河南省科技攻关计划(0123011700)
- 作品数:3 被引量:20H指数:3
- 相关作者:马向东陈红歌贾新成任随周顾溯海更多>>
- 相关机构:河南农业大学南京农业大学湖北大学更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- α-淀粉酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究被引量:5
- 2006年
- 以克隆自野油菜黄单胞菌的α-淀粉酶基因质粒(pHN8004)为模板,通过PCR方法将α-淀粉酶基因克隆到毕赤酵母表达载体pHBM905A中,转化毕赤酵母GS115.利用甲醇对重组毕赤酵母GS115(pHBM905AM1)进行诱导,实现了表达.培养温度为28℃,用体积分数为1.0%的甲醇诱导,第7天分泌表达的α-淀粉酶酶活性最高,为1 081 U.mL-1,该酶的最适反应温度和最适反应pH值分别为50℃和5.9.
- 崔锦柯涛马向东
- 关键词:Α-淀粉酶基因毕赤酵母酶学性质最适温度最适PH值
- 地衣芽孢杆菌WB-11菌株耐高温α-淀粉酶的酶学特性被引量:12
- 2004年
- 从地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis )中分离到一α 淀粉酶组分 ,经PAGE及SDS PAGE检测为电泳均一的纯酶蛋白。该酶最适反应温度为 95℃ ,5 0和 70℃条件下酶活性稳定 ,90℃保温 30min残余酶活力为 2 8 9%。该酶最适作用pH为 6 0~ 6 5 ,在pH 5 0~ 8 0内稳定。酶的相对分子质量为 6 5 90 0 ,等电点 6 94 ,对可溶性淀粉的Km 值为 0 4 1mg·mL-1 。Ca2 + 、Mn2 + 、Cu2 + 、Co2 + 及Ba2 + 对酶具有激活作用 ,其中Ca2 + 激活作用最显著 ,且以 4~ 8mmol·L-1 浓度为最适。Ca2 + 还能显著提高酶的热稳定性 ,4mmol·L-1 Ca2 + ,90℃保温 30min ,酶的残余活力提高至 83%。
- 陈红歌顾溯海任随周马向东贾新成
- 关键词:地衣芽孢杆菌耐高温Α-淀粉酶酶学特性
- 黄单胞菌α-淀粉酶基因的克隆、测序及表达探讨被引量:3
- 2004年
- 用鸟枪法构建了野油菜黄单胞菌(Xanthomonascampestrispv.campestris)8004的基因组文库,经LBSP法筛选,得到了含α 淀粉酶基因的基因片段,SDS PAGE凝胶电泳确定其蛋白质分子量约为45kd;经测序后,分析其序列结构并翻译成氨基酸序列.
- 成庆利李艳霞陈红歌贾新成马向东
- 关键词:黄单胞菌Α-淀粉酶基因克隆基因表达