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国家自然科学基金(30871568)

作品数:15 被引量:236H指数:6
相关作者:江昌俊李叶云陈林波房超朱政更多>>
相关机构:安徽农业大学云南省农业科学院巢湖职业技术学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划安徽省自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 15篇中文期刊文章

领域

  • 11篇农业科学
  • 9篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 12篇茶树
  • 6篇基因
  • 4篇QRT-PC...
  • 3篇克隆
  • 3篇CDNA-A...
  • 2篇蛋白
  • 2篇叶片
  • 2篇诱导基因
  • 2篇原核表达
  • 2篇特性分析
  • 2篇冷诱导基因
  • 2篇抗寒
  • 2篇基因克隆
  • 2篇茶树叶
  • 2篇茶树叶片
  • 1篇蛋白提取
  • 1篇低温胁迫
  • 1篇电泳
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体

机构

  • 14篇安徽农业大学
  • 5篇云南省农业科...
  • 2篇巢湖职业技术...

作者

  • 14篇江昌俊
  • 7篇李叶云
  • 5篇陈林波
  • 4篇房超
  • 2篇韦朝领
  • 2篇高永亮
  • 2篇胥振国
  • 2篇陈聪
  • 2篇谭振
  • 2篇朱政
  • 2篇蔡玉华
  • 2篇梁名志
  • 2篇王琴
  • 1篇丁洲
  • 1篇刘修树
  • 1篇周小生
  • 1篇丁菲
  • 1篇袁星
  • 1篇余梅
  • 1篇叶爱华

传媒

  • 3篇激光生物学报
  • 3篇安徽农业大学...
  • 3篇茶叶科学
  • 1篇茶业通报
  • 1篇中国生物制品...
  • 1篇植物生理学通...
  • 1篇西北植物学报
  • 1篇西南农业学报
  • 1篇Agricu...

