国家自然科学基金(30871713) 作品数:13 被引量:79 H指数:7 相关作者: 王彦华 申书兴 轩淑欣 顾爱侠 赵建军 更多>> 相关机构: 河北农业大学 浙江大学 山东省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
大白菜抗霜霉病同源基因的筛选与亚克隆文库的构建 2011年 根据植物抗霜霉病基因保守区设计简并引物,利用三维PCR方法对大白菜(Brassica campestris ssp.pekien-sis)‘85-1’BAC文库进行筛选,从19 200个BAC克隆中筛选到含有目的基因的10个阳性克隆。利用HindⅡ对其中的94-G-17克隆进行酶切,回收1~5 kb的DNA片段并连接到载体pUCHindⅡ?BAP上,构建了含有6 200个克隆的亚克隆文库。经电泳检测,插入片段在1~5 kb。该亚克隆文库的构建为克隆大白菜抗霜霉病同源基因全长奠定了基础。 张宏 轩淑欣 马爱茹 申书兴 王彦华关键词:大白菜 霜霉病 BAC克隆 基因组原位杂交中封阻DNA制备方法研究 被引量:4 2010年 在基因组原位杂交中,适当的封阻可以大大提高基因组原位杂交的效率。本研究采用煮沸法、超声波剪切法对大白菜基因组DNA进行剪切,研究了大白菜封阻DNA的制备方法。结果表明:珠沸法效率高,操作简单,当煮沸70 min DNA片段大小主要集中在200~500 bp,适于在基因组原位杂交中作为封阻。研究结果为基因组原位杂交的应用奠定了基础。 顾爱侠 李雪姣 冯大领 王彦华 陈雪平 申书兴关键词:基因组原位杂交 不结球白菜SRAP反应体系的建立与优化 被引量:1 2010年 以菜薹基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物及模板5种因素4个水平对不结球白菜SRAP反应体系进行优化,建立了适合不结球白菜的SRAP-PCR优化反应体系。利用该优化体系,选用30对芸薹属SRAP引物,对5份不结球白菜的基因组进行扩增,筛选出7对具有2条以上特异扩增条带的SRAP引物,验证了该优化体系的稳定性。 李向 轩淑欣 王彦华 赵建军 申书兴关键词:不结球白菜 SRAP PCR 正交试验 八个榆黄蘑菌株同功酶分析 被引量:3 2009年 为了探讨不同榆黄磨菌株之间的亲缘关系。采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,利用酯酶同工酶和过氧化物同工酶酶谱的相似性和差异性,计算了8个榆黄蘑供试菌株间的Pearson相似系数;并采用类间平均法(Be-tween-groups linkage)进行系统聚类,对供试菌株的亲缘关系进行分析。结果表明,所有供试菌株在2个同工酶系统中均有共同特征谱带,同时又体现了一定的多态性。菌株pc-5与其他各菌株遗传差异均较大;菌株pc-2与菌株pc-7的遗传差异很小,可能是源于同一种或为亲缘关系很近的变异类型;其余各菌株都有一定程度的差异性。 张玉铎 李明 张晓倩 李守勉 田景花关键词:榆黄蘑 同工酶 亲缘关系 聚类分析 大白菜细菌人工染色体文库的构建及鉴定 被引量:7 2011年 以我国优良的大白菜自交系‘85-1’为材料,利用pIndigoBAC-5为载体,通过对高分子量DNA的制备、大片段DNA的选择、连接转化条件等几个方面的优化,构建了大白菜细菌人工染色体文库。该文库由57600个克隆组成,平均大小为98.4kb,空载率为1.5%;覆盖大白菜基因组10.3倍;挑取6个克隆培养5d后,经HindⅢ完全酶切检测,其指纹图谱稳定一致。大白菜细菌人工染色体文库的构建为重要功能基因的克隆和定位及比较基因组研究奠定了基础。 冯大领 石学萍 杨煜 王彦华 轩淑欣 赵建军 申书兴关键词:大白菜 细菌人工染色体文库 稳定性 添加甘蓝基因的大白菜优良新种质的获得 甘蓝具有大白菜育种目标中所需的某些优异品质,如耐抽薹,抗病,富含硫代葡萄糖苷(简称硫苷)等。为拓宽大白菜遗传背景,引入甘蓝这些有益性状,以添加甘蓝染色体的大白菜异附加系为材料,合成遗传较为稳定的双体异附加系,创制含甘蓝耐... 闻晓英 刘立平 顾爱侠 王彦华 何洪巨 申书兴关键词:大白菜 甘蓝 新种质 抗病 硫苷 文献传递 芸薹属作物EST-SNP的发掘与分析 被引量:9 2010年 芸薹属作物是十字花科中重要的蔬菜和油用作物,经济价值和食用价值比较高。本研究通过生物信息学手段,从3个芸薹属物种EST序列中获得了大量的SNP和Indel资源,对SNP与EST的数量及拼接结果之间的关系、SNP碱基置换的偏好性、Indel碱基数量与发生频率之间的关系进行了分析。分析结果对深入研究芸薹属基因组特点具有一定的参考价值,为进一步通过试验验证预测的SNP位点、开发该作物高通量SNP分子标记奠定了基础。 李雪姣 张耿 顾爱侠 轩淑欣 王彦华 赵建军关键词:芸薹属 分子标记 结球甘蓝相对于大白菜的连锁群特异SSR标记建立 被引量:11 2009年 选用位于甘蓝9个连锁群的91对SSR引物,对8个结球甘蓝品种和7个大白菜品种进行PCR扩增,筛选出25对结球甘蓝相对大白菜的特异SSR引物,涉及甘蓝的9个连锁群,其中位于O1连锁群3对,O2连锁群4对,O3连锁群2对,O4连锁群3对,O5连锁群2对,O6连锁群2对,O7连锁群4对,O8连锁群2对,O9连锁群3对。为利用SSR标记鉴定大白菜—结球甘蓝异附加系中附加的结球甘蓝染色体奠定了基础。 顾爱侠 王彦华 轩淑欣 陈雪平 申书兴关键词:大白菜 结球甘蓝 SSR 大白菜—结球甘蓝1号染色体二体异附加系的获得与鉴定 被引量:17 2011年 以大白菜附加结球甘蓝1号和6号染色体的双单体异附加系为材料,从其自交后代38个植株中筛选出3株2n=22的植株。通过核型分析及SSR鉴定确定这3个植株为大白菜—结球甘蓝1号染色体二体异附加系,其外观性状在营养生长时期与二倍体大白菜没有明显的差异,在生殖生长期具有部分结球甘蓝的特征,其减数分裂终变期染色体联会时,11个二价体的比率达90.10%,后期Ⅱ以11-11-11-11分离的比例为83.50%,从而证明了具有很高的遗传稳定性。 吕文欣 王彦华 赵建军 顾爱侠 李艳霞 管志坤 闻晓英 申书兴关键词:大白菜 结球甘蓝 二体异附加系 减数分裂 SSR 胚挽救技术在植物育种中的应用 被引量:11 2010年 综述了胚挽救技术在植物远缘杂交、挽救发育不良或早期退化胚、培育三倍体及多倍体新种质方面的应用,分析了培养时期、培养基以及培养环境等因素对胚挽救效果的影响。 顾爱侠 冯大领 轩淑欣 李晓峰 罗双霞 申书兴关键词:胚挽救 影响因素