南京医科大学科技发展基金(07NMUZ038)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：田兆方李玉红付雪梅封志纯杜江更多>>
- 相关机构：南京医科大学北京军区总医院南方医科大学更多>>
- 发文基金：南京医科大学科技发展基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子联合骨髓间充质干细胞对新生大鼠高体积分数氧肺损伤的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)联合骨髓间充质干细胞(MSCs)对新生大鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤的影响。方法采用贴壁选择法分离、培养、扩增大鼠骨髓来源MSCs,并以BrdU进行标记,注射前以PBS按要求剂量稀释;3日龄清洁级SD新生大鼠32只,置于950mL/L氧环境下7d,随机分为4组,每组8只;高氧加GM-CSF加mMSCs(联合组),高氧加GM-CSF(GM-CSF组),高氧加mMSCs(MSCs组),高氧对照组(对照组)。联合组和GM-CSF组大鼠于模型结束后皮下注射GM-CSF9μg/kg,联合组同时腹腔注射5×104MSCs,MSCs组腹腔注射5×104MSCs,对照组仅注射相同容积的PBS。空气环境下再饲养3d。肺组织病理学检测其辐射状肺泡计数(RAC);支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数检测其白细胞,并进行细胞分类计数;ELISA法检测其肺组织匀浆TNF-α、GM-CSF水平。免疫组织化学法观察BrdU阳性细胞分布情况。结果1.4组RAC,BALF中白细胞、中性粒细胞、巨噬细胞,肺组织匀浆TNF-α、GM-CSF水平比较均有统计学差异(F=14.59P=0.000,F=5.65P=0.004,F=3.11P=0.042,F=26.31P=0.000,F=73.65P=0.000,F=43.91P=0.000)。与对照组比较,其他3组RAC值均明显增加(Pa<0.05)、TNF-α水平均下降(Pa<0.05);GM-CSF组和联合组白细胞、中性粒细胞、巨噬细胞计数减少,GM-CSF水平增加(Pa<0.05),而MSCs组和对照组比较均无统计学差异(Pa<0.05)。2.免疫组织化学显示联合组及MSCs组可见BrdU染色阳性细胞,联合组Br-dU积分高于MSCs组[(1.85±0.33)vs(1.04±0.18)分,t=6.09P=0.000]。结论GM-CSF、MSCs对高氧暴露引起的新生大鼠肺损伤均具有保护作用,可能与抑制损伤部位的炎性反应有关,而联合治疗具有协同作用。
- 田兆方李玉红付雪梅封志纯
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子高氧间充质干细胞
- 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子联合骨髓间充质干细胞对高氧暴露新生大鼠肺损伤的干预作用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage—colony stimulating factor，GM—CSF）联合大鼠骨髓来源的间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）对高氧暴露新生大鼠肺损伤的影响。方法采用贴壁选择法分离、培养、扩增大鼠骨髓来源MSCs，并以4’，6二脒基-2-苯吲哚（4’，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）进行标记，注射前以PBS按要求剂量予以稀释；3日龄清洁级SD新生大鼠32只，置于95％氧环境下7d后，随机（随机数字法）分为4组，每组8只；高氧＋GM—CSF组＋MSCs组（A），高氧＋GM—CSF组（B），高氧＋MSCs组（c），高氧对照组（D）；A，B组大鼠于模型结束后皮下注射GM—CSF9μg/kg，A组同时还予腹腔注射5X104MSCs；C组予模型后腹腔注射5X104MSCs，D组仅注射相同容积的PBS，于注射后72h（13f3龄）处死全部动物，肺组织病理学检测辐射状肺泡计数（radical alveolar counts，RAC）；ELASA法检测肺组织匀浆TNF-α，IL-1β含量；免疫组化检测肺组织端粒酶逆转录酶（telomerase reverse transcrip tase，TERT）积分；荧光显微镜观察DAPI阳性细胞分布情况。结果（1）四组在RAC（P〈0．01）、肺组织匀浆TNFG（P〈0．01），IL-1β（P〈0．01）水平等方面差异均有统计学意义；与D组相比，A，B，C三组RAC值增加（P〈0．05），TNF-α,IL-1β水平下降（P〈0．05）；A组与B、A组与C组差异也均有统计学意义（P〈0．05）。（2）四组在TERT积分差异也有统计学意义（P〈0．01）；A，B组明显增高（P〈0．05）；而C，D两组 间差异均无统计学意义（P〉O．05）。（3）免疫荧光显微镜下A，C组可见DAPI阳性细胞，分别为（6．23±1．88），（5．10±0．91）（P〈0．05）。结论GM—CSF、MSCs对高氧暴露可引致新生大鼠肺损伤均具有保护作用，涉及多种作用机制，联合治疗具有协同作用。
