国家林业局948项目(2008-Z20) 作品数:8 被引量:37 H指数:4 相关作者: 贾银锁 马春红 李运朝 崔四平 董文琦 更多>> 相关机构: 河北省农林科学院 石家庄市疾病预防控制中心 中国科学院遗传与发育生物学研究所 更多>> 发文基金: 引进国际先进农业科技计划 河北省自然科学基金 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
玉米小斑病菌C小种毒素诱导玉米离体根冠细胞凋亡的检测 被引量:10 2010年 将玉米同核异质体不育细胞质CB37及其正常保持系NB37的离体根冠细胞分为4组,其中3组分别用质量浓度50μg/mL、100μg/mL和150μg/mL的玉米小斑病菌C小种(HMC)毒素诱导,1组用pH6.5PBS诱导作为对照,诱导时间分别为1h、4h和7h。然后采用中性红与伊文思蓝染色、吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)复染和Hoechst33258染色3种方法检测玉米根冠细胞的凋亡状况。结果表明:HMC毒素诱导玉米根冠细胞发生凋亡,并出现凋亡小体与染色体边集形态特征。中性红与伊文思蓝染色,只能检测出活细胞和死细胞,且在3种毒素浓度、3种处理时间下,CB37的根冠细胞死亡率均高于NB37;采用AO与EB复染方法,用150μg/mLHMC毒素处理7h时,CB37细胞凋亡率达到最高值70.2%,而NB37仅为36.7%;经Hoechst33258染色后,CB37用150μg/mLHMC毒素处理7h时达到最大凋亡率为74.5%,而NB37为30.7%。专效性HMC毒素对C细胞质敏感,在毒素伤害细胞致死过程中,C细胞质的细胞死亡率远高于N细胞质;在诱导细胞凋亡程序中,C细胞质的细胞凋亡率也远高于N细胞质,且其凋亡率随诱导质量浓度和诱导时间的增加而增加;AO、EB复染与Hoechst33258染色两者相比,细胞凋亡率接近,准确度均高,图像清晰,且费用相当,但前者可以区分早期和晚期凋亡细胞,而后者不能区分。 马春红 李秀丽 董文琦 李运朝 崔四平 贾银锁 王立安关键词:玉米小斑病菌C小种 毒素 细胞凋亡 玉米小斑病菌T小种毒素诱导对玉米叶片苯丙氨酸解氨酶活性的影响 被引量:9 2010年 分别采用低浓度玉米小斑病菌Hel minthospolium maydis T小种毒素(HMT毒素)和玉米小斑病菌T小种培养滤液中的提取蛋白及菌丝细胞壁的提取液,预处理不同玉米品种3叶期叶片后再接种高浓度HMT毒素,在无菌条件下培养5 d后测量叶片病斑大小,并测定玉米叶片内苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化。结果表明:只有纯化的低浓度HMT毒素能够作为激发子诱导玉米获得系统性广谱抗性,但不同玉米品种所需的最适合浓度有差异;TC103以质量浓度0.025μg/mL毒素预处理效果最好,PAL活性最高;TB37和TMo17 2个自交系,以质量浓度分别为0.025μg/mL和0.050μg/mL的毒素预处理效果最好。 马春红 翟彩霞 郑秋玲 董文琦 李运朝 崔四平 范尉尉 贾银锁关键词:毒素 激发子 苯丙氨酸解氨酶 南非优质蛋白玉米品种比较试验初报 被引量:4 2010年 对从南非引进的24份优质蛋白玉米材料进行了初步试种,并比较了配制的特征特性、植株性状、籽粒品质和产量。