国家教育部博士点基金(20121202110014)
- 作品数:6 被引量:4H指数:1
- 相关作者:牛文彦张诗田胡芳张达刘倩更多>>
- 相关机构:天津医科大学天津医科大学代谢病医院天津医院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 利拉鲁肽对小鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运子4转位的作用被引量:1
- 2014年
- 目的 探讨胰高血糖素样肽1 (GLP-1)类似物利拉鲁肽对小鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运子4(GLUT4)转位的作用及可能机制.方法 在过表达带有HA表位GLUT4的小鼠骨骼肌细胞株C2C12(C2C12-GLUT4H),分为正常对照组、胰岛素组(100 nmol/L)、利拉鲁肽1组(100 nmol/L)、利拉鲁肽2组(1 000 nmol/L)、5-氨基咪唑-4-甲酰1-β-D呋喃糖苷(AICAR)(腺苷酸活化蛋白激酶激动剂)组(2 mmol/L).通过ELISA法测定细胞膜上C2C12-GLUT4HA,检测各组对C2C12-GLUT4HA细胞GLUT4转位的作用.应用Western blotting检测介导GLUT4转位的信号分子蛋白激酶B(AKT)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)磷酸化水平以及GLUT4蛋白表达水平.采用Student's t检验或单因素方差分析进行统计分析.结果 利拉鲁肽组的GLUT4转位较对照组相比明显上升[分别是对照组的(1.53±0.28)倍、(1.41±0.41)倍,F=13.4798,P<0.05];利拉鲁肽刺激组与对照组相比能够使pAMPK水平升高[分别是对照组的(1.79±0.31)倍、(1.54±0.18)倍,F=20.0999,P<0.05],而对pAKT无明显影响(P>0.05).结论 利拉鲁肽可通过激活AMPK从而促进小鼠骨骼肌细胞GLUT4转位的增加.
- 李竹倪长霖陈莉明牛文彦
- 关键词:利拉鲁肽腺苷酸活化蛋白激酶骨骼肌细胞
- AMPK对Rab-GAP的调节作用研究被引量:1
- 2018年
- 目的:检测激活型AMPK对Rab-GAP的调节作用,明确它们之间的上下游关系。方法:激活型AMPK腺病毒(AdAMPK-CA)感染C2C12小鼠骨骼肌细胞,通过细胞成像系统测定细胞中的荧光强度,明确AMPK-CA在C2C12细胞中表达。MTS试验确定没有细胞毒性的腺病毒浓度,Western blot检测AMPK底物ACC和两个Rab-GAP(TCB1D1和TCB1D4)的磷酸化。结果:AMPK-CA显著升高ACC的磷酸化,并磷酸化TBC1D1 Thr590和TBC1D4 Ser318。结论:AMPK直接磷酸化TCB1D1和TCB1D4。
- 廖健文岳莹莹牛文彦
- 关键词:磷酸化
- 肥胖和缺氧对小鼠原代脂肪细胞分泌TNFα的影响
- 2014年
- 目的:常氧和缺氧培养正常和肥胖小鼠的原代脂肪细胞,比较其分泌的肿瘤坏死因子α(TNFα)水平,探讨缺氧在脂肪组织慢性炎症中的作用。方法:高脂及普通饮食喂养4周龄C57BL/6雄性小鼠16周,测量体质量、葡萄糖耐量、胰岛素耐量;处死小鼠后取睾周脂肪组织,提取原代脂肪细胞,常氧或缺氧培养24 h后取上清,ELISA法测定培养基中TNFα的浓度。结果:高脂饮食喂养造成小鼠肥胖和胰岛素抵抗。常氧培养的肥胖小鼠脂肪细胞较正常小鼠的脂肪细胞分泌更多的TNFα;缺氧孵育比常氧孵育的正常小鼠脂肪细胞分泌更多的TNFα;但缺氧不进一步增加肥胖小鼠脂肪细胞分泌TNFα。结论:缺氧和肥胖均上调小鼠原代脂肪细胞TNFα的分泌,但缺氧不影响肥胖小鼠脂肪细胞分泌TNFα,提示肥胖小鼠脂肪细胞缺氧与其慢性炎症及胰岛素抵抗有关。
- 马晓芳童静凯牛文彦
- 关键词:肥胖缺氧肿瘤坏死因子A小鼠
- 电脉冲刺激的骨骼肌细胞条件培养基逆转内皮细胞胰岛素抵抗和功能障碍
- 2017年
- 目的:探讨电脉冲刺激的C2C12肌管细胞条件培养基对内皮细胞的影响。方法:提取常氧和缺氧培养的3T3-L1脂肪细胞上清液为条件培养基CM-N和CM-H,电脉冲刺激的C2C12肌管细胞上清液为条件培养基CM-EPS,单独或按比例混合分别孵育内皮细胞16 h。Western blot检测Akt、eNOS、IKK和NF-кB的磷酸化。结果:CM-H降低内皮细胞Akt和e NOS的磷酸化,并升高IKK和NF-кB的磷酸化。CM-EPS逆转此作用。结论:CM-EPS逆转CM-H造成的内皮细胞胰岛素抵抗并改善内皮功能。
- 赵一贺张畅牛文彦
- 关键词:内皮功能障碍胰岛素抵抗
- AMPK腺病毒载体在小鼠骨骼肌中的表达和作用被引量:1
- 2016年
- 目的:探讨注射AMPK腺病毒在小鼠骨骼肌中的表达和作用。方法:C57BL/6小鼠随机分为4组:(1)无任何处理的空白对照组。(2)肌肉注射腺病毒空载体(Ad-GFP)组。(3)肌肉注射Ad-GFP,48 h后腹腔注射AMPK激活剂AICAR组。(4)肌肉注射GFP标记的激活型AMPK腺病毒(Ad-AMPK-CA)组。注射腺病毒72 h后,处死小鼠,通过小动物成像系统测定骨骼肌中的荧光强度,检测腺病毒的表达,用Western blot方法检测ACC的磷酸化。结果:与空白对照组比较,注射腺病毒组的平均荧光强度显著增高。与病毒空载体组比较,注射AICAR组和Ad-AMPK-CA组的ACC磷酸化水平显著升高。结论:AMPK腺病毒能在小鼠骨骼肌中表达目的蛋白,调节AMPK的作用。
- 刘倩胡芳牛文彦
- 关键词:AMPK腺病毒小鼠骨骼肌
- 肥胖患者炎性单核细胞Caspase活性的研究被引量:1
- 2017年
- 目的:探讨外周血炎性单核细胞(CD14^+CD16^+)的Caspase活性与肥胖相关指标、空腹血糖(FBG)之间的相关性。方法:招募志愿者,测量身高、体质量、腰围,计算体质指数(BMI),血糖仪测定FBG。根据BMI分为3组:正常组、超重组、肥胖组。密度梯度离心提取外周血单个核细胞,流式细胞术检测CD14^+CD16^+单核细胞的数量以及细胞内Caspase活性。结果:肥胖组炎性单核细胞Caspase活性显著高于正常组和超重组,炎性单核细胞Caspase活性与BMI、腰围以及FBG正相关。结论:肥胖和高空腹血糖可能在炎性单核细胞Caspase活性升高中发挥作用。
- 张诗田张达牛文彦
- 关键词:肥胖空腹血糖单核细胞CASPASE