中A组的186例应用普理灵疝装置（proleneherniasystem，PHS）前入路方式进行疝修补，B组的180例应用Kugel补片后入路方式进行疝修补，并比较2组的手术操作、术后恢复及手术后并发症的情况。结果A、B组间的手术时间（43±9vs42±10）、住院时间（56±15vs53±15）、切口感染（3vs0）及复发率（2vs1）比较，差异无统计学意义（P〉0．05），但B组患者的术后伤口明显疼痛有13例、伤口肿胀反应18例、局部异物感12例、阴囊水肿8例明显优于A组患者（P〈0．05）。结论与前入路PHS修补术相比，后入路Kugel补片修补手术的创伤小、并发症发生率低及恢复快。; 王鹏飞朱茜韩少良刘纳新朱冠保; 关键词：腹股沟疝疝修补前入路后入路

PD-L2蛋白B细胞表位预测及其与PD-1结合的三维结构分析: 2018年; 目的:对人源程序性死亡因子1配体2(PD-L2)的B细胞表位进行预测及其与PD-1结合的三维结构分析。方法:采用生物信息学分析软件及服务器上的在线分析系统预测人类PD-L2蛋白的二级结构,柔性区域,Hopp&Woods亲水性、Zimmerman极性参数和Jameson-Wolf抗原指数以及Emini表面可及性方案等,预测结果被用以对PD-L2的优势B细胞表位区段进行多方面分析。运用抗原指数分析,预测PD-L2的B细胞表位。使用BLAST分析人源PD-L2与小鼠PD-L2的同源性,将人源PD-L2的B表位与小鼠PD-L2的序列进行匹配。将与人源PD-L2表位匹配的序列在小鼠PD-1与小鼠PD-L2的结合模型上定位,对其立体结构进行模拟,进一步直观地分析B细胞表位与蛋白结合位点的关系。结果:PD-L2的全长氨基酸序列共含有273个氨基酸,相对分子质量为31 k Da的可溶性蛋白;经综合分析,其B细胞优势表位可能为氨基酸序列N端的60~72、93~97、133~139、164~171区段。模拟立体结构分析显示表位60~72区段"QKVENDTSPHRER"位于PD-1与PDL2的结合区域内。结论:利用生物信息学预测发现PD-L2的优势B细胞表位中,60~72、93~97、133~139、164~171区段为PD-L2的B细胞表位,其中表位60~72区段"QKVENDTSPHRER"位于PD-1与PD-L2的结合区域内。可为PD-L2抗体设计和研究提供理论基础。; 程开陈旭东吕开绩金劲激叶晓鲜张丽芳朱冠保; 关键词：B细胞表位

microRNA-212对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭能力的影响被引量：4: 2016年; 目的:研究人microRNA-212(miR-212)对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭能力的影响。方法:通过化学方法合成人成熟型miR-212抑制基因i-miR-212,分别以25、50、75、100 nmol/L浓度通过脂质体转染方法转染SGC7901细胞,同时设空白组和无序列对照组。采用Real-time PCR、细胞计数和Transwell小室等实验方法,分别检测各组细胞miR-212的表达、miR-212对细胞增殖的影响及miR-212对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:各浓度i-miR-212转染SGC7901细胞后,miR-212表达均降低,以50 nmol/L i-miR-212转染组最佳,较无序列对照组降低约94.60%;50 nmol/L i-miR-212转染组与无序列对照组在细胞计数上差异有统计学意义(P<0.01)。在细胞侵袭实验中50 nmol/L i-miR-212转染组透膜细胞明显多于无序列对照组(P<0.01),在迁移实验中i-miR-212转染组(50 nmol/L)的透膜细胞明显多于无序列对照组(P<0.01)。结论:转染成熟型人i-miR-212能使胃癌细胞系SGC7901细胞中miR-212的表达明显下降,并能显著促进胃癌细胞系SGC7901的增殖、迁移及侵袭能力,表明miR-212与胃癌肿瘤细胞的转移具有相关性。; 应江辉蒋佩佩金灿灿庞文洋蔡一奇朱冠保; 关键词：胃癌迁移增殖