结果显示:(1)南非22号较对照农大108增产44.4%,差异达极显著水平,且株型紧凑、叶片上冲、株高1.9 m、健壮抗病、根系发达,籽粒粗蛋白质含量(达10.85%)和赖氨酸含量(达0.38%)均高于对照;南非9号增产37.5%,南非3号增产11.2%,但籽粒赖氨酸含量均低于对照。(2)在24个南非品种中,有14个品种籽粒赖氨酸含量高于农大108,其中,南非2号和5号含量达0.4%以上;南非22号和23号籽粒粗蛋白含量均高达10%以上。(3)南非品种普遍根系发达,茎秆坚韧抗倒;有的抗病、抗逆性强,有的植株高大,可能选育出优质青贮品种与种质资源。 马春红 李运朝 及增发 吴哲 崔四平 贾银锁关键词:优质蛋白玉米 生育期 抗病性 HMC毒素诱导Mo17叶片细胞凋亡的核酸电泳检测 玉米小斑病是世界普遍发生的严重病害之一。玉米雄性不育细胞质分为T、C、S 3个类型。1988年魏建昆等首次报道了中国存在寄主专化性玉米小斑病菌C小种,引起国内外高度重视。早期研究结果认为,寄主选择性毒素,亦称寄主专化性毒... 马春红 及增发 李晓煜 甄占萍 李秀丽 贾银锁关键词:细胞凋亡 琼脂糖凝胶电泳 文献传递 HMC毒素培养滤液对专化寄主玉米叶片诱导抗病性及相关酶的影响 被引量:9 2008年 【目的】研究HMC毒素培养滤液对玉米叶片诱导抗病性作用及抗病性相关酶的影响。【方法】以两对同核异质玉米自交系(B37和C103)为试材,采用离体叶片法检测不同稀释倍数的HMC毒素培养滤液对专化寄主玉米叶片的致病性,从中筛选适宜诱导的有效浓度,在诱导中和接种后两个阶段分别测定防御酶活性及与抗病性相关物质含量等生理指标。【结果】不同基因型与不同细胞质玉米都可以利用低浓度HMC毒素培养滤液诱导以增强其抗性;不同处理时期,植物抗病性相关酶活性呈现不同的动态变化;不同的诱导处理均导致抗病性反应的产生,对C细胞质的预处理效果好于N细胞质,且具有浓度效应。【结论】低浓度HMC毒素培养滤液预处理后,刺激了POD、PAL酶活性提高和MDA含量下降,以此来启动玉米本身的防卫系统,因钝化作用而抑制侵染,当再接种高浓度HMC毒素培养滤液后,抗病性相关酶得到了进一步激活,使C细胞质玉米对HMC敏感性降低,从而玉米叶片呈现出抗病性。 商闯 贾银锁 马春红 董文琦 李运朝 崔四平 侯立白关键词:玉米小斑病菌C小种 毒素培养滤液 黄萎病菌毒素粗提液对棉花抗性酶的诱导 被引量:8 2008年 【目的】对黄萎病菌毒素滤液诱导棉花体内抗病性相关酶的研究,探索棉花黄萎病菌诱导抗性的生理机制。【方法】以4种浓度[病菌滤液原液(VD)、1﹕20、1﹕40、1﹕50]的黄萎病菌毒素液,在0、12、24、48、60、72 h预处理后,观察4~6叶龄棉苗叶和根的外部表现及发病情况,测定其植株形态的4~6片真叶萎蔫指标和体内相关抗性酶的变化。【结果】(1)不同浓度的毒素液浸泡棉根48 h后,1﹕20组,真叶萎蔫,子叶倒挂;1﹕40组,真叶轻度萎蔫,子叶萎蔫;1﹕50组,仅表现为子叶失水,1~2片真叶略显失水,大多数真叶完好;而VD对照组表现为3级危害,严重萎蔫。当毒素液浓度降至1﹕50时,预处理棉苗72 h,虽子叶下垂,但真叶完好,对照全株萎蔫;再接高浓度毒素液48 h后,子叶倒挂,真叶开始失水,但对照子叶脱落,真叶严重失水且萎蔫。总之,1﹕50组对黄萎病的抵抗力均强于1﹕20与1﹕40组的预处理。