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广西壮族自治区卫生厅重点科研课题(00971)
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相关作者:
耿芳芳
罗小玲
刘爱群
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葛莲英
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相关机构:
广西医科大学附属肿瘤医院
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发文基金:
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RNA干扰沉默人端粒酶逆转录酶基因治疗大肠癌移植瘤
2012年
目的观察重组质粒pGPU6/绿色荧光蛋白(GFP)/Neo-人端粒酶逆转录酶(hTERT)短发卡RNA(shRNA)对SW480细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法将大肠癌SW480细胞(约5×10^7个)接种于裸鼠,成瘤后将裸鼠分3组,每组8只,瘤体内分别注射20μg pGPU6/GFP/Neo—hTERTshRNA(实验组)、20I-LgpGPU6/GFP/Neo—NCshRNA(阴性对照组)、100μl生理盐水(空白对照组)。观察各组裸鼠体内瘤体生长速度,绘制肿瘤生长曲线,采用聚合酶链反应(PCR)、免疫组织化学技术测定肿瘤组织hTERT表达水平,PCR-端粒重复扩增程序(TRAP)-酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测端粒酶活性,原位末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡。结果实验组较其他对照组裸鼠移植瘤生长缓慢,hTERTmRNA的相对表达量为0.388±0.093,hTERT蛋白表达的平均灰度值为171.42±30.94,表达水平均明显低于其他对照组(P〈0.05);实验组端粒酶活性吸光度(A)值A450-A630为0.484±0.359,较其他对照组明显降低(P〈0.05或P〈0.01);凋亡指数为(36.30±5.05)%,较其他对照组明显降低(P〈0.01)。结论靶向hTERT基因的shRNA瘤内注射能延缓大肠癌细胞SW480裸鼠皮下移植瘤的生长,其机制可能是通过抑制hTERT mRNA和蛋白的表达,抑制端粒酶的活性,促进肿瘤细胞凋亡而发挥作用。
葛莲英
刘爱群
罗小玲
蔡艳玲
耿芳芳
关键词:
RNA干扰
端粒酶逆转录酶
移植瘤
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