国家自然科学基金(81170927)
- 作品数：7 被引量：24H指数：2
- 相关作者：高玉光张莉王玉敏韩晓谦韩婷婷更多>>
- 相关机构：滨州医学院附属医院滨州医学院潍坊市坊子区人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- AKT-Foxo3a信号通路调控小鼠MMP-20基因表达的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:本研究旨在探讨AKT-Foxo3a信号通路在基质金属蛋白酶-20(matrix metalloproteinase-20,MMP-20)基因表达中的作用。方法:分别通过免疫组化技术、实时定量RT-PCR技术以及双荧光素酶报告基因检测系统分析AKT-Foxo3a信号通路对MMP-20启动子转录活性的影响。结果:免疫组化染色结果显示,AKT及磷酸化Foxo3a(P-Foxo3a)均在分泌期成釉细胞核中呈阳性表达;RT-PCR检测结果显示,AKT阻断剂可显著抑制Foxo3a诱导的MMP-20基因的表达(P﹤0.05);双荧光素酶分析结果显示,AKT阻断剂亦可显著抑制Foxo3a调控MMP-20基因启动子的转录活性(P﹤0.05)。结论:转录因子Foxo3a可能通过AKT-Foxo3a信号通路调控MMP-20基因的表达,从而参与釉质发育过程。
- 梁广智王云虹刘媛媛慈浩粟荣丽韩晓谦孙轶群高玉光
- 关键词：AKTFOXO3A
- 3种方式修复乳磨牙大面积缺损的临床疗效被引量：17
- 2018年
- 目的探讨不同修复方式对乳磨牙大面积缺损修复的临床疗效。方法选择大面积缺损的乳磨牙150颗,将其随机分成A、B、C组。A组选用玻璃离子加复合树脂修复,B组选用Hall技术修复,C组选用金属预成冠修复。比较3组患牙6、12个月的修复成功率。结果 A、B、C组间6个月修复成功率差异无统计学意义(P>0.05);B、C组12个月修复成功率均明显高于A组(P<0.05)。结论 Hall技术和金属预成冠对乳磨牙大面积缺损的修复成功率高于玻璃离子加复合树脂。
- 王帅高玉光刘玉三张宾
- 关键词：玻璃离子复合树脂金属预成冠乳磨牙缺损
- Smad3调控成釉细胞Amelotin启动子转录活性的研究被引量：1
- 2015年
- 目的:研究Smad3对Amelotin启动子转录活性的影响。方法:用基因克隆技术获得含有不同长度Amelotin启动子片段的荧光素酶报告基因载体,然后将其与Smad3瞬时转染小鼠成釉细胞,并用双荧光素酶报告基因检测其活性;生物学信息软件对人和小鼠的Amelotin基因启动子序列的同源性进行BLAST分析;凝胶迁移实验(EMSA)观察Smad3和Amelotin启动子特异性结合位点之间的相互作用;基因定点突变构建Smad3结合位点突变型Amelotin启动子,并用双荧光素酶报告基因检测系统分析Smad3对野生型和突变型Amelotin启动子转录活性的影响。结果:Smad3转染后,Amelotin启动子(-160^+196)转录活性明显增强(P<0.05);将人与小鼠的Amelotin启动子序列(-160^+196)进行Blast序列比对,发现两序列在(-160^-1)具有很大的同源性;EMSA结果显示,Smad3与Amelotin启动子(-160^+196)的GTCTG有相互作用;将Amelotin启动子上Smad3结合位点特征性序列"GTCTG"突变为"CCCTG"后,Smad3对突变型Amelotin基因启动子的转录活性无显著影响(P>0.05)。结论:转录因子Smad3可通过与Amelotin启动子特定序列结合而调控Amelotin的基因表达,从而在釉质发育过程中发挥重要作用。
- 许针针张莉王玉敏李东亮高艳高玉光
- 关键词：SMAD3EMSA
- 活化型TAK1转基因小鼠的建立及TAK1对牙釉质发育影响的初步研究被引量：1
- 2014年
- 目的:建立人活化型TAK1(caTAK1)转基因小鼠,初步研究TAK1对釉质发育的影响。方法:克隆小鼠釉原蛋白(Amelogenin,Amelx)启动子及人TAK1的全长基因,并利用缺失突变原理扩增caTAK1基因;运用Gateway技术将caTAK1基因插入Amelx启动子下游构建转基因表达载体,并通过显微注射法建立caTAK1转基因小鼠;用PCR扩增对转基因小鼠的基因型进行鉴定,RT-PCR检测外源性TAK1基因在转基因小鼠颌骨中的表达,并运用X线片、体视显微镜及微型CT对转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度和病理性磨损程度进行观察。结果:成功构建了caTAK1转基因表达载体并制备转基因小鼠;转入的人caTAK1基因在小鼠颌骨组织中特异性表达;活化型TAK1转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度较野生型小鼠差,1月龄时,两种小鼠磨牙釉质表面的磨损程度无明显差别,而6月龄时,与野生型小鼠相比,活化型TAK1转基因小鼠磨牙釉质有严重磨损。结论:TAK1在牙齿釉质发育过程中具有重要作用。
