重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJ131101)
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
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- 2种线椒的种子萌发和幼苗生长对NaCl的耐受性分析被引量：11
- 2016年
- 通过研究不同浓度NaCl胁迫对线椒王和超级集结王2种线椒的种子萌发和幼苗生长的影响,探讨2种线椒的的耐盐碱能力。在NaCl处理情况下,测定线椒种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和幼苗的根长、株高和鲜重。结果表明,低浓度NaCl对2种线椒种子的发芽和幼苗生长有促进作用,高浓度则有抑制作用。线椒王的发芽率、发芽势、发芽指数在150mmol/L NaCl处理下最高,而活力指数在100mmol/L NaCl处理下最高。超级集结王的发芽指标都在50mmol/L NaCl处理下最高。2种线椒幼苗在低NaCl浓度时(≤100mmol/L)生长状态都较好,进一步提高盐浓度到150mmol/L时,对线椒王生长几乎没有影响,而超级集结王的生长状态明显变差。说明线椒王对盐胁迫的耐受性比超级集结王强。
- 秦娟罗光香李亭李元兵胡廷章
- 关键词：线椒盐胁迫种子幼苗耐受性
- OsLEA2基因在原核生物中的异源表达和抗性分析被引量：2
- 2013年
- 为了研究胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA2的功能,利用PCR方法扩增目的基因,采用基因重组、蛋白质表达和抗逆性分析对OsLEA2基因进行研究。结果表明,构建的原核表达载体pET32a-OsLEA2,转化到E.coli BL21中,得到表达OsLEA2融合蛋白的工程菌;SDA-PAGE分析表明融合蛋白的分子量约为29.4 kDa。OsLEA2的表达增强了大肠杆菌对高盐、高温、低温和紫外照射等非生物胁迫的抗性。该研究为进一步改良作物品种、提高农作物的抗逆性奠定基础。
- 胡廷章钟彦陈林杨俊年黄小云
- 关键词：异源表达大肠杆菌抗逆性
- 盐胁迫对宇航四号朝天椒种子萌发和幼苗生长的影响被引量：6
- 2016年
- 为耐盐辣椒新品种的选育和合理种植提供参考,采用单因素试验方法研究不同浓度NaCl胁迫对宇航四号朝天椒种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:1)低浓度(≤100mmol/L)NaCl溶液对宇航四号朝天椒种子萌发和幼苗生长具有促进作用,高浓度(≥200mmol/L)则显著抑制种子萌发和幼苗生长。其中,100mmol/L NaCl溶液处理种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数及幼苗鲜重等指标分别较CK(去离子水)提高13.67%、34.00%、30.07%、0.69和6.05mg;250mmol/L NaCl溶液处理种子的各指标分别较CK降低2.33%、60%、27.57%、1.13和22.45mg。2)处理14d后,幼苗丙二醛、可溶性糖及脯氨酸含量均有不同程度的升高,100 mmol/L NaCl溶液处理幼苗的各指标较CK分别提高1.02μmol/g、7.61mg/g和7.19μg/g。在生产中,低浓度NaCl溶液(≤100mmol/L)不仅可以促进种子萌发,提高发芽率,还可以促进幼苗保持较好的生长状态。
- 秦娟王勇军张云奉杨俊年胡廷章
- 关键词：辣椒盐胁迫种子幼苗
- OsLEA2对乳酸脱氢酶的保护分析
- 2014年
- 在大肠杆菌DL21中表达胚胎发育后期丰富蛋白基因Os LEA2,用Hi TrapTMchelating HP层析柱纯化得到了Os LEA2蛋白。研究表明,高温会使乳酸脱氢酶的活性降低,高温处理时间的延长会增加对乳酸脱氢酶的损害;干燥脱水5 h后,乳酸脱氢酶活性几乎全部失活,其活性仅仅是未处理的3.06%;反复冻融也会降低乳酸脱氢酶的活性。在高温、脱水和冻融胁迫下,Os LEA2的加入能保护乳酸脱氢酶;随着Os LEA2的增加,乳酸脱氢酶的活性增加。因此,Os LEA2蛋白对乳酸脱氢酶具有保护作用,能减少高温、脱水和冻融对乳酸脱氢酶的损伤。