预防髋关节置换术后感染手术室环境的管理被引量：4: 2014年; 目的观察手术室环境对髋关节置换术(THA)术后感染的影响,探讨层流手术室对预防THA术后感染的作用。方法以手术室改造后(2012年1月-2013年6月)行THA患者162例为观察组;以手术室改造前(2010年1月-2011年6月)行THA患者168例为对照组;观察组在百级层流手术室进行手术,对照组在传统手术室进行手术;观察两组术前、术后手术室菌落数以及患者术后感染率。结果术前监测显示,手术室沉降菌落数观察组为(0.213±0.186)CFU/m3,对照组为(0.592±0.783)CFU/m3,两者比较差异无统计学意义;术后监测显示,手术室沉降菌落数观察组为(23.627±11.278)CFU/m3,对照组为(43.848±17.838)CFU/m3,观察组手术环境中菌落数明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者术后无1例发生感染,对照组感染率为0.60%,差异无统计学意义。结论层流手术室能够提高手术环境的清洁程度,能有效预防THA感染。; 郑莉俊鲍峥赵佳静; 关键词：手术室髋关节置换术

乳腺导管原位癌保乳治疗的疗效及安全性研究: 2013年; 目的探讨乳腺导管原位癌（ductal carcinoma in situ,DCIS）保乳治疗的临床效果并对其安全性进行评价.方法回顾温州医学院附属第一医院2010年3月至2013年3月进行保乳治疗的DCIS54例（实验组）及同期行乳房全切治疗的DCIS 49例（对照组）,分析比较2组的局部复发（local recur-rence,LR）和远处转移情况及3年无病生存率（disease-free survival,DFS）,评价保乳治疗的疗效和安全性.结果所有患者均获随访,平均（22.3 ±8.5）（5～39）个月,实验组未出现LR,对照组胸壁复发1例,实验组1例出现远处转移,对照组出现2例远处转移；2组DFS分别为100％和95.9％,差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论对DCIS采取保乳治疗和乳房全切治疗,术后LR和远处转移现象无明显差异,对DCIS行保乳治疗是安全的,可进一步推广.; 王鹏飞朱冠保韩少良; 关键词：乳腺导管原位癌保乳治疗局部复发

普外科手术切口感染因素调查分析被引量：17: 2014年; 目的分析普外科手术患者的临床资料,了解手术切口感染的相关因素,探讨降低普外科手术切口感染率的护理措施。方法选取2010年9月-2013年9月普外科3 256例手术患者的临床资料,采用回顾性分析法对手术患者的临床资料进行分析,采用SPSS13.0进行统计处理。结果共3 256例患者其中发生手术切口感染82例,切口感染率为2.52%;共分离出110株病原菌,其中以革兰阴性菌为主,共78株占70.91%;经logistic多因素回归分析,有基础疾病、手术用时间>120min、手术性质、住院时间>26d及Ⅲ类手术切口是手术切口感染的高危因素。结论医院相关部门应积极采取相应护理措施,以此降低切口感染的发生率。; 黄迪君倪红红陆玲玲; 关键词：普外科切口感染护理措施

预防老年患者腹部术后肺部感染的综合护理管理被引量：9: 2014年; 目的：探讨预防老年患者腹部术后肺部感染的管理，以降低老年患者腹部手术后肺部感染的发生率。方法收集2011年6月－2013年6月在医院进行腹部手术的老年患者180例，根据护理方法的不同，随机分为普通护理组及护理干预组，各90例，普通护理组和护理干预组均进行普通护理，护理干预组患者再进行预防肺部感染的护理，采用SPSS17．0进行统计分析。结果第1～5天排痰量普通护理组分别为（13．55±2．42）、（17．92±2．87）、（19．47±2．98）、（24．58±3．54）、（28．48±3．69）m l；护理干预组分别为（19．43±2．87）、（23．58±3．32）、（24．84±3．45）、（31．47±4．33）、（35．84±4．65）m l ，护理干预组每日排痰量均显著性多于普通护理组（ P＜0．05）。结论肺部感染为腹部手术常见并发症，对腹部手术老年患者术前和术后进行综合呼吸道护理可降低患者肺部感染发生率。; 倪红红黄迪君陈金玲; 关键词：腹部手术肺部感染

