国家自然科学基金(30570040)
- 作品数:3 被引量:48H指数:2
- 相关作者:余利岩赵莉莉魏玉珍张玉琴李秋萍更多>>
- 相关机构:中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技基础条件平台建设计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 广西山口红树林内生菌的分离及生理活性筛选
- 从广西山口国家红树林生态自然保护区采集10种真红树植物和5种半红树植物的根、茎、叶及胚轴等组织样品共计47份。经过表面消毒后粉碎,以几丁质、腐植酸等作为主要营养及能量来源设计了8种分离培养基,从植物组织中分离得到118株...
- 魏玉珍赵莉莉李秋萍苏静刘红宇张玉琴孙承航余利岩
- 文献传递
- 绿脓杆菌SecA ATPase抑制剂筛选模型的建立和应用被引量:1
- 2010年
- Sec途径(分泌途径,Secretion pathway)是蛋白质转运的主要途径。其中,SecA ATPase是蛋白质转运途径中的"动力泵",它通过ATP的水解循环驱使蛋白质前体穿过细菌内膜。SecA蛋白在细菌中是独有且不可缺少的。克隆和高效表达绿脓杆菌PasecAN75蛋白(绿脓杆菌SecA蛋白N端645个氨基酸残基组成的片段,大小约75 kD)并优化其ATPase酶活测定体系,在此基础上建立了更为灵敏的SecA蛋白ATPase活性抑制剂的筛选模型。运用该模型从化合物库的3220个样品中筛选得到可抑制绿脓杆菌SecA ATP酶的活性阳性化合物4个,从7196个微生物发酵液中得到66个阳性样品,筛选阳性率为0.67%(以抑制率大于30%为筛选阳性标准)。而后通过已建立的细胞水平筛选模型对其抗菌活性进行验证。研究结果表明3个化合物样品和6个发酵液样品在酶水平和细胞水平对绿脓杆菌SecA ATPase均有较好的抑制作用,值得进一步研究。
- 王宇赵莉莉李秋萍魏玉珍张玉琴余利岩
- 关键词:药物筛选模型化合物发酵液
- 广西山口红树林内生放线菌的分离、筛选及初步鉴定被引量:40
- 2010年
- 从广西山口国家红树林生态自然保护区采集8种真红树植物和5种半红树植物的根、茎、叶及胚轴等组织样品共计41份。经过表面消毒后粉碎,分别以几丁质、腐殖酸、木聚糖等作为主要营养及能量来源设计了8种分离培养基,从植物组织中分离得到118株放线菌。使用6种新药筛选模型对分离菌株进行了生理活性筛选,77株放线菌的发酵液样品在一个或多个药物筛选模型中显示为阳性,初筛阳性率为65.3%。对77株筛选阳性菌株进行的初步分类研究结果显示,其中44株属于链霉菌属,25株为小单孢属的菌株,3株属于糖丝菌属,3株为诺卡氏属菌株,1株是拟诺卡氏属菌株,1株是伦茨氏菌属的菌株。对一株在抗多重耐药检定菌HH22和降血脂模型上都显示出良好活性的菌株I07A-01824进行表型和基因型分析,确定I07A-01824为黄白链霉菌(Streptomyces albidoflavus)菌株。该研究显示,红树植物内生环境不仅仅孕育了丰富多样的内生放线菌,而且红树植物内生放线菌也是新型天然生理活性次级代谢产物的有效来源。
- 魏玉珍张玉琴赵莉莉李秋萍苏静刘红宇孙承航余利岩
- 关键词:红树内生放线菌
- 以SecA为靶点的新型抗绿脓杆菌药物细胞水平筛选模型的建立和应用被引量:9
- 2008年
- Sec途径(即分泌途径secretion pathway)是蛋白质转运的主要途径。其中,最为关键的组分之一是SecAATP酶,是蛋白质转运途径中的"动力泵",通过ATP的水解循环驱使蛋白质前体穿过细菌内膜,在细菌中是不可缺少的。我们推测抑制SecAATP酶活性的化合物,必然会在一定程度上抑制蛋白质的转运和分泌。通过绿脓杆菌与大肠杆菌SecA蛋白的互补作用,利用本实验室构建的高效表达SecA蛋白的基因工程菌,建立了SecA蛋白ATP酶活性抑制剂的细胞水平筛选模型。利用所纯化的绿脓杆菌SecA蛋白的ATP酶活测定体系,验证了所建立的细胞水平筛选模型具有一定的特异性。研究结果表明其中两个酯相组分在细胞水平和蛋白水平均具有活性,值得进行深入的研究。
- 赵莉莉李秋萍魏玉珍张玉琴余利岩
- 关键词:药物筛选绿脓杆菌蛋白转运