公共文化服务平台

慢性乙型肝炎和乙型肝炎病毒携带儿童差异表达基因分析: 2006年; 目的探讨儿童慢性乙型肝炎(CHB)和儿童乙型肝炎病毒(HBV)携带者(ASCs)的致病机制。方法采用抑制消减杂交(SSH)技术构建两者外周血单个核细胞差异表达基因cDNA文库,得到差异表达基因β2微球蛋白(β2-MG)。采集34例CHB和41例ASCs儿童外周血血浆,用酶联免疫试验检测β2-MG水平。结果成功构建了儿童CHB和ASCs的差异表达文库,发现在CHB儿童中β2-MG和铁转运蛋白等炎症相关基因表达增高。证实了β2-MG在蛋白水平也存在相应的差异表达。结论β2-MG在CHB患儿中的高表达参与儿童CHB的发病。; 唐翠兰周舟陈智路成吉; 关键词：乙型肝炎病毒携带者 Β2微球蛋白抑制消减杂交

定量RT-PCR分析穿孔素基因在无症状乙型肝炎病毒携带者中的表达及意义被引量：1: 2006年; 目的:验证无症状乙型肝炎病毒携带者(A SC s)与正常对照组消减文库中的差异基因穿孔素(perforin)在相应人群中的差异表达。方法:采集43例A SC s和41例正常对照者的外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBM C)并提取RNA,做定量RT-PCR(R ea l-tim e RT-PCR)。结果:穿孔素在HBV携带者中表达水平是正常对照的3.58倍。结论:通过定量RT-PCR首次证实了穿孔素基因在A SC s较正常对照表达增高,因穿孔素与免疫抑制有关,该基因在A SC s的高表达对于阐明A SC s的发病机制有重要意义。; 唐翠兰周舟陈智; 关键词：肝炎病毒乙型带病原状态逆转录聚合酶链反应

抑制消减杂交技术在筛选人慢性肝脏病相关基因中的应用: 2005年; 抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)是一种分析差异表达基因的方法,广泛应用于寻找疾病、生长发育不同阶段的相关基因,本文就SSH的原理及与相关技术的比较、在慢性肝脏疾病中的应用等方面进行综述。; 唐翠兰陈智; 关键词：肝疾病抑制消减杂交技术基因

抑制HBV复制的小干扰RNA的重组腺病毒构建与鉴定: 2009年; 目的构建可同时表达绿荧光蛋白（GFP）和针对HBVS区基因的小干扰RNA（siRNA）的重组腺病毒，并研究该siRNA在体外对HBV的抑制作用。方法采用PCR技术自质粒pEGFP-C1中扩增含CMV启动子的GFP表达框，自质粒pAVU6＋4sh579中扩增含U6启动子的针对HBV S 区579-597位基因的siRNA表达框，分别将两个表达框克隆至穿梭载体质粒pShuttle内，与质粒pADEasy-1在大肠杆菌BJ5183内进行同源重组，将阳性重组体DNA转染至人胚肾细胞株HEK293细胞中进行包装、扩增，并在HepG2.2.15细胞中初步观察其对HBV复制的抑制疗效。结果构建了可同时表达GFP和siRNA的重组腺病毒，其可在HEK293细胞中进行包装、扩增，并在HepG2.2.15细胞中对HBV-DNA、HBsAg和HBeAg的表达具有抑制作用。结论成功构建了可同时表达GFP和针对HBV的siRNA的重组腺病毒，并在体外实验中证实了其对HBV复制具有抑制作用。; 金晗英陈智羊正纲潘修成; 关键词：HBV 腺病毒载体 RNA干扰

