广东省医学科学技术研究基金(A2008376)
- 作品数：4 被引量：24H指数：3
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- 高效毛细管电泳结合PCR法鉴别南葶苈子与车前子被引量：5
- 2010年
- 目的:建立以高效毛细管电泳结合聚合酶链式反应(PCR)鉴别南葶苈子与车前子的方法。方法:采用毛细管(60cm×75μm),运行缓冲液为30mmol·L-1四硼酸钠(pH9.2),高压进样5s,分离电压为12kV,检测波长为254nm,分析南葶苈子与车前子的PCR扩增产物。结果:高效毛细管电泳能快速、准确地分离南葶苈子与车前子的PCR扩增产物,二者的电泳色谱图存在较大差异,容易区分。结论:本法简单、快捷、灵敏,可用于鉴别南葶苈子与车前子。
- 郭丹陈娜娜
- 关键词：南葶苈子高效毛细管电泳聚合酶链式反应
- 尼美舒利抑制肝癌Hep3B细胞增殖及β-连环蛋白的转录活性的研究被引量：2
- 2010年
- 目的:观察环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对体外培养的人肝细胞癌Hep3B细胞增殖和细胞内β-连环蛋白(β-catenin)转录活性的影响,以探讨尼美舒利抗增殖作用的分子机制。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Hep3B细胞内COX-2mRNA的表达水平;将细胞分别加入10、25、50、100、200μmol·L-1尼美舒利及尼美舒利(100μmol·L-1)+前列腺素E(2PGE2,10μmol·L-1)处理,CCK-8细胞计数法测定细胞增殖活性,双荧光素酶报告系统检测β-catenin的转录活性。同时各试验均设空白对照组进行比较。结果:Hep3B细胞高表达COX-2mRNA。与空白对照组比较,尼美舒利可浓度依赖性地抑制细胞的增殖(P<0.01),作用72h的半数抑制浓度(IC50)为76.33μmol·L-1;尼美舒利显著抑制Hep3B细胞内β-catenin的转录活性(P<0.05),加入PGE2后可显著减弱尼美舒利的作用(P<0.05)。结论:尼美舒利可能通过抑制COX-2活性和PGE2的生成,从而抑制β-catenin的转录活性发挥抗肝癌细胞增殖的作用。
- 郭丹陈娜娜邵群梅刘静侯连兵
- 关键词：尼美舒利肝细胞癌环氧合酶-2前列腺素E2Β-连环蛋白
- 前列腺素E2活化EP2受体促进肝癌细胞增殖被引量：4
- 2011年
- 目的研究前列腺素E2（PGE2）对肝癌细胞增殖活性的影响,并探讨其作用主要通过何种前列腺素EP受体介导。方法采用RT-PCR检测肝细胞癌Hep3B细胞COX-2和EP1~EP4受体mRNA的表达水平,cell counting kit-8（CCK-8）细胞计数法检测PGE2和EP2受体激动药butaprost及EP3/EP4受体激动药PGE1 alcohol对细胞增殖的影响。结果人肝癌细胞Hep3B高表达COX-2 mRNA,正常肝细胞QSG7701 COX-2 mRNA表达水平远远弱于前者。四种亚型的PGE2受体EP1~EP4的mRNA在人肝细胞癌细胞株Hep3B均有表达,EP2和EP4受体表达水平明显高于EP1和EP3受体。PGE2呈时间和浓度依赖性地促进Hep3B细胞增殖。孵育细胞48h后,10μmol/L的PGE2表现出明显的促细胞增殖的作用,与未加PGE2的阴性对照组相比,细胞的增殖活性上升22.57%（P〈0.001）。0.1、1和10μmol/L的PGE2作用Hep3B细胞72 h后,细胞增殖活性分别较对照组上升12.13%（P〈0.01）、17.58%（P〈0.01）和33.07%（P〈0.001）。20μmol/L的butaprost孵育细胞72 h使细胞增殖活性提高了21.96%（P〈0.001）,而EP3/EP4受体激动剂PGE1alcohol在浓度为2~20μmol/L的范围内对Hep3B细胞增殖活性无显著影响,当浓度达到200μmol/L时则对细胞的增殖产生抑制作用。结论 Hep3B细胞上的EP2受体被选择性激动后可刺激细胞增殖,提示EP2受体介导了PGE2对Hep3B细胞的促增殖作用。
- 郭丹陈娜娜侯连兵雷林生
- 关键词：前列腺素E2肝细胞癌细胞增殖
- 苦参碱抑制肝癌Hep3B细胞生长及β-catenin的转录活性被引量：13
- 2010年
- 目的：观察苦参碱对人肝细胞癌Hep3B细胞增殖、细胞周期、凋亡率以及细胞内β-catenin转录活性的影响,以探讨苦参碱抗肝癌细胞增殖作用的机制。方法：采用cell counting kit-8（CCK-8）细胞计数法测定细胞增殖活性;流式细胞术进行细胞凋亡率和细胞周期分析;双荧光素酶报告系统检测β-catenin的转录活性。结果：苦参碱（50~800mg/L）浓度依赖性地抑制Hep3B细胞的增殖（P〈0.01）,作用72h的半数抑制浓度（IC50）为312.53mg/L。阴性对照与400mg/L的苦参碱作用48h后,细胞凋亡率分别为4.39%和21.73%,G0/G1期细胞所占比例分别为57.39%和74.48%,S期细胞所占比例为27.67%和12.94%。50、200、800mg/L苦参碱浓度依赖性地抑制Hep3B细胞内β-catenin的转录活性（P〈0.05或P〈0.01）。结论：苦参碱通过抑制β-catenin的转录活性诱导Hep3B细胞凋亡和细胞周期阻滞,从而表现出抗肝癌细胞增殖的作用。
- 郭丹陈娜娜周萍潘斌侯连兵
- 关键词：苦参碱肝细胞癌细胞增殖细胞周期Β-CATENIN