- 胡廷章黄小云杨俊年陈再刚
- 关键词：OS乳酸脱氢酶
- 番茄转录因子基因SlYAB2a的克隆、表达及亚细胞定位分析
- 2016年
- 为了研究番茄SlYAB2a基因的功能及其在番茄生长发育中的分子机理,以番茄的cDNA为模板,利用RTPCR技术从番茄中克隆到SlYAB2a基因,该基因编码的蛋白质由192个氨基酸残基组成,蛋白质的分子量为21.35k Da,等电点是8.79,平均亲水系数是-0.487。SlYAB2a蛋白质的6～165位氨基酸残基形成Pfam：YABBY结构域,在20～47位有1个C2C2锌指结构域,在122～181位有1个螺旋-环-螺旋结构域。二级结构分析表明SlYAB2a蛋白分子中,α-螺旋占19.79%、β-折叠占14.06%、其余66.15%为不规则卷曲。蛋白多序列比对表明SlYAB2a与马铃薯、林烟草、酿酒葡萄、大豆、拟南芥、甘蓝型油菜、花药野生稻、玉米和小麦YABBY2的一致性分别为98%,78%,71%,65%,64%,64%,58%,57%,57%,说明SlYAB2a蛋白与来源于双子叶植物的YABBY2一致性较高,而与来源于单子叶植物的一致性较低。通过聚类分析发现YABBY2蛋白明显分为单子叶和双子叶2个亚类,SlYAB2a蛋白属于双子叶亚类,与马铃薯、潘那利番茄、绒毛状烟草、林烟草等的YABBY2蛋白序列亲缘关系较近。实时定量RT-PCR分析结果表明,在番茄植物的不同生长发育时期,根、茎、叶、花、果实中,都有SlYAB2a基因表达;并且在花和青熟果实中,SlYAB2a基因表达水平远远高于其他组织。说明SlYAB2a基因在花和果实的发育过程中起着重要作用。洋葱表皮细胞瞬时表达结果表明SlYAB2a蛋白定位于细胞核中。
- 胡廷章秦娟陈再刚黄小云
- 关键词：番茄基因克隆亚细胞定位
- 水稻OsLEA5c基因的克隆、表达和抗逆性分析被引量：3
- 2014年
- 为了研究水稻胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA5c 的抗逆性，利用 RT PCR技术从水稻中克隆到OsLEA5c的 cDNA。序列分析表明，OsLEA5c基因的读码框为456 bp，编码1个由151个氨基酸残基组成的蛋白。蛋白分子量为16.55 kD，等电点为5.07。OsLEA5c蛋白的平均亲水系数（GRAVY）为0.020，为疏水蛋白。OsLEA5c蛋白的44－140位氨基酸残基形成 LEA_2结构域。进化树分析表明，OsLEA5 c属于第5组LEA蛋白的C亚组。OsLEA5 c与5 C亚组LEA蛋白的氨基酸一致性为45.14％～61.59％。利用基因重组技术构建的原核表达载体 pET32a Os-LEA5c，转化到E．coli BL21 pLysS菌株中，诱导得到34 kD的融合蛋白。OsLEA5c在大肠杆菌中的表达增加了大肠杆菌对高温、高盐、高渗透压和反复冻融的抗性。OsLEA5c 基因在水稻抗逆和种子成熟脱水过程中发挥重要作用。
- 胡廷章杨俊年周大祥黄小云陈再刚
- 关键词：水稻抗逆性ORYZASATIVA
- 辣椒COI1.2基因的克隆、表达分析和植物表达载体的构建
- 2014年
- 利用RT-PCR技术,通过同源克隆从辣椒中分离到CaCOI1.2基因,采用生物学软件对序列进行生物信息学分析,采用实时定量RT-PCR技术分析基因的表达模式.结果表明：克隆到的CaCOI1.2基因长度为2041 bp,推测其读码框大小为1812 bp,编码603个氨基酸.在CaCOI1.2蛋白质N-端有一个F-box结构域,C-端有6个富含亮氨酸结构域.CaCOI1.2蛋白的氨基酸与巳知其他植物COI1蛋白序列有53.03 ％～93.37％的一致性.聚类分析结果显示：CaCOI1.2与番茄、烟草和葡萄等双子叶植物的亲缘关系较近,而和水稻、玉米、高粱等单子叶植物的亲缘关系较远.CaCOI1.2在辣椒的不同生长发育时期的组织中都能表达,在花和青熟期果实中表达水平较高,表明CaCOI1.2在花和果实的发育过程中起重要作用.构建植物表达载体pBI121-CaCOI1.2,并导入根癌农杆菌LBA4404中,得到植物转化工程菌,这为下一步用于辣椒等作物的转基因操作、研究CaCOI1.2基因在植物中的功能奠定了基础.
- 黄小云陈再刚杨俊年胡廷章
- 关键词：辣椒基因克隆基因表达