慢性乙型肝炎病毒携带儿童血清及外周血单个核细胞培养上清干扰素γ和白细胞介素-10的水平及其意义被引量：1: 2006年; 目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带儿童血清及外周血单个核细胞(PBMC)经乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)刺激后培养上清干扰素γ(IFN-γ)和IL-10水平及临床意义。方法HBeAg阳性慢性HBV携带儿童21例(A组)、抗-HBe阳性慢性HBV携带儿童20例(B组)及正常儿童19例(C组),每例采集外周静脉血5 mL,分离血清及PBMC,PBMC体外单独培养或与HBcAg共培养72 h后,检测血清及培养上清IFN-γ和IL-10水平。结果血清IFN-γ在各组间无明显差异,A和B组血清IL-10较C组显著增高。经HBcAg处理后PBMC培养上清中,IFN-γ水平在B和C组较A组显著增高。同时,经HBcAg处理后A和B组PBMC培养上清中IL-10水平均较C组显著增高,尤以A组明显。结论IL-10水平及PBMC对HBcAg应答低下在儿童HBV携带者发病机制中起一定作用。; 唐翠兰周舟; 关键词：外周血单个核细胞乙型肝炎病毒核心抗原干扰素Γ 白细胞介素-10

无症状乙型肝炎病毒携带者外周血单个核细胞穿孔素基因表达: 2006年; 目的:检测无症状乙型肝炎病毒携带者(ASCs)与正常对照组消减文库中的差异基因穿孔素(perforin)在相应人群中的表达。方法:分离43例ASCs和41例正常对照者的外周静脉血单个核细胞(PBMC)并提取RNA,做定量RT-PCR检测。结果:穿孔素在HBV携带者中表达水平是正常对照的3.58倍。结论:穿孔素基因在ASCs高表达,对于阐明ASCs的发病机制有重要意义。; 唐翠兰周舟陈智; 关键词：无症状乙型肝炎病毒携带者抑制消减杂交定量RT-PCR

抑制消减杂交法筛选无症状乙型肝炎病毒携带者差异表达基因被引量：2: 2006年; 乙型肝炎病毒（HBV）携带者中,大多数是婴幼儿期感染,往往终生携带HBV,但正常成人初次感染后大多能清除病毒.除病毒因素外,主要是机体的免疫因素决定感染结局[1].机体对HBV的免疫应答受许多基因的调节,我们推测正是由于在正常人和HBV携带者之间存在的免疫相关基因表达的差异才导致了不同的感染结局.本研究旨在探讨HBV携带者与正常人外周血单个核细胞（PBMC）差异表达的基因,有助于阐明HBV携带发生发展机制及设计新的治疗靶标.; 唐翠兰陈智羊正纲周林福陈峰彭国平; 关键词：基因

荧光定量PCR与半定量PCR检测HBVDNA的对比分析被引量：15: 2005年; 目的对照分析荧光定量PCR与半定量PCR检测血清HBVDNA的载量,为临床基因检测实验室提供方法学选择依据。方法取164份临床检测标本各用荧光定量PCR与半定量PCR检测,结果作统计学分析。结果两种检测方法的灵敏度和特异度没有显著差异(χ2=1.75,P>0.05)。结论临床基因检测实验室可用半定量PCR法替代荧光定量PCR法检测血清HBVDNA的载量。; 周林福陈离伟姜云水陈峰; 关键词：荧光定量PCR

应用脐血造血干细胞治疗艾滋病的研究进展: 2005年; 目前,艾滋病(AIDS)的发病在世界各地呈持续的迅速上升趋势,为了达到重建艾滋病患者免疫功能的目的,人们寄巨大的希望于干细胞的功能重建和基因治疗。这里着重讨论了脐血造血干细胞淋巴系分化的体外诱导、成熟和基因修饰途径应用于艾滋病治疗的研究进展和存在的缺陷。; 龚梁陈智; 关键词：干细胞治疗脐血造血干细胞体外诱导基因修饰淋巴系

基于悬浮芯片技术的56种病原微生物的高通量检测被引量：13: 2007年; 目的:建立高通量、快速、可靠、经济的病原微生物诊断技术平台。方法:设计和合成针对56种常见病原微生物的探针和阳性对照,采用悬浮芯片技术,对56种病原微生物的阳性标准品进行检测。结果:56种标准品的检测值显著高于阴性对照,各病原微生物的阳性标准品和各探针之间无交叉反应。结论:建立了高通量、快速、可靠、经济的病原微生物诊断技术平台,为突发传染病的病原体诊断提供技术储备。; 朱海红蒋汉梁陈智曹清毅孙箴侯晓丽周林福陈峰羊正纲贾红宇许晓燕; 关键词：微生物学技术基因表达病原微生物

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

浙江省科技厅项目(2003C13015)