中西医结合科研计划课题(2005088)
- 作品数：11 被引量：200H指数：8
- 相关作者：李银平武子霞姚咏明于燕吴瑶更多>>
- 相关机构：天津市天和医院天津中医药大学中国人民解放军总医院第一附属医院更多>>
- 发文基金：中西医结合科研计划课题天津市现代中药大品种群系统开发项目国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 脂多糖诱导大鼠主动脉内皮细胞蛋白C受体和蛋白酶活化受体1的表达及血必净注射液的干预作用被引量：9
- 2009年
- 目的观察脂多糖（LPS）诱导的大鼠主动脉内皮细胞蛋白C受体（EPCR）和蛋白酶活化受体1（PAR1）的表达，并探讨血必净注射液对其的干预作用。方法采用组织贴块法培养Wistar大鼠主动脉内皮细胞，培养1周后用流式细胞仪鉴定内皮细胞纯度。按1：3传代至3～4代时，随机将细胞分为空白对照组、LPS刺激组（1mg／L）、血必净干预组（LPS1mg／L，血必净注射液10g／L），活化蛋白C（APC）干预组（LPS1mg／L，APC0．1mg／L）。分别在12、24、48、72h采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）测定内皮细胞EPCR和PAR1的mRNA表达；用流式细胞仪检测EPCR和PAR1的蛋白表达。结果12h时各组间EPCR和PAR1蛋白表达水平比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）；LPS刺激组EPCR和PARlmRNA表达则均降低，APC和血必净干预后两值均升高（P〈0．05或P〈0．01）。24-72hLPS刺激组EPCR的mRNA和蛋白表达水平均明显低于空白对照组（P〈0．05或P〈0．01），EPCR的表达随LPS作用时间延长而减少，呈明显的负相关；而血必净干预组EPCR表达明显高于LPS刺激组（P均〈0．01）。LPS刺激组PAR1的mRNA和蛋白表达水平较空白对照组有所降低（P〈0．05或P〈0．01），用血必净干预后，PAR1的mRNA和蛋白表达水平有所增加（P均〈0．01）。与APC干预组比较，血必净干预组EPCR和PAR1的蛋白表达增加更为明显。结论血必净注射液能从基因和蛋白水平增加由LPS诱导大鼠主动脉EPCR和PAR1的表达作用，可能与其保护内皮细胞的功能抑制其凋亡有关。
- 郑贵军武子霞李银平姚咏明
- 关键词：脂多糖主动脉内皮细胞内皮细胞蛋白C受体血必净注射液
- 活化蛋白C对脂多糖诱导大鼠主动脉内皮细胞表达血管性血友病因子及其裂解酶的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨活化蛋白C（APC）对脂多糖（LPS）诱导大鼠主动脉内皮细胞（RAECs）血管性血友病因子抗原（vWFAg）及其裂解酶（ADAMTS-13）蛋白表达的影响。方法采用组织贴块法培养Wist~大鼠的RAECs，1周后传代至第4．5代用于实验。将细胞分为对照组、LPS刺激组（1mg／L）以及APC干预组（在LPS刺激后分别加入终浓度为0．1、1、10mg／L的APC）；分别于12、24、48、72h采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定RAECs培养上清液中vWFAg和ADAMTS-13蛋白的表达水平。结果对照组仅有少量的vWFAg和ADAMTS-13蛋白表达。随LPS刺激时间延长，vWFAg表达12h即明显增多，48h达峰值[（285．45±30．13）％]，ADAMTS-13蛋白表达（μg／L）呈降低趋势，72h降至最低（13．32±2．37），与对照组[vWFAg：（94．53±7．83）％，ADAMTS-13：115．76±2．36]比较差异有统计学意义（均P〈0．01）。APC可逆转LPS刺激后对vwF她的促进作用和对ADAMTS-13的抑制作用，且剂量越大，逆转效果越明显。10mg／LAPC干预后可使LPS刺激48h时达峰值的vWFAg明显降低[（198．43±17．92）％比（285．45±30．13）％]，使LPS刺激72h时降至最低的ADAMTS-13（μg／L）明显升高（125．25±2．70比13．32±2．37），差异有统计学意义（均P〈0．01）。结论LPS刺激RAECs后vWFAg明显升高，ADAMTS-13蛋白表达明显降低，具有时间依赖性；用不同浓度APC干预后，随浓度增加和作用时间延长，vWFAg明显降低，ADAMTS-13蛋白表达明显升高，具有剂量依赖性和时间依赖性。
- 郑贵军武子霞朱海云殷冬梅孙茜李银平
- 关键词：主动脉内皮细胞活化蛋白C血管性血友病因子血管性血友病因子裂解酶
- 前凝血微粒与血管内环境的平衡被引量：6
- 2009年
- 血管细胞活化和凋亡时可释放前凝血微粒。微粒是动脉粥样硬化血栓形成的有害因子，来自循环的血小板、单核细胞或内皮的微粒水平与大多数心血管疾病危险因素相关，其水平升高预示着临床预后较差。此外，作为一个有价值的血管细胞损伤标志，微粒通过直接影响血管内皮或血液细胞，在动脉粥样硬化血栓形成过程中起关键作用。
- 殷冬梅孙茜李银平
- 脂多糖诱导大鼠主动脉内皮细胞表达血管性血友病因子裂解酶的研究被引量：3
- 2011年
