国家自然科学基金(30871566)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：李海英马春泉王玉婷曹洪祥杨成泉更多>>
- 相关机构：黑龙江大学肇东市农业技术推广中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 利用接头插入技术构建环型T载体(pYCQ1)被引量：1
- 2010年
- 人工设计接头序列,其特点为含有3′突出A末端,同时人工接头序列内部含有XcmⅠ、BspM901、AceⅡ酶切位点。利用人工接头3′突出A与线性的pMD18-T载体的3′突出T连接,将线性的pMD18-T载体改造成环形具有自身复制功能的pYCQ1载体,降低了实验室使用T载体的成本,同时增加了载体的克隆位点。利用pYCQ1作为T载体时,用XcmⅠ酶切(XcmⅠ限制性片段具有3′T末端)pYCQ1载体可以得到线性的3′T粘性末端的pYCQ1-T载体。实验验证,pYCQ1-T载体可以在受体菌E.coliDH5α中进行大量自我复制,并能够克隆1 800 bp的外源PCR产物。
- 杨成泉马春泉杨达梅蒋丹李海英
- 关键词：接头
- MADS-box基因cDNA片段在甜菜染色体上的定位
- 2008年
- 以甜菜MADS-box基因cDNA片段为探针,采用Southern杂交证实了其在甜菜基因组中为低拷贝序列;利用荧光原位杂交技术(FISH)将其初步定位在二倍体栽培甜菜(Beta vulgar-is)A2Y的第2号染色体上。研究成功地实现了小片段低拷贝的功能基因在甜菜染色体上的定位,为今后甜菜遗传物理图谱的构建提供了有效可行的方法。
- 王玉婷高庆和马春泉王冰汪立法曹洪祥杜萍张喜波李海英
- 关键词：MADS-BOX基因甜菜
- 甜菜M14品系特异表达基因BvM14-MADSbox启动子的克隆及序列分析被引量：1
- 2009年
- 甜菜M14品系是带有白花甜菜染色体的栽培甜菜单体附加系,其染色体组成中除了包含18条栽培甜菜染色体外,还附加有白花甜菜第9号染色体,具有无融合生殖特性,无融合生殖能够固定杂种优势。在前期工作中,通过SSH、RACE等技术获得了甜菜M14品系特异表达基因BvM14-MADSbox的cDNA全长。通过6种限制性内切酶分别酶切M14品系基因组总DNA,再与相应接头连接,构建了6个DNA步移文库。根据基因BvM14-MADSboxcDNA序列设计引物,通过染色体步移技术克隆出该基因的上游DNA序列。经生物信息学分析,推测获得了BvM14-MADSbox基因上游1 718 bp的启动子序列,该序列含有启动子的基本元件TATA-box、CAAT-box,和ARE、ERE、HSE、ABRE、CGTCA-motif等重要的顺式调控元件及一些光反应相关元件。该结果为今后BvM14-MADSbox基因的时空特异性表达调控机制奠定基础。
- 王玉婷曹洪祥马春泉王宇光郭锡伟李海英
- 关键词：甜菜M14品系启动子