- 相黎黎褚青荣丽韩晓谦孙轶群张莉高玉光
- 关键词：基因突变转基因动物釉质发育
- 活化型TGFβRI(T204D)转基因小鼠的建立及其对牙釉质发育影响的初步研究
- 2018年
- 目的建立人活化型TGFβRI(T204D)的转基因小鼠,并利用转基因动物模型初步研究T204D对牙齿釉质发育的影响。方法克隆小鼠釉原蛋白(Amelogenin,Amelx)启动子及人T204D的全长基因,并利用缺失突变原理扩增T204D基因。运用Gateway技术将T204D基因插入Amelx启动子下游构建转基因表达载体,通过显微注射法建立T204D转基因C57BL/6小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR检测外源性TGFβRI基因表达。体视显微镜及扫描电镜下观察转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度和病理性磨损程度。结果构建了T204D转基因表达载体并制备转基因小鼠;转入的人T204D基因在小鼠颌骨组织中特异性表达;组织学分析显示:活化型TGFβRI转基因小鼠磨牙釉质矿化程度较野生型小鼠差。6个月龄时,与野生型小鼠相比,活化型TGFβRI转基因小鼠磨牙釉质有严重磨损。结论 TGFβRI在牙齿釉质发育过程中具有重要作用。
- 禹翠翠张钰宋文英褚青杨春燕高玉光
- 关键词：基因突变转基因动物釉质发育
- Jun家族蛋白在釉质发育中的表达及对amelogenin的调控作用被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨Jun家族蛋白Jun B、c-Jun和Jun D在小鼠釉质发育中的作用。方法:应用免疫组化染色检测Jun B、c-Jun和Jun D在不同发育阶段小鼠牙胚成釉细胞中的表达;分别以0.5μg和2.0μg的Jun B、c-Jun和Jun D转染小鼠成釉细胞后,运用RT-PCR观察其对釉原蛋白amelogenin mRNA表达的影响。结果:免疫组化染色结果显示:釉质分泌期时,Jun B在成釉细胞核中无显著表达,Jun D呈弱表达,而c-Jun表达明显;釉质转型期时,Jun B和Jun D表达增强且Jun D早于Jun B,c-Jun持续表达明显;在釉质成熟期时,Jun B、c-Jun和Jun D均显著表达。RT-PCR检测显示:高剂量Jun B可明显抑制amelogenin的表达(P<0.05);低剂量c-Jun可明显促进amelogenin的表达(P<0.05);Jun D对amelogenin的表达无显著影响。结论:在釉质发育早期,c-Jun可通过上调釉原蛋白的表达参与釉质发育。在釉质发育后期,Jun B可通过抑制釉原蛋白的分泌促进釉质的成熟。Jun D对amelogenin表达无显著影响。
- 徐畅魏亚红王玉敏张莉韩晓谦韩婷婷高玉光
- 关键词：釉原蛋白
- TGF-β1/Smad3信号通路调控小鼠成釉细胞Amelotin启动子转录活性的研究被引量：3
- 2014年
- 目的:研究TGF-β1/Smad3信号通路对调控小鼠成釉细胞Amelotin启动子转录活性的影响。方法:首先利用双荧光素酶报告基因检测系统分析TGF-β1和Smad3对小鼠Amelotin启动子转录活性的影响;然后利用染色体免疫共沉淀(ChIP)方法观察Smad3与Amelotin启动子特异性结合位点之间的相互作用;最后利用基因定点突变构建Smad3结合位点突变型Amelotin启动子,并用双荧光素酶报告基因检测系统分析TGF-β1和Smad3对野生型和突变型Amelotin启动子转录活性的影响。结果:TGF-β1和Smad3作用于成釉细胞后,Amelotin启动子转录活性明显增强(P<0.05);Smad3与Amelotin基因启动子的"AGAC"及"GTCT"序列有相互作用;将Amelotin启动子上Smad3结合位点特征性序列突变为"TGTC"和"GACA"后,TGF-β1和Smad3对突变型Amelotin基因启动子转录活性的影响较野生型明显减弱(P<0.05)。结论:TGF-β1/Smad3信号通路通过作用于Smad3结合位点调控成釉细胞Amelotin基因启动子的转录活性。
- 李盼王玉敏张莉李伯翰韩婷婷王爱芹高玉光
- 关键词：TGF-Β1SMAD3成釉细胞
