国家自然科学基金(81170935)
- 作品数：19 被引量：87H指数：6
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- 人参皂苷Rg1/ADSCs辅以透明质酸为基质对兔颞下颌关节骨关节病的改善作用被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨人参皂苷Rg1/ADSCs辅以透明质酸为基质对兔颞下颌关节骨关节病的治疗效果。方法:32只新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、对照组、实验组,每组8只。通过关节腔内注射木瓜蛋白酶法建立骨关节病模型,对照组与实验组造模成功2周后开始药物治疗。对照组关节上腔注射人参皂苷Rg1/ADSCs悬液0.6mL,实验组注射透明质酸/人参皂苷Rg1/ADSCs复合物0.6mL,每周1次。各组动物分别于用药第3、9周后处死,每次16只,每组4只。制备标本,行髁突软骨扫描电镜、组织学观察及实时定量PCR检测,采用SPSS17.0软件包对数据进行方差分析及t检验。结果:扫描电镜与组织学观察可见,实验组软骨病变区改善情况优于对照组。与模型组比较,实时定量PCR结果显示,实验组MMP-13表达与空白组相对持平但低于对照组,差异有显著性(P<0.05);实验组TIMP-1表达与空白组相对持平但高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1/ADSCs辅以透明质酸为基质对改善兔颞下颌关节骨关节病有明显作用。
- 郭延伟房殿吉李松
- 关键词：颞下颌关节骨关节病脂肪干细胞人参皂苷RG1透明质酸
- BMP-9/EPO双基因共转染ADSCs复合nHAC/PLA支架修复兔下颌骨缺损的实验研究被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨腺病毒介导BMP-9/EPO双基因共转染脂肪干细胞(ADSCs)复合nHAC/PLA支架材料促进体内成骨的可行性。方法:分离培养兔ADSCs,利用重组腺病毒构建携带BMP-9、EPO、BMP-9/EPO基因的表达载体,并转染至兔ADSCs。14 d后,在荧光显微镜下观察各组细胞荧光表达情况,计算病毒转染效率,采用Western免疫印迹检测各组细胞BMP-9及EPO蛋白的表达。50只大白兔随机分为5组,A组为空白组,B组为单纯材料组,C组为BMP-9/nHAC/PLA组,D组为EPO/nHAC/PLA组,E组为BMP-9/EPO/nHAC/PLA组。制备兔双侧下颌骨缺损模型,按照实验分组,将转染组细胞分别与nHAC/PLA支架复合培养后植入兔下颌骨缺损处,于4、8、12周在缺损处取材进行影像学、组织学检测及扫描电镜观察,比较各组动物下颌骨缺损修复情况。采用SPSS17.0软件包对结果进行统计学分析。结果:荧光显微镜下观察,BMP-9、EPO及BMP-9/EPO重组腺病毒均能稳定转染ADSCs,转染效率为80%~93%。转染后,BMP-9、EPO及BMP-9/EPO基因和蛋白均能稳定表达。转染后的ADSCs与nHAC/PLA支架复合,其骨缺损区修复情况优于对照组,且BMP-9/EPO/nHAC/PLA组成骨情况优于其他各组。扫描电镜下见转染组骨缺损与材料结合修复情况优于对照组,BMP-9/EPO/nHAC/PLA组修复最明显。结论:BMP-9、EPO均可转染ADSCs并稳定表达。与nHAC/PLA支架材料复合后,可显著促进下颌骨缺损的修复,为骨组织修复工程提供了新的选择。
- 张广德靳霞李荣亮杨世茂郭延伟房殿吉
- 关键词：脂肪干细胞促红细胞生成素
- TGF-β3转染脂肪干细胞复合OGP-HA-ChS支架对兔髁突受损软骨的修复作用被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨TGF-β3转染脂肪干细胞ADSCs复合OGP(成骨多肽)-HA(透明质酸)-ChS(硫酸软骨素)支架修复兔髁突受损软骨的可行性。方法:分离培养兔ADSCs,利用重组腺病毒构建携带TGF-β3基因表达载体,并转染至兔ADSCs。14 d后,观察细胞荧光表达情况并计算病毒转染效率,Western印迹检测TGF-β3蛋白表达。50只大白兔随机分为5组,A组为空白组,B组为TGF-β3转染ADSCs组,C组为OGP-HA-ChS支架组,D组为ADSCs复合OGP-HA-ChS组。