广东省自然科学基金(06300546)
- 作品数：7 被引量：38H指数：4
- 相关作者：张洹刘革修李军陆琰迟作华更多>>
- 相关机构：暨南大学广东药学院暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国务院侨办重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐血间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的研究被引量：5
- 2008年
- 目的探讨脐血间充质干细胞（MSC）向胰岛素分泌细胞分化的潜能及其分化诱导条件。方法分离脐血有核细胞，将其置于Mesencuh^TM培养基中进行培养，并利用贴壁法进行纯化、扩增。扩增后的脐山MSC用表皮生长因子（EGF）、β－巯基乙醇和高糖进行诱导。采用RT—PCR、胰岛素免疫细胞化学染色方法对诱导后的细胞进行鉴定，定量检测胰岛素分泌水平及其对葡萄糖刺激的反应性；移植到链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠体内，观测其往体内的降糖作用。结果诱导后细胞形态发生明显变化，细胞变圆且聚集成团；RT—PCR分析显示，细胞表达部分胰岛相关基因；细胞的胰岛素免疫细胞化学染色为附降；而且细胞能分泌少量[（0．37±0．06）mU／L]胰岛素，并对糖刺激具有反应性，刺激指数为1．76；诱导后的细胞移植能降低糖尿病小鼠的血糖。结论脐血MSC具有向胰岛素分泌细胞分化的潜能。
- 迟作华陆琰张洹
- 关键词：胎血间充质干细胞细胞分化胰岛素
- 小鼠胎盘组织细胞移植的抗衰老作用研究被引量：4
- 2010年
- 为研究小鼠胎盘细胞同种异体移植的抗衰老作用,将15月龄雌性BALB/c老年小鼠分为对照组(A)、短期移植组(B)以及长期多次移植组(C)共3组;取孕18 d小鼠胎盘,50目细胞筛网研磨胎盘,制备小鼠胎盘细胞悬液(1×107cells/ml),经腹腔注入B组和C组小鼠体内,1 ml/只,每10 d注射1次,连续注射3次。之后,再继续对C组小鼠不定期多次注射胎盘细胞悬液,直至实验结束。移植3个月后评价B组小鼠心脏结构和功能的各指标,心脏质量指数(心脏质量/体质量)和脾脏质量指数(脾脏质量/体质量),心脏、肾脏、肺脏、皮肤等器官组织学衰老程度分值,血清总超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量以及谷胱甘肽过氧化物酶活力,皆优于A组(均P<0.05);且B组小鼠存活日期为A组的1.7倍,而B、C组之间无统计学差异;同时,Y染色体原位杂交实验表明,B组和C组小鼠多个脏器内均可检测到长期存活的移植细胞。结果提示:移植小鼠胎盘细胞可在一定程度上延缓小鼠衰老进程。
- 李军张洹刘革修
- 关键词：胎盘抗衰老
- 人脐血间充质干细胞在体外向肝样细胞的诱导分化
- 2008年
- 目的 探讨脐血间充质干细胞（MSCs）在体外能否分化成肝细胞。方法 分离人脐血MSCs，培养传代，流式细胞仪进行细胞表面标志检测。取培养至第三代的细胞，接种于六孔板内，分两个阶段进行细胞分化的诱导，第一阶段采用含地塞米松（终浓度为0．5μmol／L，下同）、肝细胞生长因子（HGF，10ng／m1）、表皮生长因子（10ng／m1）及1×ITS（胰岛素-转铁蛋白-硒）的F12培养基诱导2周，第二阶段用含地塞米松（0．5μmol／L）、HGF（10ng／m1）、抑瘤素M（10ng／m1）及1×ITS的F12培养基继续诱导2周。诱导期间于倒置显微镜下观察细胞的形态变化；采用逆转录聚合酶链反应检测分化细胞的甲胎蛋白（AFP）、白蛋白、人细胞角蛋白18（CK-18）及酪氨酸氨基转移酶（TAT）基因的表达，以免疫荧光染色法检测分化细胞胞浆中AFP、白蛋白、CK-18的表达；用电子显微镜观察分化细胞的超微结构。