国家自然科学基金(81000708)
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 相关作者：李擎天郭晓奎黄洁雯谭红略宋珍更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海交通大学上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人β防御素3与抗生素联用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌N315的抑制作用被引量：2
- 2014年
- 目的分析抗菌肽人β防御素3(h BD3)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌N315株的抑制作用。方法合成抗菌肽h BD3,分别通过最低抑菌浓度(MIC)检测、直接杀菌试验、重要功能基因检测分析其对N315株的直接抑制作用,并观察对抗生素MIC的影响。结果 h BD3对N315株的MIC为8μg/m L;在浓度达到2μg/m L时即有明显杀菌作用。h BD3上调N315株的agr基因表达,下调ica A基因表达。在联用5μg/m L的h BD3后,青霉素、头孢拉定、万古霉素、头孢呋辛、氯霉素的MIC值均有降低。结论抗菌肽h BD3对MRSA N315株有显著的抑制作用,有望将其与抗生素联用可抑制抗生素耐药性的扩散。
- 冯春燕潘红英黄洁雯李国强李擎天
- 关键词：人Β防御素3耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抑菌试验
- 壳聚糖季铵盐对肺炎克雷伯菌的体外抑菌作用
- 2012年
- 目的探讨壳聚糖季铵盐对肺炎克雷伯菌的体外抑菌作用。方法以梯度稀释涂布平板法检测壳聚糖和壳聚糖季铵盐对肺炎克雷伯菌的直接抑菌作用;采用Real-Time PCR技术检测肺炎克雷伯菌生物膜形成相关的重要基因lsrR、lsrK和gmd的表达;并以结晶紫染色法检测肺炎克雷伯菌的生物膜形成情况。结果干预后6 h时点开始,壳聚糖和壳聚糖季铵盐孔的存活菌计数均显著降低(P<0.05);干预后12 h壳聚糖季铵盐孔的存活菌计数显著低于壳聚糖组,壳聚糖季铵盐和壳聚糖对待检肺炎克雷伯菌的12 h抑菌率分别为(72.6±8.0)%和(50.2±9.3)%(P<0.05)。壳聚糖和壳聚糖季铵盐均能上调lsrR基因表达;壳聚糖季铵盐使lsrK基因表达下调,gmd基因表达也有下调趋势。从干预后6 h开始,壳聚糖和壳聚糖季铵盐对肺炎克雷伯菌的生物膜形成都有显著抑制作用,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);但壳聚糖组与壳聚糖季铵盐组之间比较差异并无统计学意义(P>0.05)。结论壳聚糖和壳聚糖季铵盐能够有效抑制肺炎克雷伯菌增殖及生物膜形成。壳聚糖季铵盐的抑菌能力强于壳聚糖,同时可影响肺炎克雷伯菌生物膜形成相关的多个基因的表达。
- 黄洁雯陈志俊沈隽霏董思聪李擎天谭红略郭晓奎董珂
- 关键词：壳聚糖壳聚糖季铵盐肺炎克雷伯菌抑菌试验生物膜形成
- 抗菌肽人β防御素3对铜绿假单胞菌PAO-1株的抑制作用
- 2014年
- 目的:分析抗菌肽人β防御素3(humanβdefensin 3,hBD3)对铜绿假单胞菌PAO-1株的抑制作用。方法:合成抗菌肽hBD3,分别通过最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)检测、直接杀菌试验、重要功能基因检测分析其对PAO-1的直接抑制作用;并将其与阿奇霉素、四环素、利福平、氯霉素、链霉素、环丙沙星联合施用,观察对抗生素MIC的影响。结果:HBD3对PAO-1的MIC为32μg/mL;在浓度达到8μg/mL时即有明显杀菌作用。HBD3上调PAO-1株的ahpF基因表达,下调aprA和rhlR基因表达。在联用5μg/mL的hBD3后,四环素、利福平、氯霉素、链霉素、环丙沙星的MIC值均有降低。结论:抗菌肽hBD3对铜绿假单胞菌PAO-1株有显著的抑制作用。
- 宋珍李镛阴振晨李擎天
- 关键词：抗菌肽人Β防御素3铜绿假单胞菌抑菌试验
