南方医科大学南方医院院长基金(2008B05)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 相关作者:郑磊曾方银王前龙燕更多>>
- 相关机构:南方医科大学南方医院广州市妇女儿童医疗中心更多>>
- 发文基金:南方医科大学南方医院院长基金广东省教育部产学研结合项目广东省自然科学基金更多>>
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- 光滑假丝酵母菌感染实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:1
- 2012年
- 目的:建立、优化快速检测临床标本中光滑假丝酵母菌的实时荧光定量PCR方法,并评价其临床应用价值。方法:以光滑假丝酵母菌ITSⅡ基因的一段高度保守序列为扩增靶序列,合成引物和探针,并与pMD19-T构建重组质粒作为标准品,建立检测光滑假丝酵母菌的实时定量荧光PCR方法。从线性范围、重复性、敏感性、特异性等4个方面对反应体系进行方法学评价。用建立的实时荧光定量PCR方法对1 042例临床标本(包括血液、尿液、痰液、胸水、支气管肺泡灌洗液)进行检测,并与真菌培养法进行比较。结果:建立的光滑假丝酵母菌实时荧光定量PCR方法的灵敏度可达10 CFU/ml;与人类基因组、细菌及其他真菌无交叉阳性反应。重复检测样本,其循环阈值的试验内及试验间变异系数均小于10%。用于临床标本检测时共检出96份阳性标本,与真菌培养法(检出93份阳性标本)的一致性好(Kappa值为0.925)。结论:实时荧光定量PCR方法检测光滑假丝酵母菌灵敏度高、特异性及重复性好;可直接用于各种临床标本中光滑假丝酵母菌的检测,能大大缩短报告时间,为临床诊断提供可靠依据。
- 龙燕郑磊曾方银王前
- 关键词:真菌光滑假丝酵母菌实时荧光定量PCR
- 热带假丝酵母菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及临床应用初步评价被引量:2
- 2012年
- 目的建立、优化快速检测临床标本中热带假丝酵母菌的实时荧光定量PCR方法 ,并对其临床应用进行初步评价。方法用自行设计的高效引物、探针检测5种临床标本中的热带假丝酵母菌,对该方法的敏感性、特异性进行评价,并与真菌培养法进行比较。结果检测临床标本中热带假丝酵母菌的灵敏度可达10 copies/ml,与人类基因组、细菌及其他真菌无交叉阳性反应。与真菌培养法的检测一致性好(Kappa值为0.916,P<0.01)。结论实时荧光定量PCR检测热带假丝酵母菌灵敏度高、特异性强,可直接用于各种临床标本中热带假丝酵母菌的检测,而且可大大缩短报告时间,为临床诊断提供可靠依据。
- 龙燕郑磊曾方银杨红玲王前
- 关键词:热带假丝酵母菌实时荧光定量PCR