(2)1﹕50预处理组不仅能降低棉株体内有害物质MDA的含量,例如预处理12 h达最低值0.536μmol.g-1,为同时刻对照2.055μmol.g-1的24%,显著差异;同时提高了体内抗性相关酶POD活性,例如预处理72 h活性高达11.94μg.mg-1.min-1,而对照在24 h后即已检测不出POD活性。SOD的活性也呈现较高水平且一直维持在相对较高水平。例如经预处理再接高浓度毒素液72 h后,SOD活性高达12.8μg.mg-1.min-1,而对照在24 h后也检测不出SOD活性。从而缓解了黄萎病菌毒素液对棉花的侵害,提高棉花的抗病性。【结论】适宜浓度(1﹕50)的黄萎病菌毒素液可以做为生物激发子成功地诱导棉花对黄萎病的系统获得抗性。 马春红 范尉尉 董文琦 李运朝 崔四平 贾银锁关键词:棉花 诱导系统抗性 棉花黄萎病 过氧化物酶 丙二醛 HMC毒素引起玉米根冠活细胞凋亡的荧光显微观察 被引量:2 2009年 采用根冠细胞测定法,以玉米小斑病菌C小种毒素(HMC-toxin)处理基因型为B37的同核异质体(Homo-caryon)雄不育C细胞质和正常N细胞质玉米的根冠离体细胞后,采用吖啶橙荧光染色,荧光显微镜下发现HMC毒素可引起细胞凋亡,C细胞质中的凋亡细胞,多于N细胞质中的凋亡细胞,在对照中未观察到凋亡现象。还记载了玉米根冠细胞凋亡的具体过程。 马春红 郑秋玲 董文琦 李秀丽 张红心 李运朝 商闯 范尉尉 贾银锁关键词:玉米小斑病菌C小种 毒素培养滤液 细胞凋亡 通过荧光显微与凝胶电泳相结合的检测方法观察玉米细胞之凋亡 本文拟对研究毒素与寄主间的互作关系,寄主抗病性与细胞凋亡率间的关系提供科研证据。利用一套同核异质的玉米材料B37的原生质体和叶片作为实验材料,用AO(吖啶橙)和EB(溴化乙锭)荧光染色及核酸电泳的方法,检测C毒素诱导后两... 马春红 李秀丽 董文琦 李运朝 张红心 王立安 贾银锁关键词:细胞凋亡 寄主抗病性 玉米新种质改良群体的细胞渗透势研究 被引量:1 2010年 采用2个与我国常用种质亲缘关系远的新优势种质群,即选用36份新种质合成了新的相互轮回选择的新优势群体(NRRSPⅠC0、NRRSPⅡC0)及常规的6个优势群,利用渗透势评价该群体,并与我国常用玉米种质类群进行比较,明确其适应环境的能力。结果表明:Tan-Hz C5抗旱性最强,Reid C2抗旱性最弱,新优势种质群NRRSPIC0和NRRSPⅡC0抗旱性趋于中间。 郑秋玲 马春红 董文琦 贾银锁 曾孟潜关键词:玉米 渗透势 玉米不同优势群粘滞度测定与分析 被引量:1 2010年 本研究选用符合育种目标要求,且与我国常用玉米种质亲缘关系远的新种质,即选用36份新种质合成了新的相互轮回选择的基础群体NRRSPⅠC0和NRRSPⅡC0,并利用细胞质量理化参数检测评价新群体,研究合成新群体与我国常用玉米种质类群的杂种优势关系,明确其利用途径。结果表明:Tan-Hz C5和NRRSP I C0细胞质粘滞度较高,其细胞质质量较好,而新优势群NRRSPⅡC0处于中等水平。试验结果:优势群的细胞质粘滞度大小顺序为Tan-Hz C5>NRRSP I C0>Luda>(NRRSPⅡC0=Reid C2)>PF C5>Lancaster C2>Pn6C4。表明,外来的新改良群体可在我国加以利用,并逐步改善我国玉米遗传基础狭窄的局面。 马春红 及增发 贾银锁 崔四平 吴哲 李运朝 曾孟潜关键词:玉米 种质资源创新