北京市卫生局青年科学研究资助项目(QN2008-013)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：黄伯云何峰韩继生刘哲伟张阳德更多>>
- 相关机构：首都儿科研究所中南大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市卫生局青年科学研究资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑制Itk表达对Jurkat细胞分泌细胞因子的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 研究在Jurkat细胞上敲减Itk蛋白的表达对细胞增殖及炎症相关的细胞因子产生的影响,为Itk作为小分子药物靶标提供可行性实验依据.方法 针对Itk基因设计合成三个shRNAs,通过与pEGFP-C1-hItk质粒共转染,观察其抑制Itk-GFP融合蛋白的表达情况,筛选有效序列包装成慢病毒颗粒.将慢病毒颗粒感染Jurkat细胞,观测Itk蛋白的表达水平、细胞增殖情况及细胞因子的变化.结果 Itk-shRNA1感染Jurkat细胞后Itk基因的mRNA水平与细胞对照组及感染shRNAnon的对照组相比,敲减率约55%,差异有统计学意义P＜0.05.Itk蛋白的敲减导致Jurkat细胞在受刺激时增殖降低,以未感染病毒的Jurkat细胞受刺激后酶标仪检测的A值为1,Itk-shRNA1感染组平均比值为0.54,shRNAnon对照组平均比值为0.83,两组差异有统计学意义,P＜0.05.Itk-shRNA1感染组中IL-2、IL-5、IL-10及IFN-γ等细胞因子水平均较shRNAnon对照组低,差异有统计学意义,提示Itk蛋白的表达减少导致Jurkat细胞产生细胞因子减少.结论 抑制Itk表达能有效降低淋巴细胞的增殖,同时减少与炎症相关细胞因子分泌.
- 姚海兰何峰肖宗慧韩继生张阳德黄伯云刘哲伟
- 关键词：蛋白质酪氨酸激酶RNA慢病毒属