- 目的从剂量～效应和时间一效应关系探讨脂多糖（LPS）对大鼠主动脉内皮细胞（RAECs）血管性血友病因子裂解酶（ADAMTS-13）mRNA和蛋白表达的影响。方法采用组织贴块法培养Wistar大鼠的RAECs，1周后按1：3传代至第4～5代，将细胞分为空白对照组和0．01、0．1、1、5μg／mlLPS刺激组，分别于12、24、48、72h用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测定内皮细胞ADAMTS-13mRNA表达；用酶联免疫吸附法（ELIsA）检测上清液内ADAMTS-13蛋白水平。结果空白对照组有一定量的ADAMTS～13mRNA和蛋白表达。随着LPS刺激浓度增加和刺激时间延长，ADAMTS-13mRNA和蛋白表达逐渐下降。与空白对照组（25．22±1．41）比较，0．01μg／mlLPS刺激48h时ADAMTS-13mRNA表达（18．78±0．86）即明显下降（P〈0．01）；0．1μg／ml和1μg／ml LPS刺激24h时ADAMTS-13 mTIRNA表达（23．43±0．63、22．41±0．76）即明显下降（P〈0．05和P〈0．01）；5μg／ml LPS刺激12h时ADAMTS-13 mRNA表达（20．01±2．47）即明显下降（P〈0．01）。与空白对照组[（115．76±2．36）ng／m13比较，0．01μg／mlLPS刺激12h时ADAMTS-13蛋白表达[（113．43±1．07）ng／m13即明显下降（P〈0．05）；至5ug／ml LPS刺激72h时ADAMTS-13蛋白表达[（7．63±2．64）ng／mB降至最低（P〈0．01）。结论RAECs有一定量的ADAMTS-13mRNA和蛋白表达；不同浓度LPS刺激内皮细胞不同时间后ADAMTS-13mRNA和蛋白表达降低，具有剂量依赖性和时间依赖性。
- 郑贵军殷冬梅武子霞孙茜朱海云李银平
- 关键词：脂多糖主动脉内皮细胞血管性血友病因子裂解酶
- 血必净注射液对脓毒症大鼠活化蛋白C及凝血功能的影响被引量：36
- 2008年
- 目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠活化蛋白C(APC)及其凝血功能的影响。方法采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型。清洁级雄性Wistar大鼠104只被随机分为正常对照组、假手术组、脓毒症模型组和血必净治疗组,各组按处死时间分为术后12、24、48、72 h 4个亚组,每组8只。除正常对照组外,其余各组分别于术后2 h给予生理盐水或血必净注射液(4 ml/kg)1次。各组在相应时间点处死8只动物,经腹主动脉取血,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆APC、血管性假血友病因子(vWF)和血管性假血友病裂解酶(ADAMTS-13)的含量;肝素抗凝测血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FBG)含量、血小板计数(PLT)等凝血功能指标。结果与正常对照组比较,脓毒症组血浆APC含量均有不同程度的下降(P<0.05或P<0.01);用血必净注射液治疗后,APC水平随时间延长逐渐升高。CLP后大鼠血浆vWF含量升高;用血必净注射液治疗后均有不同程度的降低,以12、24、48 h最为明显。CLP后大鼠ADAMTS-13含量在12 h略有升高(P<0.01),但随时间延长明显降低(P<0.05或P<0.01);用血必净注射液后能明显升高ADAMTS-13含量(P均<0.01)。CLP后,PT、APTT均有不同程度缩短,FBG含量降低,PLT减少;用血必净注射液后,凝血功能得到明显改善。结论血必净注射液能提高脓毒症大鼠血浆APC、ADAMTS-13水平,降低vWF含量,明显改善脓毒症大鼠的凝血功能。
- 李银平郑贵军武子霞姚咏明
- 关键词：血必净注射液脓毒症活化蛋白C凝血功能
- 微粒与脓毒症凝血功能紊乱被引量：9
- 2009年
- 脓毒症（sepsis）是感染因素所致的全身炎症反应综合征（SIRS），进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障碍综合征（MODS）。业已证明，脓毒症主要是由炎症反应、凝血活化及纤溶抑制相互作用形成的级联反应过程，其中凝血活化是脓毒症发病的重要环节。微粒作为循环在外周血中微小的膜结合小囊泡，在血栓形成、炎症和血管应激病变中起着积极的作用。新近研究发现，微粒也参与了脓毒症凝血功能紊乱的发生发展。现就微粒的来源、生物学特性及其与脓毒症凝血功能紊乱的关系进行综述。
- 殷冬梅李银平
- 关键词：脓毒症微粒凝血功能紊乱
- 血必净注射液对脓毒症大鼠组织肿瘤坏死因子-α及凝血功能的影响被引量：82
- 2007年
