广东省自然科学基金(5300762)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
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- 水通道蛋白-1在炎症性胸腔积液大鼠胸膜上的表达及其意义被引量：1
- 2008年
- 胸膜炎是引起胸腔积液的主要原因之一。近年发现多种细胞膜上存在参与液体转运的水通道蛋白（aquaporin，AQP），并证实AQP参与许多疾病的液体转运，AQP的发现为研究胸腔积液生成和吸收的分子机制提供了新方法。我们通过复制炎症性胸腔积液大鼠模型，观察AQP-1在炎症性胸腔积液大鼠胸膜上的表达及其与胸腔积液形成的相互关系，探讨胸膜AQP-1在胸腔液体转运中的作用。
- 张伟张伟谢灿茂何桥郭禹标彭穗玮
- 关键词：水通道蛋白-1胸腔积液胸膜炎炎症性AQP-1
- RNA干扰抑制胸膜间皮细胞水通道蛋白1表达的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究 RNA 干扰技术对大鼠胸膜间皮细胞水通道蛋白1(AQP1)基因表达的影响,探讨应用该技术治疗胸腔积液的可行性。方法体外培养大鼠胸膜间皮细胞,细胞鉴定后,采用免疫细胞化学、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测 AQP1表达;设计并构建2个靶向大鼠AQP1基因的短发夹 RNA(shRNA)重组质粒,脂质体转染大鼠胸膜间皮细胞48 h 后,采用 RT-PCR 及Western 印迹方法分别在 mRNA 和蛋白质水平检测 AQP1基因表达的抑制效果。结果胸膜间皮细胞存在 AQP1表达,所设计的2个 AQP1-siRNA 重组质粒可不同程度地抑制 AQP1在胸膜间皮细胞中的表达,在 mRNA 水平抑制率分别为83.5%和90.9%;在蛋白质水平抑制率分别为41.2%和67.6%,与空白对照组和阴性对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.01)。结论质粒介导的 RNA干扰可明显抑制大鼠胸膜间皮细胞 AQP1基因的表达,且抑制率具有序列相关性,是潜在的胸腔积液基因治疗新方法。
- 张伟谢灿茂李志平朱智文严英硕杜宏春
- 关键词：胸膜上皮细胞RNA干扰水通道蛋白1
- 角叉菜胶致炎症性胸腔积液大鼠胸膜上水通道蛋白1的表达被引量：5
- 2008年
- 目的探讨水通道蛋白1(AQP-1)在炎症性胸腔积液大鼠胸膜上的表达及其与胸水形成的关系。方法56只健康Wistar大鼠随机分为对照组(8只)和胸膜炎组(48只)。采用角叉菜胶胸腔内注射复制炎症性胸腔积液大鼠模型。胸膜炎组根据注入角叉菜胶后处理时间再分为6、12、24、36、48和72h组,每组8只。测定各组大鼠胸腔积液量,对胸腔积液进行细胞计数和分类,采用HE染色观察脏、壁层胸膜的病理变化,采用免疫组化染色检测AQP-1在大鼠胸膜上的分布,分别采用RT-PCR和Westernblot方法检测脏、壁层胸膜AQP-1的mRNA和蛋白表达。结果胸膜炎各时相组胸水量分别为(2.10±0.22)mL、(4.10±0.15)mL、(4.40±0.36)mL、(3.20±0.27)mL、(2.60±0.18)mL和(0.12±0.02)mL。AQP-1主要表达在脏、壁层胸膜的间皮细胞和毛细血管内皮细胞。胸膜炎各时相组脏、壁层胸膜AQP-1表达均增强。胸膜炎组AQP-1mRNA在壁层胸膜的表达于6h开始升高,24h达高峰;在脏层胸膜的表达于12h开始升高,24h达高峰。AQP-1蛋白表达的变化趋势与mRNA表达一致。12h和24h组壁层胸膜AQP-1表达与胸腔积液量呈正相关(r=0.857,r=0.846,P均<0.01);24h脏层胸膜AQP-1表达与胸腔积液量呈正相关(r=0.725,P<0.05)。结论胸膜炎胸腔积液时胸膜AQP-1表达增强,AQP-1可能参与炎症性胸腔积液的转运过程。
- 张伟谢灿茂
- 关键词：胸腔积液胸膜胸膜炎水通道蛋白1
- 高渗液对大鼠胸膜间皮细胞水通道蛋白1表达的影响被引量：4
- 2007年
- 目的观察高渗液对胸膜间皮细胞水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法体外培养 Wistar 大鼠胸膜间皮细胞,鉴定后将细胞随机分为对照组和高渗组,对照组以 D-MEM/F-12培养液培养,高渗组以含不同浓度 NaCl 的高渗培养液培养,100mmoL/L NaCl 组分为6、12、18及24h 4个时间组,应用 Western 印迹、RT-PCR 方法检测细胞中 AQP1表达变化。结果含25、50、75、100、150mmol/L NaCl 的高渗培养液作用细胞24h 后,AQP1蛋白表达量(A 值)分别为24.0±1.8、27.8±2.4、31.7±2.5、89.7±6.2及107.7±9.3,均高于对照组(10.8±1.5)(t 值分别为16.1、17.1、20.2、35.1、29.0,均 P<0.01);含100mmoL/L NaCl 高渗液培养细胞6、12、18及24h 后,AQP1表达量(A 值)分别为42.1±2.6、78.9±3.6、109.6±7.6及123.4±8.6,均高于对照组(12.9±1.9)(t 值分别为25.7、45.5、34.8、35.3,均 P<0.01)。结论高渗液能上调胸膜间皮细胞 AQP1的表达,AQP1可能参与胸水的转运。
- 张伟谢灿茂黄建强廖槐柯彩霞
- 关键词：胸膜上皮细胞水通道蛋白1
- 水通道蛋白1与胸腔积液发生机制的体内研究被引量：6
- 2009年
- 目的探讨水通道蛋白1(AQP1)在胸腔积液发生机制中的作用。方法SD大鼠按实验设计分为5组(n=24):地塞米松组、内毒素组、红霉素组、高渗盐水组及对照组,通过免疫组织化学染色测定AQP1在胸膜上的表达和定位;采用Real-time RT-PCR方法对不同刺激因子作用下不同时间胸膜组织AQP1的基因表达进行定量分析。结果大鼠脏、壁层胸膜间皮细胞及壁层胸膜下毛细血管内皮上均存在AQP1的表达,脏层胸膜间皮细胞上AQP1的表达较壁层胸膜明显[(7.43±2.02)×104copy/μg比(4.14±1.12)×104copy/μg,P<0.05]。地塞米松、高渗盐水上调大鼠胸膜组织AQP1的表达(P<0.05);红霉素、内毒素下调胸膜组织上AQP1的表达(P<0.05)。结论地塞米松、内毒素、红霉素和高渗盐水刺激下胸膜组织AQP1表达的改变,提示存在炎症因子和渗透梯度下调控AQP1的途径,胸膜组织上AQP1可能参与了炎症性胸腔积液的分泌和吸收。
- 廖槐谢灿茂
- 关键词：水通道蛋白1胸膜胸腔积液内毒素红霉素高渗盐水
