安徽省自然科学基金(11040606M92)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 相关作者：刘健张弦刘璐蒋安民储俊更多>>
- 相关机构：合肥工业大学中国科学技术大学安徽科技学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 铅、镉胁迫下鱼腥草抗氧化酶响应研究被引量：7
- 2014年
- 文章采用营养液培养法研究铅(Pb)、镉(Cd)单一及复合胁迫下鱼腥草抗氧化酶活和膜脂过氧化响应规律。结果表明:Pb、Cd单一胁迫时,随着处理质量浓度的增加,鱼腥草叶片中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性均表现为先上升后下降,丙二醛(MDA)浓度呈上升趋势,Cd对鱼腥草的影响和伤害作用明显大于Pb,表明鱼腥草具有较强的耐Pb能力;Pb、Cd复合胁迫时,正交实验结果显示Pb对SOD、MDA影响极显著,Cd对CAT影响极显著,而两者对POD均无显著影响;与单一胁迫相比,复合胁迫下鱼腥草叶片MDA浓度对POD、SOD活性有抑制作用,对CAT活性影响变化不大,表明Pb、Cd复合胁迫对植物细胞的过氧化损伤加重,对鱼腥草的毒害加剧。
- 许娜蒋安民储俊刘健
- 关键词：鱼腥草抗氧化系统重金属胁迫
- 小鼠肥大细胞蛋白酶4的原核表达和多克隆抗体制备
- 2013年
- 文章构建小鼠肥大细胞蛋白酶4(mMCP-4)原核表达体系,获得原核表达蛋白,并制备兔抗mMCP-4多克隆抗体,提取小鼠脾细胞总RNA,运用RT-PCR技术获得目的基因mMCP-4,构建重组原核表达载体pET28a-mMCP-4,将其转化到大肠杆菌BL21中诱导表达。mMCP-4融合蛋白经Ni亲和层析法纯化后,作为抗原免疫兔子获得mMCP-4多克隆抗体。采用ELISA法测抗体效价,western blot检测抗体特异性。结果表明,构建重组表达质粒pET28a-mMCP-4,经大规模原核表达获得大量mMCP-4融合蛋白,制备的兔抗血清效价达1∶128 000,并表现出较好特异性。研究结果为进一步研究mMCP-4生物学功能奠定了基础。
- 刘璐刘健
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 三种植物甾醇调控SRE元件和3T3-L1细胞脂肪化活性的作用被引量：1
- 2013年
- [目的]为了研究植物甾醇对脂质代谢的调控作用。[方法]利用所构建的SRE荧光素酶活性测定系统,体外考察了豆甾醇、β-谷甾醇和菜油甾醇3种常见的植物甾醇对SRE元件的调控活性。[结果]植物甾醇能够增强SRE元件活性。植物甾醇也可以增加3T3-L1细胞的脂肪化作用。[结论]植物甾醇可能正调控脂质的合成。
- 陈彦光张弦刘健
- 关键词：植物甾醇HEPG2细胞荧光素酶
- SRE元件报告质粒构建、转染和活性测定被引量：2
- 2014年
- 固醇调节元件结合蛋白(SREBP)是机体调控脂质合成的重要转录因子,其作用靶标是所调控基因启动子区域的SRE元件,构建该元件报告质粒对于评价SREBP相关活性物质的作用机制具有重要意义。文章扩增或人工合成了人LDLr基因启动子区域SRE元件1次重复片段或3次重复片段,将其插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建了2种含有人SRE元件的荧光素酶报告质粒;将该报告质粒转染到人肝癌细胞HepG2中,胰岛素处理可以显著活化荧光素报告质粒,而25-羟基胆固醇和胆固醇结合处理可以强烈抑制。结果表明,所构建的质粒能成功地反映SREBP活性的改变,为体外快速检测SREBP活性相关调控物质提供了一个有效的平台。
- 张弦王友平刘璐刘健
- 关键词：活性测定