年份

  • 1篇2012
  • 7篇2011
  • 2篇2010
  • 4篇2009
  • 1篇2008
15 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
茶树叶片抗寒相关蛋白提取方法比较研究被引量:2
2011年
对茶树叶片采用3种蛋白质提取方法,并对SDS-PAGE电泳结果进行了比较分析。结果表明,发现利用改良丙酮沉降法提取蛋白,不仅提取效率高,而且杂质干扰少。电泳结果显示,蛋白条带清晰,数量多。利用这一方法对冷驯化下不同品种茶树叶片抗寒相关蛋白进行了研究,在云抗43和舒茶早中分别发现了与抗寒相关的23 ku下调蛋白和51 ku上调蛋白,获得了满意的蛋白SDS-PAGE分析结果。
高永亮王琴陈林波江昌俊
关键词:茶树蛋白提取电泳抗寒
茶树脱水素基因dhn2原核表达条件优化被引量:2
2011年
为了提高可溶性脱水素dhn2重组蛋白在大肠杆菌的表达量,研究了不同诱导条件对其表达的影响,包括诱导时间,诱导温度,IPTG浓度和初始诱导浓度。结果表明:重组表达载体pEASY-E1-dhn2在大肠杆菌中最佳诱导时间为4h,最佳诱导温度为30℃,最佳IPTG诱导浓度为0.8mmol/L,最佳诱导初始浓度为OD600=0.2。
房超李叶云常欣丁菲江昌俊
关键词:茶树脱水素
茶树冷诱导基因的AFLP筛选及其表达分析被引量:11
2011年
以中小叶茶树良种舒茶早和云南大叶种73-11为材料,于4℃低温处理4 d后,采用AFLP技术筛选出冷诱导下茶树差异表达基因并进行分析.结果显示,实验共获得41个差异片段(TDFs),其中舒茶早产生19条差异条带,73-11产生38条差异条带,两品种共有条带16条.所获得的差异片段按功能可划分为4类,即信号传导蛋白、转录因子、基础代谢相关蛋白、抗逆蛋白质,此外还有一些假设蛋白质以及未知蛋白.利用qRT-PCR对Kh1、Kh3和Kh11差异片段进行验证,结果显示这3个片段均被低温诱导,表达量上升.研究表明,茶树在低温胁迫下的逆境反应非常复杂,涉及多种代谢过程中的众多基因,而且大叶种比中小叶种对低温反应更为敏感.
陈林波李叶云房超朱政江昌俊
关键词:茶树CDNA-AFLPQRT-PCR
用cDNA-AFLP及其改进的方法分析茶树花发育过程中的基因表达(英文)被引量:5
2008年
利用cDNA-AFLP及其改进的cDNA-AFLP方法,分析茶树花发育过程中的基因表达。其发育过程中的基因表达可以分为3类:未成熟阶段发育特异基因;成熟阶段发育特异基因;茶树花发育过程中均表达的基因。利用改进的cDNA-AFLP方法,我们获得编码花药发育特异基因:pollen coat protein(Pcp)。用cDNA-AFLP方法,我们获得7个已知功能基因分别编码Cytchrome(P450),beta-primeverosidase,Dnaj-like protein,anthranilate phosphoribosyl transferase(AnPRT),Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenasesmall subunit(RubpS),alpha-tubulin和Carbonic anhydrase。用RACE方法获得pollen coat protein(Pcp),DnaJ-like protein和Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit等3个基因的全长,并已提交GenBank。
叶爱华余梅朱林江昌俊王朝霞韦朝领李叶云
关键词:CDNA-AFLP花芽
茶树α-tubulin基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量:4
2009年
根据茶树α-微管蛋白(α-tubulin)的mRNA全长序列(GenBank登录号DQ340766)设计引物,以RT-PCR方法扩增茶树α-tubulin基因,将扩增产物克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,并转化至大肠杆菌BL21trxB(DE3)中,经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后以包涵体形式表达。以纯化后的α-tubulin融合蛋白制备兔多克隆抗体,用Westernblot方法检测抗体特异性。结果显示α-tubulin蛋白以包涵体形式大量表达,以融合蛋白制备的抗体对茶树体内的α-tubulin具有良好的特异性。
谭振童鑫房超江昌俊陈聪
关键词:茶树原核表达多克隆抗体
Cloning and Sequencing of a Full-Length cDNA Encoding the RuBPCase Small Subunit (RbcS) in Tea (Camellia sinensis)被引量:3
2009年
This study was aimed to isolate ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit (RbcS) from tea plant [Camellia sinensis (L.) O. Kuntze]. In the study of transcriptional profiling of gene expression from tea flower bud development stage by cDNA-AFLP (cDNA amplified fragment length polymorphism), we have isolated some transcript-derived fragments (TDFs) occurring in both the young and mature flower bud. One of them showed a high degree of similarity to RbcS. Based on the fragment, the full length of RbcS with 769-bp (EF011075) cDNA was obtained via rapid amplification of cDNA ends (RACE). It contained an open reading frame of 176 amino acids consisting of a chloroplast transit peptide with 52 amino acids and a mature protein of 124 amino acids. The amino acids sequence presented a high identity to those of other plant RbcS genes. It also contains three conserved domains and a protein kinase C phosphorylation site, one tyrosine kinase phosphorylation site and two N-myristoylation sites. Analysis by RT-PCR showed that the expression of RbcS in tea from high to low was leaf, young stem, young flower bud and mature flower bud, respectively. The isolation of the tea Rubisco small subunit gene establishes a good foundation for further study on the photosynthesis of tea plant.
YE Ai-huaJIANG Chang-junZHU LinYU MeiWANG Zhao-xiaDENG Wei-weiWEI Chao-lin
关键词:RBCSTEA
SCAR标记在茶树种质资源鉴定中的应用被引量:2
2009年
SCAR标记是一种在RAPD技术的基础上发展起来的新型分子标记技术,提高了分子标记辅助选择育种的效率,在茶树种质资源的合理开发与利用中具有广阔的应用前景。运用优化后的RAPD反应体系对10个茶树品种的基因组DNA进行遗传差异分析,随机引物S89、S4分别在白毫早和福云6号中扩增得到长度为498bp、1 622 bp的差异片段,命名为BHZ498、FY1622。根据它们的测序结果分别设计了一对特异引物,BHZ498的特异引物为SB1/SB2;FY1622的特异引物为SC1/SC2,用这两对特异引物对10个茶树品种的基因组DNA进行扩增。引物SB1/SB2和SC1/SC2分别在白毫早和福云6号中扩增出唯一的一条扩增带,而这两对引物在其他供试茶树材料中均无相应的扩增带,结果表明已将BHZ498、FY1622标记成功转化成SCAR标记。
丁洲江昌俊陈聪谭振
关键词:茶树种质资源RAPD标记SCAR标记
茶树逆境生理及其分子生物学研究进展被引量:11
2009年
就国内外有关茶树逆境生理及其分子生物学研究作一概述。主要介绍茶树对强光、干旱、低温和重金属等非生物逆境和病虫害生物逆境的生理适应机制及其相关分子生物学研究所取得的进展。并提出和讨论该领域需进一步探讨的问题。
韦朝领李叶云江昌俊
关键词:茶树逆境生理
茶树冷诱导基因RAV的克隆与表达特性分析被引量:19
2010年
对利用cDNA-AFLP技术所获得的茶树低温诱导差异表达片段TDF,通过RACE方法获得含完整编码区序列的茶树RAV基因cDNA克隆,其开放阅读框编码361个氨基酸,包含两个保守的结构域AP2和B3,与多种植物RAV蛋白具有高度同源性。qRT-PCR分析表明,茶树RAV基因受低温、乙烯、NaCl等上调表达,最大表达量分别是诱导前的5.8、10.0和1.9倍。在成熟叶片、芽、嫩茎中RAV基因表达量相近,花蕾和嫩根中表达较低,而在种子中不表达。推测该基因在组织中的表达受到严格控制以及在响应非生物胁迫中发挥重要作用。
陈林波李叶云王琴高永亮江昌俊
关键词:茶树基因克隆QRT-PCR
直接用于PCR反应的芽胞杆菌基因组DNA抽提改良方法的建立被引量:5
2012年
目的建立一种直接用于PCR反应的芽胞杆菌基因组DNA提取的改良方法。方法用十六烷基三甲基溴化铵(Cetyltrimethyl ammonium bromide,CTAB)-溶菌酶-冻融裂解法提取蜡样芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、纳豆芽胞杆菌基因组DNA,用紫外分光光度计测定提取的基因组DNA在230、260、280 nm波长下的A值,计算DNA浓度,并以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增。结果采用改良CTAB法提取的基因组DNA A260/A280值均在1.8~2.0之间,A260/A230值均大于2.0,DNA浓度均大于110μg/ml;PCR扩增产物均可见1 500 bp的清晰条带,浓度较高,未见其他特异条带。结论 CTAB-溶菌酶-冻融裂解法提取芽胞杆菌基因组DNA简单、高效,并可用于PCR反应,适用于临床分子生物学检验。
胥振国蔡玉华袁星刘修树江昌俊
关键词:聚合酶链反应DNA
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