E组为TGF-β3转染ADSCs复合OGP-HA-ChS组,兔颞下颌关节骨关节病模型制备完成后,按照实验分组进行材料移植。各组动物分别于材料移植第3、9周后取材,制备标本并行髁突软骨扫描电镜、组织学观察及实时荧光定量PCR检测。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:扫描电镜与组织学观察可见,D、E组软骨病变修复改善情况优于B、C组。与模型组比较,实时定量PCR结果显示,E组MMP-3表达与A组相对持平但低于C、D组,差异有显著性(P<0.05);E组TIMP-1表达与A组相对持平但高于C、D组,差异有显著性(P<0.05)。结论:TGF-β3转染ADSCs复合OGP-HA-ChS支架对兔髁突受损软骨具有修复作用。
- 郭延伟杨世茂
- 关键词：脂肪干细胞TGF-Β3颞下颌关节骨关节病
- 兔下颌骨来源骨髓间充质干细胞的体外培养及生物学特性被引量：4
- 2012年
- 背景:以往研究表明骨髓间充质干细胞的获取来源主要是股骨或髂骨,但下颌骨来源骨髓间充质干细胞的研究至今少有报道。目的:观察兔下颌骨来源的骨髓间充质干细胞体外分离、培养及其生物学特性。方法:体外分离培养兔下颌骨骨髓间充质干细胞,取第2或3代检测。MTT法检测细胞增殖,克隆形成试验检测细胞的克隆形成率变化,并对其进行成骨和成脂肪诱导分化。结果与结论:MTT法检测细胞增殖,细胞生长曲线显示下颌骨骨髓间充质干细胞经历潜伏期、对数生长期和平台期。细胞克隆形成实验显示,细胞呈成纤维集落形成单位外观。茜素红、油红O染色结果显示,成骨诱导、成脂诱导后形成钙结节及脂滴。结果证实,兔下颌骨分离出的骨髓间充质干细胞有强大的自我复制及增殖能力,具有多向诱导分化的潜能。
- 李松郭延伟房殿吉
- 关键词：下颌骨骨髓间充质干细胞生物学行为分化干细胞培养
- 杜仲水/醇提取物促进兔脂肪基质干细胞增殖及成骨分化被引量：12
- 2012年
- 背景：传统中药杜仲可以促进脂肪间充质干细胞成骨分化。目的：探讨杜仲水/醇提取物对脂肪基质干细胞的增殖作用和成骨分化影响。方法：取兔脂肪组织体外培养脂肪基质干细胞,传代3次后进行细胞增殖及成骨诱导分化。分为诱导培养基中分别含有杜仲水/醇提取物0.2,0.3,0.4,0.5g/L4个稀释度,对照组加入等量磷酸盐缓冲液。成骨诱导6d后进行各组细胞增殖活力的检测和碱性磷酸酶的测定,14d进行茜素红染色及钙化结节计数。结果与结论：杜仲水/醇提取物对脂肪基质干细胞的增殖无明显影响,但均可明显刺激上调碱性磷酸酶的活性,相同稀释度下杜仲醇提取物的调节作用大于水提取物,且在0.4~0.5g/L稀释度下对钙化结节的形成状况和数量有显著促进作用（P〈0.05）。说明杜仲水/醇提取物有促进脂肪基质干细胞向成骨细胞转化的作用,杜仲醇提取物作用优于杜仲水提取物。
- 郭延伟李松房殿吉
- 关键词：水提取物醇提取物脂肪基质干细胞成骨增殖
- SDF-1/NELL-1双基因转染促进脂肪干细胞体外成骨被引量：3
- 2022年
- [目的]观察腺病毒载体转染基质细胞衍生因子-1 (stromal cell-derived factor-1, SDF-1)和尼尔样-1型分子(Nellike molecule-l, NELL-1)基因对兔脂肪干细胞(adipose stem cells, ADSCs)体外成骨分化能力的影响。[方法]自兔分离培养ADSCs,分为单纯细胞组(original cell control, OCC)、空质粒转染组(empty vector control, EVC)、SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组,给予相应体外处理。成骨诱导14 d后,茜素红染色检测钙结节形成及碱性磷酸酶活性,Western blot检测和RT-PCR检测相应蛋白与m RNA表达水平。[结果]单纯SDF-1或NELL-1转染,或SDF-1/NELL-1两者共同转染均显著增加目标基因的蛋白表达水平(P<0.05),特别是共同转染同时增加两种基因标目蛋白的表达。茜素红染色钙结节计数和ALP活性检测方面,SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组均显著高于OCC组和EVC组(P<0.05),其中,SDF-1/NELL-1组最高。RT-PCR检测方面,SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组的OPN和OCN m RAN表达水平高于OCC组和EVC组(P<0.05),其中SDF-1/NELL-1组的OPN和OCN m RAN表达水平最高。[结论] SDF-1、NELL-1单独转染,或两者共转染ADSCs均可获得目标蛋白的高表达,以上两种基因单独转染,特别是两种基因共同转染,可显著增强ADSCs的体外成骨。