结果 培养的脐血MSCs不表达CDl4、CD34及CD45，也不表达CD49f、CD54及HLA-DR；部分表达CD106；强表达CDl3、CD29及CD44。未分化的脐血MSCs不表达AFP、TAT及白蛋白基因，弱表达CK-18基因；诱导分化1周后可检测到AFP基因的表达，诱导分化4周后，不仅表达AFP、CK-18和白蛋白基因，还表达TAT基因。免疫荧光染色显示，未分化的MSCs胞浆中无AFP、白蛋白及CK-18的表达；分化细胞则可以检测到上述物质的表达。诱导至第4周的分化细胞，可见核仁大且明显，细胞核周围有板层状的内质网，胞浆中可见脂滴及簇状糖原，线粒体丰富，细胞表面有微绒毛。结论 脐血MSCs在合适的诱导条件下可以分化为肝样细胞。
- 迟作华张洹陆琰
- 关键词：胎血间质干细胞
- 再生障碍性贫血治疗中有待解决的主要问题被引量：9
- 2009年
- 李军刘革修
- 关键词：重型再生障碍性贫血贫血治疗骨髓造血功能衰竭造血干细胞移植难治性血液病
- NB4细胞分化来源的中性粒细胞与正常中性粒细胞的比较研究被引量：1
- 2012年
- 目的:探索白血病NB4细胞经全反式维甲酸(ATRA)诱导分化成熟后的中性粒细胞是否与正常中性粒细胞(PMN)之间存在差异,以了解急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞的生物学特性。方法:ATRA诱导NB4细胞24、48、72、96 h后,瑞氏染色观察细胞分化情况、原子力显微镜(AFM)观察细胞表面地貌形态变化;NBT还原实验、吞噬杀菌功能实验和趋化功能实验研究细胞功能。结果:NB4细胞经ATRA诱导72 h后,细胞基本分化成熟,细胞核出现分叶,核/质比下降,与正常PMN相比,细胞直径相对较大,NBT还原率下降,趋化功能下降,但吞噬杀菌功能正常。AFM探测细胞机械性能发现,随着ATRA作用时间的延长,NB4细胞发生不同程度的形变,细胞体积增大,高度降低,均方根粗糙度(Rq)和平均粗糙度(Ra)降低。结论:ATRA诱导NB4分化成熟后的细胞和正常PMN,在形态和功能上存在一定差异。
- 刘成成祝爱珍陈小宇陈伟胡小毛刘革修
- 关键词：全反式维甲酸NB4细胞原子力显微镜细胞分化
- 小鼠胎盘源干细胞移植对臭氧致衰老模型的影响被引量：8
- 2010年
- 目的研究小鼠胎盘源干细胞抗臭氧致衰老的功效。方法吸入臭氧法制造小鼠衰老模型;剖宫产取小鼠胎盘,密度梯度离心法分离、腹腔注射法移植小鼠胎盘源干细胞;Y染色体原位杂交法检测细胞植入情况;超声检查小鼠心脏;各器官做组织学衰老程度比较、评分。结果移植30d后治疗组小鼠心脏、肾脏、肺脏、皮肤等器官各衰老指标与模型组之间差异无统计学意义。结论单纯移植小鼠胎盘源干细胞不能有效地抗臭氧致衰老。
- 李军张洹王彦平颜亮徐浩弓健刘革修
- 关键词：衰老臭氧干细胞
- 体外诱导脐血间充质干细胞向胰岛β样细胞分化的初步研究被引量：15
- 2008年
- 探讨脐血间充质干细胞能否在体外向胰岛β样细胞分化,并探索其诱导条件。在无菌条件下采集正常产妇脐血,用羟乙基淀粉沉淀法分离脐血中的有核细胞,进而采用贴壁筛选法获得脐血间充质干细胞。纯化后的脐血间充质干细胞用表皮生长因子、β-巯基乙醇、高糖、激活素A和肝细胞生长因子进行诱导。观察诱导后的细胞形态变化,采用胰岛素免疫荧光染色对诱导后的细胞进行鉴定,定量检测胰岛素分泌水平及其对葡萄糖刺激的反应性。结果发现,经过诱导后,细胞形态发生明显变化,形态变圆而且聚集成团;诱导后细胞的胰岛素免疫荧光染色为阳性;而且细胞能分泌少量胰岛素,并对糖刺激具有反应性。由此提示,在体外,脐血间充质干细胞具有向胰岛β样细胞分化的潜能。
- 迟作华陆琰张洹
- 关键词：脐血间充质干细胞分化胰岛
