国家自然科学基金(81000723)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 相关作者：张传福宋宏彬史云刘雪林戚丽华更多>>
- 相关机构：军事医学科学院解放军531医院北京农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- H7N9病毒的M1基因序列分析及原核表达被引量：1
- 2015年
- 目的 克隆H7N9禽流感病毒M1并在原核细胞中表达,为进一步研究其生物学特性、免疫学功能及血清学检测奠定基础。方法 用PCR方法从禽流感上海分离株A/Shanghai/4664T/2013（H7N9）c DNA扩增M1基因,并克隆到载体p MD18-T中。经测序证实后,用EcoRⅠ/NdeⅠ双酶切,亚克隆到原核表达载体p ET28a,并转化E.coli BL21（DE3）菌株。取工程菌,用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE鉴定及western blot检验。结果 （1）经PCR、测序和酶切鉴定,成功克隆了禽流感H7N9 M1基因;（2）经IPTG诱导的重组质粒p ET28a-M1表达出约为28 k Da的融合蛋白,与预期结果相符;（3）对H7N9型禽流感M1基因序列分析表明,与2013年暴发的H7N9型禽流感病毒M1基因核苷酸序列同源性在95.4%-100%,与2006-2011年间暴发的H7N9型流感病毒M1基因序列同源性在69.0%-89.6%,2013年感染人的H7N9型流感病毒与此前暴发的该型流感分离株属于不同的进化分支。结论 成功克隆了禽流感H7N9病毒的M1基因,并在E.coli中得以表达。
- 娄文静张道军史云戚丽华靳连群刘雪林宋宏彬张传福
- 关键词：流感病毒原核表达
- 流感病毒的检测和分型技术研究进展被引量：3
- 2011年
- 近年来,病毒性流感的不断流行和暴发已引起世界范围的广泛关注。为了更好地对流感病毒进行检测和分型,我们对目前流感病毒常用的血清学检测和分型方法、免疫荧光法、PCR方法、多重RT-PCR法、实时RT-PCR法、依赖核酸序列的扩增法、环介导等温扩增法、焦磷酸测序法、基因芯片技术分别进行了描述,并阐述了其优缺点。
- 薛文仲张斌王中强陈琛张传福孙岩松宋宏彬
- 关键词：流感病毒
- SmartAmp快速检测技术及其应用被引量：4
- 2013年
- SmartAmp是一种新的DNA等温扩增技术,具有操作简单、快速、成本低、灵敏度高、特异性强、背景低等优点。目前已在临床基因多态性检测、感染性疾病诊断等方面初步应用,为临床快速诊断提供了帮助,在食品和环境中病原体检测领域也显示了极大的应用发展潜力。我们简要概述SmartAmp技术原理、特点及其应用前景。
- 戚丽华张传福史云胡晓丰宋宏彬刘雪林
- 关键词：基因多态性病原体检测
- 补体激活在流感病毒介导的肺部炎性损伤中的作用及眼镜蛇毒因子干预的实验研究被引量：2
- 2016年
- 目的揭示流感病毒介导的小鼠肺部炎性损伤机制,为研发治疗病毒性肺炎的有效药物提供理论和技术依据。方法建立流感PR8感染小鼠动物模型,利用实时荧光定量PCR、ELISA、病理切片等方法检测小鼠肺部炎症因子、补体分子及病理变化;按照50μg/(kg·24 h)的剂量腹腔注射眼镜蛇毒因子(CVF),监测小鼠体质量、存活率、炎症因子等变化。结果与对照组相比,PR8流感模型组小鼠肺组织中补体调节分子Crry、CD59表达显著下降(P<0.01),补体分子C9和补体成分受体C3aR、C5aR表达显著升高(P<0.01),血清中促炎因子TNF-α、IL-6、IFN-γ高表达,抗炎因子IL-2低表达(P<0.05);经CVF药物干预后,小鼠体质量下降缓慢,存活率升高,肺指数降低(P<0.05),抗炎因子IL-2表达明显升高(P<0.05),促炎因子IL-6、TNF-α、INF-γ表达显著下降。结论补体激活参与了流感病毒介导的肺部炎性损伤;通过CVF干预,抑制了补体激活,可提高感染小鼠存活率,降低肺指数,延缓病程。
- 赵希捷周丽娟李桂萍史云郭瑞霞杨佐军贾雷立刘雪林宋宏彬张传福
- 关键词：流感病毒补体眼镜蛇毒因子
