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黄颡鱼MHC classⅡ基因全长的克隆及饲料维生素D3对其组织表达的影响被引量：4: 2017年; 为进一步丰富鱼类MHC class Ⅱ基因的研究,同时也为进一步探讨低磷饲料中添加维生素D3对鱼类免疫功能可能的影响,实验利用RACE(Rapid-amplification of c DNA ends)即c DNA末端快速扩增技术,成功克隆出黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)class Ⅱ抗原基因,全长1074 bp,其中ORF(Open reading frame)708 bp,编码236个氨基酸,5′UTR(5′端非翻译区)78 bp,3′UTR(3′端非翻译区)259 bp。进行氨基酸序列比对分析得到:黄颡鱼MHC class Ⅱ基因ORF氨基酸序列与长吻逘(Leiocassis longirostris)的氨基酸序列相似度最高为69.5%,与锦鲤(Cyprinus carpio)的氨基酸序列相似度最低为50.4%。利用q PCR对黄颡鱼MHC class Ⅱ基因进行组织表达分析,结果表明MHC class Ⅱ在小肠、肝脏、鳃中表达较高;在肌肉、鳍条中表达较低;而在肾、脾脏、脑、头肾中表达量极低(几乎检测不到)。在低磷饲料中添加维生素D3显著诱导了该基因的上调表达。研究结果展示了黄颡鱼MHC class Ⅱ抗原基因的分子结构、组织表达以及维生素D3的作用,在降低磷排放的同时,为今后黄颡鱼免疫抗病及分子选育等方向的深入研究及免疫型饲料的使用奠定了基础。; 冯美惠陈沛雷文李大鹏王春芳; 关键词：黄颡鱼

提高黄颡鱼饲料磷利用效率和减少磷排放的策略: 本文研究了在实验室条件下几种提高饲料磷利用率和减少磷排放措施的效果.结果发现减少饲料中可利用磷的含量，提高了磷的利用效率，增加了鱼体脂肪含量.当饲料中可利用磷含量很高时，黄颡鱼幼鱼处于氧化应激状态，且不能依靠自身的抗氧化...; 王春芳唐琴段鸣鸣朱亚丘璇谢从新; 关键词：磷利用植酸酶有机酸黄颡鱼

鮰爱德华菌外膜蛋白OmpLC基因的生物信息学分析被引量：1: 2016年; 采用PCR方法从鮰爱德华菌基因组中扩增出外膜蛋白OmpLC基因,利用生物信息学相关软件和网络数据库,预测该基因编码产物的基本理化性质、亲疏水性、信号肽、跨膜性、二级结构、结构域及基序、以及三级结构,同时构建OmpLC同源基因的系统发育进化树。结果表明:该蛋白由360个氨基酸组成,分子量为39.407 k D,理论等电点为4.98,不稳定系数为18.26,是一种稳定的强亲水性蛋白,有信号肽,成熟蛋白无跨膜螺区。其二级结构中α螺旋、β折叠和无规则卷曲分别占6.67%、45.28%和48.06%,其空间结构为β桶状,属于OM_channels superfamily的gram_neg_porins成员。蛋白质多重序列比对和聚类分析显示,该蛋白序列与OmpLC蛋白(AEQ59632、AEQ59639)具有高度同源性,且在系统发育树上与二者聚为一簇。鮰爱德华菌OmpLC的生物信息学分析不仅为进一步探索该蛋白的功能提供参考资料,也为研究鮰爱德华菌的感染和致病机理,研制相关疫苗提供理论依据。; 黄艳青刘港彪王利; 关键词：外膜蛋白生物信息学

黄颡鱼幼鱼植物性蛋白饲料中添加柠檬酸替代磷酸二氢钠合适水平的研究被引量：2: 2015年; 本实验探究黄颡鱼幼鱼植物性蛋白基础饲料中添加柠檬酸替代磷酸二氢钠的合适水平。共设置7个处理组：阳性对照组DP（只添加Na H2PO420 g/kg）和阴性对照组DN（不添加柠檬酸和Na H2PO4）;实验组D0（柠檬酸2 g/kg＋Na H2PO420 g/kg）、D25（柠檬酸2 g/kg＋Na H2PO415 g/kg）、D50（柠檬酸2 g/kg＋Na H2PO410 g/kg）、D75（柠檬酸2 g/kg＋Na H2PO45 g/kg）、D100（柠檬酸2 g/kg）。实验组中柠檬酸替代Na H2PO4的比例分别为0%、25%、50%、75%和100%,分别饲养初始规格为（3.5±0.1）g的黄颡鱼,每个处理组3口缸,每缸50尾,投喂8周。实验结束后,对鱼体生长性能、营养物质的表观消化率、全鱼营养成分、脊椎骨元素含量、抗氧化性能等指标进行分析。结果显示：（1）饲料中添加柠檬酸替代磷酸二氢钠实验组与阴性对照组相比,显著提高了黄颡鱼的末体质量、增重率、特定生长率,降低了饵料系数,但与阳性对照组相比差异不显著。替代比例为0%~50%时,生长表现最好;（2）实验组中柠檬酸替代磷酸二氢钠与阴性对照组相比,显著提高了干物质、蛋白质以及磷的表观消化率,降低了粪便N和P的含量,与阳性对照组相比差异不显著,且替代比例越高,粪便中N和P含量越低;（3）实验组中添加柠檬酸替代磷酸二氢钠对全鱼水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分含量无影响（P〉0.05）;但与阴性对照组相比显著提高鱼体Ca、M g、P、Cu的储积量（P〈0.05）,且随着替代水平的增加呈降低趋势,在0%~75%替代水平储积量最高;脊椎骨各元素含量与阴性对照组相比有所提高,但在替代组与对照组间无显著性差异;（4）柠檬酸替代无机磷在25%~75%水平与阴性对照组相比,显著增强了过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶的活性,但对丙二醛、免疫球蛋白M、血磷和血钙的含量无影响。综上所述,为保证鱼体正常生长,减少养殖环境污染,降; 程年成雷文冯美惠王春芳; 关键词：黄颡鱼柠檬酸磷酸二氢钠磷利用率