- 田兆方李玉红付雪梅封志纯
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子高氧骨髓间充质干细胞
- 间充质干细胞对窒息新生大鼠合并多脏器损伤的影响
- 2012年
- 目的研究大鼠骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)对窒息新生大鼠引致的多脏器损伤的影响及相关机制。方法采用贴壁选择法分离、培养、扩增大鼠骨髓来源MSCs,以PBS按要求稀释供注射用;3日龄清洁级SD新生大鼠32只,随机分为窒息+MSCs组(A组)、空气+MSCs(B组)、窒息对照组(C组)、正常对照组(D组)四组;A、C组均先将大鼠置于密封瓶中密闭30min,再予氧罩吸氧2h[氧浓度(60±5)%];B、D组同时置于密封瓶中,但瓶口不密闭,也不予吸氧。模型结束后,A、B组每只大鼠腹腔注射5×104的MSCs,而C、D组仅注射相同容积的PBS,72h后(6日龄)处死全部动物,组织病理学进行心、脑、肺组织病理评分;ELASA法检测心、脑、肺组织匀浆TNF-α含量及血清TNF-α、CK-MB、cTnT、S-100b、NSE水平。结果 (1)心脏、脑、肺组织四组病理学评分分别是1.79±0.22,0.34±0.13,2.33±0.27,0.34±0.08;3.06±0.33,1.29±0.14,4.30±0.47,1.15±0.10;2.31±0.56,0.46±0.20,3.06±0.33,0.44±0.18,差异有统计学意义(P均=0.000)。(2)四组间血清TNF-α、CK-MB、cTnT、S-100b、NSE水平差异存在统计学意义(F=32.19,P=0.000;F=39.14,P=0.000;F=242.40,P=0.000;F=66.66,P=0.000;F=78.66,P=0.000)。(3)以上各指标结果在A、C组均明显高于D组(均P<0.05),C组高于A组(P<0.05)。(4)血清TNF-α水平与细胞因子及酶学改变呈正相关。组织匀浆TNF-α水平与相应组织病理评分也存在正相关(P均<0.05)。结论 (1)新生大鼠窒息模型合并有多脏器损伤。(2)MSC对窒息新生大鼠多脏器损伤具有保护作用,可能与抑制损伤部位的炎症反应有关。
- 赵赛田兆方李玉红
- 关键词：间质干细胞窒息细胞因子类动物
- 重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对高氧暴露新生大鼠肺损伤的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）对高氧暴露新生大鼠肺损伤的影响。方法32只3日龄新生大鼠随机分为高氧＋GM-CSF组、空气＋GM-CSF组、高氧对照组和空气对照组，每组8只。高氧组新生大鼠均采用95％的氧浓度暴露7d，空气组仅置于空气环境中；高氧＋GM—CSF组和空气＋GM—CSF组大鼠分别于实验的24、72和120h皮下注射GM—CSF，每次9μg／kg，高氧对照组和空气对照组于相同时点皮下注射相同体积生理盐水。支气管肺泡灌洗液细胞计数检测白细胞并进行细胞分类计数；ELISA法检测肺组织匀浆TGF-β1、TNF—α水平；HE染色检测肺组织辐射状肺泡计数（RAC）值；免疫组织化学方法检测肺组织端粒酶逆转录酶（TERT）积分和细胞核增殖抗原（PCNA）指数。结果（1）高氧＋GM-CSF组、高氧对照组支气管肺泡灌洗液中白细胞总数、分叶核细胞及巨噬细胞数均明显高于空气＋GM-CSF组和空气对照组（P均〈0．05）。（2）与空气对照组相比，高氧＋GM-CSF组、高氧对照组RAC[分别为（11．15±1．33）个和（9．59±0．67）个]显著降低，TNF—α[分别为（142．93±24．02）pg／ml和（224．09±41．91）μg／ml]和TGF—β1水平[分别为（1726．48±91．09）pg／ml和（2047．72±152．01）pg／ml]显著升高（P〈0．05）。（3）四组肺组织中均有PcNA阳性表达，绝大多数定位于气道和肺泡上皮细胞，表现为核染蓝色。与空气对照组相比，高氧＋GM—CSF组、高氧对照组PCNA表达明显下降（P均〈0．05），而高氧＋GM—CSF组表达高于高氧对照组（P〈0．05）。TERT阳性显色部位在胞核，主要分布于外周肺组织肺间隔和肺泡壁部位，呈散在分布。与其他三组比较，高氧＋GM—CSF组TERT表达明显增高（P均〈0．05）。结论GM-CSF对新生大鼠高氧肺损伤具有保护作用，可能与增加肺组织干细胞的增殖及改�
- 田兆方李玉红付雪梅封志纯杜江
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子高氧症肺疾病