- 目的：探讨血必净注射液对脓毒症大鼠凝血功能及组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法：采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症动物模型。96只健康Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组和血必净治疗组，后两组分别于CLP后0．5、12、24、36、48和60h经大鼠阴茎背静脉注射生理盐水或血必净注射液4ml／kg，分别于CLP后2、8、24、48和72h5个时间点各处死8只动物。各组大鼠取腹主动脉血检测血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）及纤维蛋白原（Fbg）含量；取肝、肺组织测定TNF-α蛋白水平。结果：CLP后2h模型组动物肝、肺组织TNF-α蛋白水平迅速升高（P均〈0．01），8h达到高峰，分别为正常对照组的2．57倍（P〈0．01）和4．77倍（P〈0．01）。血必净注射液治疗后可显著降低肝、肺组织TNF-α蛋白水平（P〈0．05或P〈0．01），于CLP后24h均恢复至伤前正常范围。模型组CLP后2～72h。PT、APTT有不同程度的缩短，血浆Fbg水平显著降低（P〈0．05或P〈0．01）；血必净治疗组CLP后2～24hPT、APTT均较模型组明显延长（P〈0．05或P〈0．01），血浆Fbg含量回升。结论：血必净注射液可显著降低脓毒痒大鼠组织TNF-α蛋白水平，防止凝血功能异常，从而有效防止脓毒症的发生发展。
- 李银平乔佑杰武子霞姚咏明于燕吴瑶
- 关键词：脓毒症血必净注射液肿瘤坏死因子-Α凝血功能
- 血必净注射液对脓毒症大鼠血栓调节蛋白及内皮蛋白C受体基因表达的影响被引量：17
- 2007年
- 目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠血栓调节蛋白（TM）及内皮蛋白C受体（EPCR）基因表达的影响。方法采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型。将96只健康Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组和血必净治疗组,后两组又按处死时间分为术后2、8、24、48和72h亚组,每组8只。留取肝、肺组织,分别检查各组动物组织TM和EPCR的mRNA表达。结果正常对照组和假手术组肝、肺组织TM和EPCR的mRNA有一定表达。CLP后2h肝、肺组织TM和EPCR的mRNA表达无明显变化（P均〉0.05）,8～48h肝、肺组织TM和EPCR的mRNA表达均有不同程度的增强（P均〈0.01）,至伤后72h基本恢复到术前水平（P均〉0.05）;与模型组比较,血必净治疗组CLP后8h和24h组织TM和EPCR的mRNA表达均有不同程度下降,48h和72h的基因表达有不同程度提高。结论血必净注射液可以从基因水平影响脓毒症动物组织TM及EPCR的基因表达。
- 李银平乔佑杰武子霞钱芳芳姚咏明于燕吴瑶
- 关键词：脓毒症血必净注射液血栓调节蛋白内皮蛋白C受体
- 血必净注射液对脓毒症大鼠器官功能及死亡率的影响被引量：27
- 2007年
- [目的]观察血必净注射液对脓毒症大鼠多器官功能及死亡率的影响。[方法]采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)模型。雄性Wistar大鼠96只按随机数字表法分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=8)、模型对照组(n=40),血必净治疗组(n=40),后两组按观察时间点分为2、8、24、48和72 h亚组。另设实验观察血必净注射液对脓毒症大鼠的治疗效果,观察CLP术后7 d存活率。[结果]血必净治疗组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)及心肌型肌酸激酶同功酶(CK-MB)水平呈不同程度降低;与模型未治疗组比较,血必净治疗组及联合治疗组动物死亡率显著降低。[结论]血必净注射液能够明显降低脓毒症大鼠的死亡率,并对重要器官功能具有保护作用。
- 武子霞李银平乔佑杰姚咏明于燕吴瑶
- 关键词：血必净注射液脓毒症盲肠结扎穿孔器官功能死亡率
- 血必净注射液对脓毒症大鼠蛋白C及肿瘤坏死因子基因表达的影响被引量：33
- 2007年
- 目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠蛋白C（PC）及肿瘤坏死因子-α（TNF—α）基因表达的影响。方法将96只健康Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组和血必净治疗组，后两组又按处死时间分为术后2、8、24、48和72h亚组，每组8只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型。取腹主动脉血进行血小板计数，并留取肝、肺组织分别检测各组动物组织PC和TNF—α的mRNA表达。结果CLP后8～72h模型组大鼠肝组织PC mRNA表达显著下调（P均〈0．01），血必净注射液可显著提高脓毒症大鼠PC mRNA表达水平（P均〈0．01）。CLP后2h模型组动物肝、肺组织TNF—α mRNA表达均迅速升高并持续至伤后24h（P〈0．05或P〈0．01）；血必净注射液治疗可显著降低肝、肺组织TNF—α mRNA水平（P〈0．05或P〈0．01），术后24h均恢复至伤前正常范围。模型组动物CLP后8～72h血小板计数不同程度减少，血必净治疗组较模型组能明显提高血小板计数（P〈0．05或P〈0．01）。结论血必净注射液可以从基因水平影响脓毒症动物组织PC和TNF—α的mRNA表达。
- 李银平乔佑杰武子霞钱芳芳姚咏明于燕吴瑶
- 关键词：脓毒症血必净注射液蛋白C肿瘤坏死因子