维生素D_3对黄颡鱼幼鱼抗氧化能力及免疫功能的影响被引量：18: 2014年; 研究饲料中添加维生素D3对黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）幼鱼血清和肝脏抗氧化功能以及血清补体C3、C4含量的影响。试验选取黄颡鱼（2.0±0.0）g 900尾,随机分为6组,每组设3缸重复,每缸50尾鱼。基础饲料以酪蛋白和明胶为蛋白源,糊精为糖源,豆油为脂肪源。在基础饲料中添加包膜饲料级维生素D3配制成维生素D3含量分别为0,324,1 243,3 621,8 040和22 700 IU/kg的6组饲料。试验持续12周。结果显示,与对照组相比,维生素D3添加组血清和肝脏超氧化物歧化酶（SOD）活性显著提高（P〈0.05）,而肝脏脂质过氧化物（LPO）含量显著降低（P〈0.05）,但维生素D3最高剂量添加组LPO含量升高。各维生素D3添加组肝脏过氧化氢酶（CAT）活性呈先升高后降低趋势（P〈0.05）,其中维生素D3含量为3 621 IU/kg组活性最高。血清CAT活性、C3含量、C4含量,血清和肝脏丙二醛（MDA）含量不受饲料中维生素D3含量影响。结果表明,维生素D3含量为324-3 621 IU/kg的饲料可提高黄颡鱼幼鱼抗氧化能力。; 段鸣鸣王春芳谢从新; 关键词：维生素D3 抗氧化功能补体C3 补体C4

草鱼钠磷协同转运载体SlC34a2基因的克隆及组织表达分析: 2016年; 为了揭示草鱼对磷的吸收机制,运用RT-PCR和快速扩增c DNA末端方法,从草鱼(Ctenopharyngodon idella)肠中克隆获得钠磷协同转运载体基因Slc34a2,该基因全长为2446 bp,包含了1938 bp的开放阅读框,47 bp的5′非编码区(Untranslated region,UTR)和461 bp的3′UTR,编码645个氨基酸。草鱼SLC34A2蛋白的分子式为C3215H5125N801O902S30,分子量大小为70.39 k D,等电点为5.68,总平均疏水指数为0.458。对草鱼SLC34A2蛋白结构和功能预测分析,发现SLC34A2蛋白有11个跨膜域,1个半胱氨酸富集区,且N-端在胞外而C-端在胞内,也在第二个细胞外环中发现4个N-糖基化位点。用邻接法构建系统进化树,发现草鱼Slc34a2基因与硬骨鱼类聚类为一支,且草鱼SLC34A2蛋白与鲤(Cyprinus carpio)和斑马鱼(Danio rerio)SLC34A2的相似性最高,分别为90.3%和87.0%。实验采用了实时荧光定量PCR对草鱼Slc34a2 m RNA进行组织表达分析,结果表明Slc34a2 m RNA在组织中广谱表达,且在肠中表达最高,其次是肝脏、鳃、肾脏、脾脏、皮肤、肌肉、脑和头肾。实验为以后研究提高鱼对磷的利用和减少磷的排放奠定分子基础。; 陈沛黄艳青谢从新王春芳; 关键词：草鱼分子克隆基因表达

提高黄颡鱼饲料磷利用效率和减少磷排放的策略: 本文研究了在实验室条件下几种提高饲料磷利用率和减少磷排放措施的效果。结果发现减少饲料中可利用磷的含量,提高了磷的利用效率,增加了鱼体脂肪含量。当饲料中可利用磷含量很高时,黄颡鱼幼鱼处于氧化应激状态,且不能依靠自身的抗氧化...; 王春芳唐琴段鸣鸣朱亚丘璇谢从新; 关键词：磷利用植酸酶有机酸黄颡鱼

饲料VD3水平对黄颡鱼转录组差异基因表达的影响被引量：4: 2016年; 为研究饲料中添加维生素D_3对黄颡鱼基因表达的影响,实验基于RNA-Seq技术对用添加不同水平维生素D_3[0(VD0),1243(VD2),22700(VD20)IU/kg]的饲料喂养的黄颡鱼肾脏和小肠的转录组数据进行分析。通过对305 568982条原始reads的筛选和排除,得到了83 265条unigenes,平均长845.38 nt,N50为1620 nt。利用Blast等相关软件对数据进行深度分析,得到功能注释基因共29 224个。根据GO富集分析发现,差异表达基因主要集中在细胞过程、代谢通路、生物调控等通路中,KEGGpathway富集分析结果显示,代谢通路涉及基因最多,有1532个。相对于对照组,添加1243和22700 IU/kg的VD_3(VD0 vs VD2/VD0vs VD20)可得到共同上下调基因共380个,其中上调基因266个,下调基因114个;3种水平下共同上下调的基因共2 1个,其中上调基因4个,下调基因1 7个。研究表明,在饲料中添加不同浓度维生素D_3会对黄颡鱼的生长代谢和生物调控等相关基因表达产生影响,且不同浓度实验组,相关基因的表达存在差异。本实验通过对差异表达基因的后续分析及预测,为黄颡鱼的生长代谢及疾病预防等方面的研究提供了丰富的数据来源。; 冯美惠陈沛段鸣鸣王春芳; 关键词：黄颡鱼基因表达

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国家自然科学基金(31172421)

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