国家高技术研究发展计划(2009AA10Z4483730)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李琳胡乐鹏靳朝夏志平马丽敏更多>>
- 相关机构：军事医学科学院吉林大学北京军区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 日本乙型脑炎病毒小鼠脑内分布研究
- 2012年
- 为定位检测日本乙型脑炎病毒(JEV)在试验小鼠脑内分布情况,本研究建立了JEV的小鼠感染模型,取发病死亡小鼠的脑组织制作石蜡切片,利用抗JEV单克隆抗体,采用免疫酶组化方法对抗原进行组织学定位检测。试验结果表明,所建立的间接免疫酶组化方法灵敏度高,特异性好,证明了JEV选择性感染神经元,抗原阳性表达主要集中在脑干、神经节及大脑皮质。
- 马丽敏李琳张宁胡乐鹏李晔何叶任秀梅李志萍薛慧亮李丹靳朝夏志平
- 关键词：日本乙型脑炎病毒抗原分布
- 蜥蜴利什曼原虫在小鼠体内的分布及增殖研究
- 2012年
- 通过腹腔途径用体内含有荧光蛋白的蜥蜴利什曼原虫感染BALB/c小鼠,感染后采其脏器做冰冻切片,荧光染料染色后用荧光显微镜观察,并经PCR鉴定,结果显示蜥蜴利什曼原虫感染小鼠后,主要分布于心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏。另外,成功建立了利什曼原虫荧光定量PCR检测方法,并采用该方法检测感染蜥蜴利什曼原虫后BALB/c小鼠体内利什曼原虫的增殖情况,结果显示,感染13d内,BALB/c小鼠体内蜥蜴利什曼原虫呈波浪状增殖。这一结果为研究蜥蜴利什曼原虫感染人和动物的致病机理和免疫方法及疫苗研制等方面提供了基础理论依据。
- 李琳马丽敏任秀梅何叶李晔商利民胡乐鹏薛慧亮李丹靳朝夏志平
- 关键词：荧光染色实时荧光定量PCR
- 日本乙型脑炎病毒E抗原表位的筛选被引量：3
- 2012年
- 为筛选日本乙型脑炎病毒(JEV)的E抗原表位,本实验以抗JEV E蛋白的单克隆抗体(MAb)作为固相筛选分子,应用噬菌体表面展示技术,按消减、结合、洗脱、扩增的顺序筛选噬菌体七肽库,挑取噬菌体单克隆培养并采用MAb包被的ELISA鉴定,对阳性克隆测序分析,确定JEV E抗原模拟表位的氨基酸序列。设计合成包含该表位的E抗原15肽(E-365GGADSMSMAGMAVSYE-379)cDNA序列,与pGEX-KG构建重组表达质粒,诱导表达重组多肽并进行western blot验证。经过4轮筛选后,噬菌体得到高度富集,挑取单克隆采用MAb包被进行ELISA鉴定,有22个克隆呈阳性。对重组多肽进行western blot验证,结果表明该重组多肽能够特异结合兔抗JEV多克隆抗体。本实验成功筛选出JEV结构蛋白E的特异性噬菌体模拟表位,为开展用JEV抗原表位探索JEV的防制研究创造了条件,为多肽疫苗研制、药物筛选以及特异血清学诊断方法的建立提供重要依据。
- 马丽敏李琳胡乐鹏何晔李叶任秀梅靳朝夏志平王本旭
- 关键词：日本乙型脑炎病毒噬菌体表面展示技术E蛋白表位肽