- 郭延伟王永曼杨世茂房殿吉
- 关键词：脂肪干细胞成骨
- 脂肪干细胞复合载淫羊藿苷支架材料对兔下颌骨缺损的修复被引量：13
- 2013年
- 目的:研究脂肪干细胞(ADSCs)作为种子细胞复合淫羊藿苷支架材料修复兔下颌骨缺损的效果。方法:体外培养ADSCs,茜素红染色检测骨向分化。实验组在骨缺损处植入ADSCs复合载淫羊藿苷支架材料;对照组1植入单纯纳米羟基磷灰石(n-HA)材料;对照组2植入淫羊藿苷/n-HA复合材料;空白组不植入任何材料。应用X线、组织学、扫描电镜观察并比较植入物与骨组织交界处的成骨修复情况。结果:实验组骨缺损区完全被骨组织修复,边界已融合;对照组1部分修复,有少量炎性渗出;对照组2大部分已修复,边界模糊;空白组基本未见修复。结论:ADSCs复合载淫羊藿苷支架材料具有骨缺损修复能力,其效果优于淫羊藿苷/n-HA材料及单纯n-HA材料。
- 宁兆荣郭延伟李松房殿吉
- 关键词：脂肪干细胞淫羊藿苷纳米羟基磷灰石骨缺损
- 下颌骨放射性骨坏死骨组织的电镜观察被引量：2
- 2015年
- 目的:在建立小型猪下颌骨放射性骨坏死动物模型基础上,应用电镜技术研究下颌骨放射性骨坏死形成、发展的超微结构动态变化过程。方法:对6只小型猪右侧下颌骨进行25 Gy和28 Gy一次性照射,建立小型猪右侧下颌骨放射性骨坏死动物模型,分别于照射结束后3、4、5个月切取右侧下颌骨放射性骨坏死部位死骨,制备标本,进行电镜检查分析。结果:照射后的早期骨胶原纤维即受到破坏,骨细胞先出现细胞膜破坏,随后胞质出现空泡,细胞器裂解,最后出现核变化。大剂量照射后骨细胞的破坏出现早而重,并且加速了骨细胞的裂解、死亡。结论:骨细胞细胞膜及细胞质较细胞核对放射线更为敏感,照射后骨细胞死亡过程首先发生在细胞膜及细胞质内,与以往认为细胞核损伤在先的观点不同。
- 李松房殿吉王占义翟璐璐宁兆荣郭延伟
- 关键词：放射性骨坏死小型猪电镜
- 小型猪下颌骨放射性骨坏死动物模型的建立被引量：2
- 2015年
- 目的探讨利用小型猪建立下颌骨放射性骨坏死（ORN）动物模型的可行性。方法应用三维适形放疗（3D-CRT）技术,采用电子直线加速器照射源对24只小型猪右侧下颌骨进行25 Gy和28 Gy一次性照射,于照射结束后2个月拔除双侧下颌第一磨牙,通过定期局部观察、X线、CT检查和组织病理学方法诊断下颌骨ORN的发生。结果照射结束后3～4个月,拔牙后的小型猪先后全部发生了下颌骨ORN,28 Gy＋拔牙组症状较重。结论 25 Gy单一剂量放射小型猪下颌骨＋拔牙能建立有效的、可信的下颌骨ORN模型,可用于ORN病因学及治疗等方面的进一步研究。
- 李松房殿吉王占义翟璐璐宁兆荣郭延伟
- 关键词：放射性骨坏死下颌骨小型猪动物模型
- 腺病毒介导HGF转染脂肪干细胞复合温敏型可注射水凝胶对兔颞下颌关节骨关节病髁突软骨的修复作用被引量：9
- 2017年
- 目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)转染脂肪干细胞复合水凝胶支架材料对促进兔颞下颌关节炎病理状态微环境中受损软骨修复的意义。方法:培养兔脂肪干细胞,利用腺病毒介导对其进行HGF转染并制备ADSCs/HGF/水凝胶支架材料。兔颞下颌关节上腔为注射区并分为5组,A组为空白对照组,B组为模型组,C组为单纯细胞治疗组,单纯脂肪干细胞腔内注射,D组为干细胞复合材料组,为造模后腔内注射干细胞复合可注射水凝胶支架材料,E组为转染后干细胞复合水凝胶注射。所有材料移植成功后各组动物分别于用药第3、9周后取材,制备标本并行髁突软骨扫描电镜、组织学观察及实时定量PCR检测,采用SPSS17.0软件包对数据进行方差分析及t检验。结果:扫描电镜与组织学观察可见,D、E组软骨病变区改善情况优于B、C组。与模型组比较,实时定量PCR结果显示,E组MMP-13表达与空白组相对持平但低于C、D组,差异有显著性(P<0.05);E组TIMP-1表达与空白组相对持平但高于C、D组,差异有显著性(P<0.05)。结论:腺病毒介导HGF转染脂肪干细胞复合可注射型水凝胶对兔颞下颌关节骨关节病受损软骨具有明显修复作用。
- 张广德李荣亮岳从雷杨世茂郭延伟房殿吉
- 关键词：脂肪干细胞颞下颌关节骨关节病