- 壳聚糖及其季铵盐对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨壳聚糖(CHI)及其衍生物可能具有的广谱抗菌作用。方法采用CHI、壳聚糖季铵盐(QCHI)进行铜绿假单胞菌体外抑菌试验。采用CHI和QCHI分别作用0、3、6、9、12 h,每个时间点取1 mL菌液进行菌落计数并与对照孔比较,同时抽提铜绿假单胞菌RNA,扩增其ahpF、pa3187、aprA和rpoS基因,并检测各基因表达水平;剩余铜绿假单胞菌用LB培养基培养3 d,PBS缓冲液冲洗浮游细菌,结晶紫染色,95%乙醇脱色后用酶标仪570 nm检测并比较铜绿假单胞菌生物膜的形成能力。结果与对照孔比较,自6 h起CHI和QCHI孔的存活菌量即有明显差异(P<0.05);但CHI孔和QCHI孔之间差异无统计学意义。CHI和QCHI均可使铜绿假单胞菌pa3187基因表达上调,aprA基因表达下调;QCHI可使ahpF基因表达下调,而CHI可使ahpF基因表达上调;QCHI对rpoS基因的表达有下调趋势。从6 h起,CHI和QCHI对铜绿假单胞菌生物膜的形成均有明显的抑制作用。结论 CHI及QCHI能在一定程度上抑制铜绿假单胞菌的增殖及其生物膜的形成。
- 林萍赵雨璠吴悦张骁郭晓奎谭红略李擎天孙阳
- 关键词：壳聚糖壳聚糖季铵盐铜绿假单胞菌抑菌试验生物膜形成
- 抗菌肽人β防御素3融合糖类结合域对葡萄球菌的抑制作用
- 2014年
- 目的探讨抗菌肽人β防御素3融合糖类结合域(hBD3-CBD)对金黄色葡萄球菌N315、表皮葡萄球菌35984的抑制作用。方法以直接杀伤和分子生物学方法检测hBD3-CBD对金黄色葡萄球菌N315和表皮葡萄球菌35984菌株的抑制作用以及对细菌关键基因表达的影响。结果直接杀菌作用显示,抗菌肽hBD3以及hBD3-CBD对金黄色葡萄球菌N315、表皮葡萄球菌35984均有显著的抑制作用;hBD3-CBD的抑制作用强于hBD3;hBD3-CBD抑制作用的稳定性亦强于hBD3。在金黄色葡萄球菌N315、表皮葡萄球菌35984的关键基因表达检测中,hBD3-CBD对葡萄球菌的agr和mecA基因表达有显著抑制作用,还抑制表皮葡萄球菌icaA基因的表达和促进icaR基因表达,这说明hBD3-CBD能够抑制表皮葡萄球菌的生物膜形成。结论抗菌肽的融合策略对于改善抗菌肽的抑菌效能意义重大,并为其未来的应用带来更多希望。
- 黄洁雯郭晓奎李擎天
- 关键词：抗菌肽
- 抗菌肽人β防御素3融合糖类结合域的真核表达和对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌N315的抑菌作用
- 2014年
- 目的:研究重组真核抗菌肽人β防御素3-糖类结合域(humanβdefensin 3-carbohydrate-bindingdomain,hBD3-CBD)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)N315的抑菌作用。方法:用重叠延伸剪接技术将抗菌肽和融合抗菌肽hBD3、hBD3-CBD1、hBD3-CBD2的基因序列克隆入真核表达载体pVAX1并转染HEK293T细胞,通过逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot方法检测其表达情况;并通过感染后细菌计数和上清液白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)浓度来检测抗菌肽转染HEK293T细胞对MRSA N315的抑制作用。结果:抗菌肽hBD3、hBD3-CBD1、hBD3-CBD2转染HEK293T细胞后均有表达;感染后6和12小时,hBD3、hBD3-CBD1和hBD3-CBD2均显示出对MRSA N315的抑菌作用;感染后12小时,hBD3-CBD1和hBD3-CBD2的抑菌作用优于hBD3,hBD3-CBD1和hBD3-CBD2之间的抑菌作用没有差异;感染后6和12小时,hBD3、hBD3-CBD1、hBD3-CBD2的细胞上清液IL-6浓度显著低于对照组,而hBD3-CBD1和hBD3-CBD2两组之间的IL-6浓度未见差异。结论:真核表达抗菌肽hBD3、hBD3-CBD对MRSA N315对HEK293T细胞的感染有显著抑制作用,且重组抗菌肽hBD3-CBD的直接抑菌作用优于hBD3。
- 黄洁雯宋珍郭晓奎李擎天
- 关键词：抑菌作用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗菌肽真核表达