piRNA在胃癌与正常胃黏膜组织中表达的比较: 2017年; 目的:分析piRNA在胃癌组织与正常胃黏膜组织中表达的差异性。方法:通过新一代高通量测序技术Solexa对胃癌组织和正常胃黏膜组织进行小分子RNA(s RNA)深度测序,并通过生物信息学分析胃癌组织与正常胃黏膜组织中piRNA的表达差异。根据分析结果选取4种piRNA(登录号分别为DQ570956、DQ575659、DQ594126和DQ597128),通过茎环反转录实时定量PCR(简称茎环RT-q PCR)技术验证其存在及其在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达差异。结果:Solexa深度测序结果显示,正常胃黏膜与胃癌组织中测得的piRNA种类在各标本所测得所有s RNA种类中所占的比例差异无统计学意义(Z=0.835,P=0.678);正常胃黏膜组织中测得的piRNA数量在各标本所测得s RNA总量中所占的比例高于胃癌组织,差异有统计学意义(Z=2.167,P=0.042);根据分析结果选取4种piRNA,经茎环RT-q PCR法检测显示,这4种piRNA在胃癌组织中的表达量显著低于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌组织存在多种差异表达的piRNA,且在表达量上与正常胃黏膜组织存在显著性差异,本研究选取的4种piRNA可能参与胃癌的发生发展进程。; 蒋佩佩蔡一奇王鹏飞陈孝冬金劲激胡畅远陈文静薛向阳张丽芳朱冠保; 关键词：胃肿瘤 PIRNA 小分子RNA 聚合酶链反应

MAGE-A3多克隆抗体的制备及在胃癌细胞检测中的应用被引量：3: 2017年; 目的:通过原核表达系统制备人黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)蛋白,制备其多克隆抗体,经鉴定后用于胃癌细胞检测。方法:将MAGE-A3全长核酸序列经原核密码子优化后全基因序列合成,克隆至原核表达载体pET21a(+),构建pET21a(+)/MAGE-A3重组质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达MAGE-A3蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot分析鉴定;纯化后的MAGE-A3蛋白免疫日本大耳白兔制备多克隆血清抗体,用ELISA、Western blot、免疫荧光技术分析该多克隆抗体的特异性,并用免疫组织化学技术鉴定MAGE-A3兔多克隆抗体在人胃癌细胞免疫检测应用中的可行性。结果:成功构建重组质粒pET21a(+)/MAGE-A3,并经原核表达系统表达MAGE-A3蛋白。SDS-PAGE显示目的蛋白分子质量大小约为48 k Da,与预期蛋白大小一致,并以His单抗进行Western blot鉴定,出现了特异性的单一条带。MAGEA3蛋白免疫日本大耳白兔,可诱导兔产生特异性抗体,免疫后第8周达到高峰,经Western blot检测显示多克隆血清可特异性识别靶蛋白,出现阳性单一条带;经免疫荧光检测显示,在MAGE-A3阳性细胞A-375(黑色素瘤细胞株)和SGC-7901细胞(胃癌细胞株)的胞浆内出现荧光团块。表明兔多克隆抗体可特异性识别天然的MAGE-A3蛋白。结合免疫荧光结果后经ELISA检测,可认为该多克隆Ig G抗体效价可达1:40 000;免疫组织化学检测显示在A-375和SGC-7901肿瘤组织的胞浆内出现团块状棕黄色颗粒样沉淀,而在BGC-823肿瘤组织中呈阴性,表明制备的MAGE-A3兔多克隆抗体能够特异性地识别肿瘤组织中MAGE-A3蛋白。结论:通过原核表达系统制备了MAGE-A3蛋白,并免疫兔制备了MAGE-A3蛋白特异性兔多克隆抗体,同时可以特异性地识别人胃癌细胞中的MAGE-A3蛋白,可作为免疫诊断用抗原。; 蔡一奇程开陈旭东陈孝冬岑丹维张婵琼宋易玲毛姗姗叶晓鲜张丽芳朱冠保; 关键词：原核表达系统多克隆抗体胃肿瘤

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